EspectrofotometriaEspectrofotometria

Prof. Rodrigo Alves do CarmoProf. Rodrigo Alves do Carmo

• A espectrofotometria baseia-se na absorção da radiação nos comprimentos de onda entre o ultravioleta e o infravermelho.

• A chamada radiação luminosa corresponde a uma gama de comprimentos de onda que vai desde o ultravioleta ao infravermelho no espectro da radiação eletromagnética.

Espectro da luz visível

UV 400 500 600 700 Infra- vermelho

Redução do Conteúdo Energético

• O espectro do visível está contido essencialmente na zona entre 400 e 800 nm.

As substâncias absorvem fotons.

Esta absorção é feita de várias maneiras e se verifica somente em certos

http://web.umr.edu/~gbert/color/spec/Aspec.html

Objeto sólido opaco(reflete a luz)

Objeto líquido translúcido(deixa passar a luz)

Um objeto vermelho, por exemplo, aparenta ter esta coloração por absorver fotons de alta energia (menor , refletindo ou deixando passar fotons de menor energia

(maior ,

Os fotons de entre 400 nm e 700 nm sensibilizam as células da retina....

• Um espectrofotômetro é um aparelho que faz passar um feixe de luz monocromática através de uma solução e mede a quantidade de luz que foi absorvida por essa solução.

• Usando um prisma o aparelho separa a luz em feixes com diferentes comprimentos de onda.

• Pode-se assim fazer passar através da amostra um feixe de luz monocromática (de um único comprimento de onda).

• O espectrofotômetro permite-nos saber que quantidade de luz é absorvida a cada comprimento de onda.

Transmitância é a percentagem de luz emitida, enquanto que absorbância é a

quantidade de luz absorvida

http://web.umr.edu/~gbert/color/spec/Aspec.html

Botão zero (0% T)

Porta-tubos

Botão 100 (100% T)

Seletor de filtros

Lâmpada

Interruptor

Medidor

Esquema de um Espectrofotômetro

Princípios de absorção da luz

• 1. A absorção da luz é tanto maior quanto mais concentrada for a solução por ela atravessada.

• 2. A absorção da luz é tanto maior quanto maior for a distância percorrida pelo feixe luminoso através das amostras.

Lei de Lambert-BeerLei de Lambert-Beer• A absorvância da luz a cada

comprimento de onda é diretamente proporcional à concentração da solução.

• Esta linearidade deixa de ocorrer a concentrações muito elevadas da substância. Nesses casos deve-se diluir previamente a amostra.

A intensidade de cor é proporcional à concentração da substância que se quer medir

solução com concentração

conhecida

Solução comconcentração desconhecida

?????

Substância a ser medida

Reativo de cor Composto corado

+ =

Compara-se a cor dos dois tubos através da medida quantitativa da absorção de luz pelas

soluções

MétodoMétodo

O tubo “branco”contém todos os reativos menos a substância a ser dosada (concentração zero).

Ele é fundamental para o ajuste do fotocolorímetro em A = zero e T = 100%, ou seja, ele elimina a

interferência indesejável de outros componentes da solução.

Este ajuste deve ser feito antes de qualquer medida.

Preparação do Tubo Branco

Botão zero (0% T)

Botão 100 (100% T)

Construção da Curva de CalibraçãoUtiliza-se a curva padrão para evitar o inconveniente

do erro de aferição

2. Medem-se as respectivas absorbâncias.

3.

1. Prepara-se uma série de tubos com concentrações crescentes da substância que se quer medir na amostra x

Abs.Os dados sãocolocados em um gráfico.

Conc.