BIOLOGIA

BIOLOGIATECNOLOGIA DO DNA

VISO GERALEstudiosos demonstraram que a molcula de DNA servia de molde para a formao da molcula de RNA e que, para isso, era necessrio a atividade da enzima RNA-polimerase.

Para manipular o DNA, foi necessrio o desenvolvimento de ferramentas bsicas que permitissem cortar, copiar e colar o DNA.

Em 1970, foram descobertas as endonucleases de restrio, que deram origem a produo de DNA-recombinante.

ENDONUCLEASES DE RESTRIOWerner ArberEstudou o processo pelo qual os DNAs virais so eliminados aps serem introduzidos em clulas bacterianas hospedeiras.

Verificou que determinadas bactrias eram capazes de identificar os DNAs virais e destru-los.

Descobriu um novo grupo de enzimas, que foram denominados endonucleases de restrio.

ENDONUCLEASES DE RESTRIOAs sequncias so lidas de forma idntica tanto da esquerda para a direita quanto da direita para a esquerda (na fita complementar). Essas sequncias recebem o nome de palndromo.

Essas enzimas cortam a dupla-hlice de forma muito precisa e com a ajuda de uma segunda enzima determina a metilao, fazendo com que ela impea que a enzima de restrio atue no DNA da prpria bactria prevenindo sua destruio. ENDONUCLEASES DE RESTRIOUma das primeiras endonucleases de restrio descoberta foi a EcoRI. Liga-se a sequncia GAATTC/CTTAAG do DNA.

Molculas de DNA cortadas com um ER tendem a se unir novamente. Com o auxlio da enzima DNA-ligase, a ligao torna-se permanente.

PLASMDEOSSurgiu dos estudos sobre a resistncia bacteriana aos antibiticos.

Em 1960, os cientistas descobriram que muitas bactrias adquiriam resistncia a antibiticos devido a presena dos plasmdeos.

Ao receber um plasmdeo, informaes genticas so transferidas de uma bactria a outra.

DNA - RECOMBINANTEEm 1972, Boyer (especialista em endonucleases) e Cohen (especialista em plasmdeos), uniram esforos para resenhar a molcula de DNA- recombinante.

Tinham como objetivo obter um hbrido, cada um com genes que conferiam resistncia a um determinado antibitico.

OUTROS VETORES DE CLONAGEMOs plamdeos so, sem duvida, um dos principais vetores de clonagem, sendo, portanto, um veiculo ideal para transportar os fragmentos de DNA para dentro das bactrias.

Alem dos plasmdeos, existem outros vetores de clonagem:BacterifagosCosmdeosTransprsons