espectrofotometria- [modo de compatibilidade]

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ESPECTROFOTOMETRIAMtodoanalticobaseadonapropriedadequetmmuitas espcies de absorver radiaes ultravioleta evisvel.ESPECTROFOTOMETRIAQuandoaluzabsorvidaporumaamostra, aenergiaradiantedofeixe de luz diminui. Aenergia radiante, P, a energia por segundo porunidade de rea do feixe de luz.FONTE DE LUZSeletor de comprimento de onda(monocromador)AmostraDetetor de LuzPoPbTransmitncia (T): definida como a frao da luz original que passa pela amostra:T=PPoPortanto, T est entre 0 e 1. Atransmitncia percentual simplesmente 100T e fica entre 0 e 100%.ESPECTROFOTOMETRIA - LEI DE BEERAbsorvncia (A): T APPolog log =||.|

\|=Se nenhuma luz absorvida, P = PoeA = 0. Se 90% da luzsoabsorvidos, 10% so transmitidos e A= 1.Relao entre transmitncia e absorvncia:P/Po%T A1 100 00,1 10 10,01 1 2ESPECTROFOTOMETRIA - LEI DE BEERcaminho tico bPoPEspcie absorvente deconcentrao cLei de Beer: A= abcESPECTROFOTOMETRIA - LEI DE BEERLei de Beer: A= abc- Aabsorvncia diretamente proporcional concentrao, c, deespcies absorventes de luz na amostra.- Aabsorvncia adimencional.- A grandeza a chamada de absortividade e caracterstica de cadasubstncia que nos indica a quantidade de luz absorvida numdeterminado comprimento de onda.- Quando a concentrao, c, da espcie dada em mol/l, e o caminhotico, b, dado em cm, a grandeza a chamada absortividade molar e representada por c (psilon).ESPECTROFOTOMETRIA - LEI DE BEERLei de Beer: A= abcAbsorvnciaconcentraoCurva AnalticaESPECTROFOTOMETRIA - LEI DE BEERLei de Beer: A= abcPadresdeFe(fenantrolina)32+paraanliseespectrofotomtrica. Osbales volumtricos contm Fe na faixa entre 1 mg/Lat 10 mg/L.DESVISOS DA LEI DE BEERAbsorvnciaconcentraoCurva Analtica- Uma linha reta passando pela origem denota a obedincia estrita a lei de Beer.- Quando a absorvncia varia de maneira no linear com respeito concentrao, h um desvio da lei de Beer.DESVISOS DA LEI DE BEER- Desvios Reais: limitaes da lei de Beer.- Desvios Aparentes:QumicosInstrumentaisouDESVISOS DA LEI DE BEERDesvios Reais- Interao entre os centros absorventes: interaesalteram a distribuio de carga das espcies, fazendo variara energia necessria para a excitao.- Variao do ndice de refrao com a concentrao:para baixas concentraes, n praticamente constante,entretanto para concentraes mais altas, o ndice derefrao pode variar sensivelmente.DESVISOS DA LEI DE BEERDesvios Qumicos- Associao, dissociao ou reao da espcieabsorvente.- Equilbrioqumicofacilmenteafetadopordiluio,variao de concentrao de um componente etc.ESPECTROFOTOMETRIA DIRETA- Baseia-se na medida da absorvncia e a a relao desta medidacom a concentrao da espcie de interesse.- Deve-se fixar a faixa espectral mais apropriada para a medidada absorvncia.- Normalmente a medida de absorvncia realizado em um correspondente a ummximo de absoro: a variao daabsorvnciapor unidadedeconcentraomaior nesteponto(maior sensibilidade); melhor obedincia lei de Beer; medidasde absorvncia menos sensveis incerteza no ajuste doinstrumento ao .ESPECTROFOTOMETRIA DIRETA450 500 550 600 650 7000,000,020,040,060,080,10Absorvnciacomprimento de onda (nm)Espectro do complexo Cr(III)- EDTAANLISE DE MISTURADETERMINAO ESPECTROFOTOMTRICA SIMULTNEA- Cada centro atua de modo independente sobre a radiao.- Alei de Beer pode ser estendida a mistura de vrioscomponentes.- Cada espcie possui absortividade diferente e as absorvnciasse adicionam.- Para uma mistura de dois componentes I e II em certo :II II I Ibc a bc a A + =CARACTERSTICAS DAS REAES USADAS NA ESPECTROFOTOMETRIANormalmente, oconstituinteadeterminardeveserconvertidoem uma espcie absorvente mediante uma reao apropriada.NSN NHO Zn+2NSN NONSN NOZn++2 H+2CARACTERSTICAS DAS REAES USADAS NA ESPECTROFOTOMETRIA- Sensibilidade: quanto maior a sensibilidade, menor a quantidade desubstncia com ele determinvel.- Seletividade: reao com a menor quantidade de espcies.- Reprodutibilidade: quantidades constantes do analito devemproduzir quantidades constantes de substncia absorvente.- Estabilidade: as solues no devemsofrer alteraes comotempo.- Obedincia Lei de Beer: so mais convenientes.O ESPECTROFOTMETRO- Sistema para medir a absorvncia da luz.lmpadalentes/fendamonocromadorCompartimentopara amostradetetoramplificadorprocessadorPARTES DO ESPECTROFOTMETROFontes de Luz- Lmpada de tungstnio: fonte de radiao visvel einfravermelho prximo. Opera numa temperatura de 3000 K eproduz radiao til na faixa de 320 a 2500 nm.- Lmpada de arco deutrio: usado na espectroscopiaultravioleta. Neste tipo de lmpada uma descarga eltricadissocia o D2 e emite radiao de 200 a 400 nm.-Lmpadadevapordemercrioougsxennio:regiesvisvel e ultravioleta.- Globar: um basto de carbeto de silcio aquecido prximo a1500 K pela passagem de uma corrente eltrica, obtendo-se umafonte de radiao infravermelho (4000 a 200 cm-1).PARTES DO ESPECTROFOTMETROMonocromadores- Filtros- Prismas- Rede de DifraoPARTES DO ESPECTROFOTMETROMonocromadores - PrismaPARTES DO ESPECTROFOTMETROMonocromadores - Rede de DispersoDispositivo constitudo de uma srie de ranhuras muitoprximas, paralelas e eqidistantes traadas sobre uma placade vidro, metlica ou de um polmero.PARTES DO ESPECTROFOTMETROMonocromadores - Rede de DispersoDispositivo constitudo de uma srie de ranhuras muitoprximas, paralelas e eqidistantes traadas sobre uma placade vidro, metlica ou de um polmero.PARTES DO ESPECTROFOTMETROMonocromadores - FiltrosOperam transmitido faixas espectrais mais limitadas.PARTES DO ESPECTROFOTMETROCompartimento para a amostraPara a espectroscopia UV-visvel, uma amostra lquida geralmente colocada numa clula chamada de cubeta que possuifaces planas, normalmente de slica fundida.PARTES DO ESPECTROFOTMETRODetetoresUm detetor produz sinal eltrico quando ele golpeadopor ftons.PARTES DO ESPECTROFOTMETRODetetores - Tubo FotomultiplicadorESPECTROFOTMETRO - FEIXE SIMPLES ESPECTROFOTMETRO - FEIXE DUPLO Permite correo automtica para as mudanas daintensidade da fonte, da sensibilidade do detetor comotempo e comprimento de onda.ESPECTROFOTMETRO - FEIXE DUPLO ESPECTROFOTMETRO MULTICANALESPECTROFOTMETRO MULTICANALAnliseQuant it at ivaEspcie a ser analisada deve absor ver luz em conhecido de absor o deve ser dif er enciado de out r assubst ncias pr esent es na amost r aEx: Anlise de Fe2+(incolor ) em amost r a desconhecida Fe2++ 3 f er r ozina2- (f er r ozina)3Fe4- max. = 562 nm1. Pr epar o de um br anco cont m t odos os r eagent espr esent es na soluo da espcie aser analisada, menos a espcie a seranalisada subt r ai-se Absor bncia dobr anco da Absor bncia da amost r aant es de r ealizar -se os clculos2. Const r uo da cur va decalibr ao medida da absor bncia de vr iassolues de concent r ao conhecidada espcie a ser det er minadaANLI SEDEUMAMI STURA quando exist e mais de uma espcie absor vedor a (X,Y,Z)soma das absor bncias das vr ias espciesA = cxb[ X]+ cYb[ Y]+ czb[ Z]+ ...VANTAGENSReduo dos er r os exper iment aisMaiorexat ido, det er minaes em baixas concent r aesSimplicidade de execuoPode seraplicado em condies que mt odos pot enciomt r icos ou gr avimt r icos no exist am (amost r as biolgicas, p.e.)Vant agens par a det er minaes de r ot ina r apidez de execuoBaixo cust o dos espect r of ot met r os