Toxicologia analíticaProfa. Dra. Patrícia da Fonseca Leite

Fundamento

• Quantificar e/ou identificar toxicantes ou seus metabólitos

• Desafios:

• Disponibilidade de amostra• Métodos analíticos confiáveis

Finalidades

• Forense• Análises de urgência• Alimentos• Controle da dopagem• Monitorização do grau de exposição• Ocupacional• Ambiental• Terapêutica• Farmacodependência

Forense

•nexo causal de morte ou dano infligido ao homem•Crimes ambientais•Ações de indenizações por doenças ocupacionais•Doping

Urgência

• Identificar ou confirmar intoxicação aguda

• Prazo máximo de 24 horas

Alimentos

• Avaliação dos níveis residuais de contaminantes em alimentos• Possíveis causas de níveis excessivos• Estabelecer causa entre ingestão de alimento contaminado e efeito

tóxico• Diferente de controle de qualidade de alimentos

Controle da dopagem

• Detectar o uso de substâncias listadas como proibidas ou seus produtos de degradação ou marcadores em competição ou fora dela

Contraprova confirma doping do cavalo de Rodrigo de Pessoa em PequimSegundo exame também aponta a existência da substância Nonivamide

Monitorização do grau de exposição• Monitorização biológica da exposição ocupacional

• Quantificação de agentes tóxicos, produtos de biotransformação ou alterações de parâmetros bioquímicos em indivíduos expostos ocupacionalmente

• Monitorização ambiental• Monitorar níveis de agentes químicos contaminantes do ambiente

Monitorização do grau de exposição• Monitorização terapêutica

• Monitorar níveis plasmáticos de fármacos visando assegurar a máxima eficácia da terapia

• Monitorização farmacodependência• Exposição a drogas de abuso

Considerações sobre as amostras• Depende da finalidade das análises, da natureza química, concentração do

analito, indicador que se pretende conhecer ou quantificar

• Ex. post-mortem – sangue periférico, cardíaco, fígado ou urina. Humor vítreo para investigação de etanol

• Ex. morte por substâncias voláteis ou gases – tecidos do cérebro e pulmões

• Ex. exposições a longo prazo por metais pesados – cabelo e unha

• Ex. corpo em putrefação – emprego de larvas

• Ex. análises de urgência – líquido de lavagem gástrica

• Ex. dopagem, monitorização terapêutica, monitorização biológica - sangue e urina

• Ex. monitorização ambiental – água, ar, sedimentos

Métodos de análise

• Triagem• Métodos gerais• Verificar presença ou ausência de determinada classe ou grupo de compostos• Imunoensaios• Cromatografia em camada delgada

• Confirmatórios• Seletivos

CCD

Revelação

Desenvolvimento

CCD

• Cálculo do fator de retenção

Métodos confirmatórios

• Espectrometria de massas

Métodos seletivos

• Espectrofotometria UV/Vis• Cromatografia gasosa• Cromatografia líquida de alta eficiência

Espectrofotometro CG CLAE

Tratamento de amostras/matrizes• Remoção de interferentes endógenos e analitos ligados às proteínas• Precipitação de proteínas

• Liberação dos analitos da amostra• Hidrólise ácida• Hidrólise alcalina• Hidrólise enzimática

Tratamento de amostras/matrizes• Extração dos analitos• Extração líquido – líquido• Extração em fase sólida• Microextração em fase sólida• Microextração em fase líquida• Extração em fluído super crítico

• Derivatização dos analitos• Melhorar condições cromatográficas

Tratamento de amostras/matrizes

Extração líquido - líquido

Extração fase sólida

Outras considerações

• Boas práticas de laboratório• Validação de métodos analíticos