acidos nucleicos

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SEMINARIO DE ACIDOS NUCLEICOS UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR 2007 INTEGRACIÓN DE LAS TIC EN EL AULA PROFESORA: CANDIDA BARRIOS MONITORES: DAYRO DE LA CRUZ OSCAR MEJIA YANNA BELL ROMERO FACULTAD DE INGENIERAS AGROINDUSTRIA

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Breve explicación acerca de los ácidos nucleicos

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SEMINARIO DE ACIDOS NUCLEICOSUNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR 2007

• INTEGRACIÓN DE LAS TIC EN EL AULA • PROFESORA: CANDIDA BARRIOS

• MONITORES:

DAYRO DE LA CRUZ

OSCAR MEJIA

YANNA BELL ROMERO

FACULTAD DE INGENIERAS

AGROINDUSTRIA

• OBJETIVO: FACILITAR Y MEJORAR LA COMPRENSION

DE LA ESTRUCTURA DEL ADN Y DE LOS PROCESOS DE REPLICACIÓN, TRANSCRIPCIÓN Y TRADUCCIÓN.

• APLICAR LAS NUEVAS TECNICAS DE LA INFORMACIÓN Y LA COMUNICACIÓN.

• PERMITIR QUE SE DESARROLLE LA INVESTIGACIÓN EN LOS MIEMBROS DEL CURSO DE BIOLOGIA CELULAR.

Los ácidos nucleicos son las biomoléculasportadoras de la información genética. Tienen unaestructura polimérica, lineal, cuyos monómeros sonlos nucleótidos. El grado de polimerización puedellegar a ser altísimo, con moléculas constituídas porcentenares de millones de nucleótidos en una solaestructura covalente. De la misma manera que lasproteínas son polímeros lineales aperiódicos deaminoácidos, los ácidos nucleicos lo son denucleótidos. La aperiodicidad de la secuencia denucleótidos implica la existencia de información. Dehecho, sabemos que los ácidos nucleicos constituyenel depósito de información de todas las secuenciasde aminoácidos de todas las proteínas de la célula.

CONCEPTO

Funciones de los ácidos

nucleicos e importancia biologica

Entre las principales funciones de estos ácidos tenemos:

-Duplicación del ADN

-Expresión del mensaje genético:

-Transcripción del ADN para formar ARN y otros

- Traducción, en los ribosomas, del mensaje contenido en el ARN

a proteínas.

- Sirven de intermediarios en las transferencias de energía en las células (ATP, ADP y otros) o en las transferencias de electrones (NAD+, NADP+, FAD, etc.).

HISTORIA DEL DESCUBRIMIENTO DE LA ESTRUCTURA DEL ADN

CLASIFICACION DE LOS ACIDOS NUCLEICOS

De acuerdo a la composición química, losácidos nucleicos se clasifican en ácidosdesoxiribonucleicos (ADN) que se encuentranresidiendo en el núcleo celular y algunosorganelos, y en ácidos ribonucleicos (ARN) queactúan en el citoplasma. Se conoce conconsiderable detalle la estructura y función delos dos tipos de ácidos.

ESTRUCTURA MOLECULAR DEL ADN Y ARN

ADN ARN

El conocimiento de la estructura de los ácidos nucleicospermitió la elucidación del código genético, la determinacióndel mecanismo y control de la síntesis de las proteínas y elmecanismo de transmisión de la información genética de lacélula madre a las células hijas.

A las unidades químicas que se unen para formar los ácidosnucleicos se les denomina nucleótidos y al polímero se ledenomina polinucleótido o ácido nucleico.

ESTRUCTURA

Los nucleótidos están formados por una basenitrogenada, un grupo fosfato y un azúcar; ribosa encaso de ARN y desoxiribosa en el caso de ADN.

Las bases nitrogenadas son las que contienen lainformación genética y los azúcares y los fosfatos tienenuna función estructural formando el esqueleto delpolinucleótido.

En el caso del ADN las bases son dos purinas y dospirimidinas. Las purinas son A (Adenina) y G (Guanina).Las pirimidinas son T (Timina) y C (Citosina) .

En el caso del ARN también son cuatro bases, dospurinas y dos pirimidinas. Las purinas son A y G y laspirimidinas son C y U (Uracilo).

ESTRUCTURA

ESTRUCTURA

Características principales del ADN:- Polímero de desoxirribonucleótidos que se unen en cadena.•Dos cadenas se unen entre sí formando una doble hélice.•Ambas cadenas se unen por sus bases nitrogenadas.

•Entre las bases nitrogenadas enfrentadas se forman unionesfácilmente rompibles llamadas puentes de hidrógeno.

ADN

Función del ADN:

La información genética almacenada en la secuencia de nucleótidos de ADNsirve para dos propósitos:

# Es la fuente de información para la síntesis de todas las moléculas deproteínas de la célula y el organismo.# Provee la información heredada por las células hijas de la progenie.

Ambas funciones requieren que las células del ADN sirva como molde, en elprimero de los casos para la transcripción de información al ARN y en elsegundo, para la replicación de la información en las moléculas hijas deADN.

Propiedades del DNA

• Insolubles en soluciones diluidas de NaCl

•Soluble en soluciones concentradas de NaCl

•Insoluble en alcohol

•Puede ser disociado de la proteína por

tratamiento con un detergente o un fenol

NIVELES DE COMPOSICION DE ADN

ESTRUCTURA PRIMARIA DEL ADN

SE TRATA DE LA SECUENCIA DE

DESOXIRRIBONUCLEÓTIDOS DE UNA

DE LAS CADENAS. LA INFORMACIÓN

GENÉTICA ESTÁ CONTENIDA EN EL

ORDEN EXACTO DE LOS

NUCLEÓTIDOS.

ESTRUCTURA SECUNDARIA DEL

ADN

Es una estructura en doble hélice.

Permite explicar el almacenamiento de

la información genética y el mecanismo

de duplicación del ADN. Fué postulada

por Watson y Crick,basandose en:

- La difracción de rayos X que habían

realizado Franklin y Wilkins

- La equivalencia de bases de Chargaff,que dice que

la suma de adeninas más guaninas es igual a la

suma de timinas más citosinas.

Es una cadena doble, dextrógira o

levógira, según el tipo de ADN. Ambas

cadenas son complementarias, pues la

adenina de una se une a la timina de la

otra, y la guanina de una a la citosina de la

otra. Ambas cadenas son antiparalelas,

pues el extremo 3 de una se enfrenta al

extremo 5 de la otra.

Existen tres modelos de ADN. El ADN de

tipo B es el más abundante y es el

descubierto por Watson y Crick.

ESTRUCTURA TERCIARIA DEL ADN.

Se refiere a como se almacena el ADN en un volumen

reducido. Varía según se trate de organismos

procariontes o eucariontes:

a) En procariontes se pliega

como una super-hélice en

forma, generalmente, circul

ar y asociada a una

pequeña cantidad de

proteinas. Lo mismo ocurre

en la mitocondrias y en los

plastos.

b) En eucariontes el empaquetamiento ha de ser

más complejo y compacto y para esto necesita la

presencia de proteinas, como son las histonas y

otras de naturaleza no histona (en los

espermatozoides las proteinas son las

protaminas). A esta unión de ADN y proteinas se

conoce como cromatina, en la cual se distinguen

diferentes niveles de organización:

- Nucleosoma

- Collar de perlas

- Fibra cromatínica

- Bucles radiales

- Cromosoma.

Al enfriar lentamente puede renaturalizarse.

CLASIFICACION DEL ADN

SEGÚN ESTRUCTURA

•MONOCATENARIO

•BICATENARIO

SEGÚN FORMA DE EMPAQUETARSE

•ADN MAS HISTONAS

•ADN MAS PROTEINAS NO HISTONAS

ARN

Características del ARN:•Polímero de ribonucleótido que forma una sola cadena.•Esa cadena forma una hélice simple.

•Presenta iguales bases nitrogenadas que el ADN, pero reemplaza a la timina (T) por el uracilo (U).

•La pentosa que posee es la ribosa, de ahí el nombre del nucleótido.

•Es escaso en el núcleo, formando un elemento llamado nucléolo; muy abundante en el citoplasma, especialmente formando organoides llamados ribosomas, presentes en células vegetales y animales.

Propiedades del RNA

•Soluble en soluciones diluidas de NaCl

•Insoluble en alcohol

•Puede ser disociado de las proteínas

por tratamiento con un detergente o un

fenol

ESTRUCTURA PRIMARIA

DEL ARN

Al igual que el ADN, se

refiere a la secuencia de las

bases nitrogenadas que

constituyen sus nucleótidos.

ESTRUCTURA

SECUNDARIA DEL ARN

Alguna vez, en una misma

cadena, existen regiones

con secuencias

complementarias capaces

de aparearse.

ESTRUCTURA

TERCIARIA DE

ARN

Es un plegamiento,

complicado, sobre al

estructura

secundaria.

CLASIFICACIÓN DE LOS ARN.

Para clasificarlos se adopta la masa molecular

media de sus cadenas, cuyo valor se deduce de la

velocidad de sedimentación. La masa molecular y

por tanto sus dimensiones se miden en svedberg

(S). Según esto tenemos:

ARN MENSAJERO (ARNm)

Sus características son la siguientes:

- Cadenas de largo tamaño con estructura primaria.

- Se le llama mensajero porque transporta la

información necesaria para la síntesis proteica.

- Cada ARNm tiene información para sintetizar una

proteina determinada.

- Su vida media es corta.

a) En procariontes el extremo 5 posee un grupo

trifosfato

b) En eucariontes en el extremo 5 posee un grupo

metil-guanosina unido al trifosfato, y el el extremo

3 posee una cola de poli-A

En los eucariontes se puede distinguir

también:

- Exones, secuencias de bases que codifican

proteinas

- Intrones, secuencias sin información.

Un ARNm de este tipo ha de madurar

(eliminación de intrones) antes de hacerse

funcional. Antes de madurar, el ARNm recibe

el nombre de ARN heterogeneonuclear

(ARNhn ).

ARN RIBOSÓMICO (ARNr)

Sus principales características son:

- Cada ARNr presenta cadena de diferente

tamaño, con estructura secundaria y

terciaria.

- Forma parte de las subunidades

ribosómicas cuando se une con muchas

proteinas.

- Están vinculados con la síntesis de

proteinas.

ARN NUCLEOLAR

(ARNn)

Sus características

principales son:

- Se sintetiza en el

nucleolo.

- Posee una masa

molecular de 45 S, que

actua como recursor de

parte del ARNr,

concretamente de los

ARNr 28 S (de la

subunidad mayor), los

ARNr 5,8 S (de la

subunidad mayor) y los

ARNr 18 S (de la

subunidad menor)

ARNu

Sus principales características son:

- Son moléculas de pequeño tamaño

- Se les denomina de esta manera por

poseer mucho uracilo en su composición

- Se asocia a proteinas del núcleo y forma

ribonucleoproteinas pequeño nucleares

(RNPpn) que intervienen en:

a) Corte y empalme de ARN

b) Maduración en los ARNm de los

eucariontes

c) Obtención de ARNr a partir de

ARNn 45 S.

ARN TRANSFERENTE (ARNt)

Sus principales características son.

- Son moléculas de pequeño tamaño

- Poseen en algunas zonas estructura

secundaria, lo que va hacer que en

las zonas donde no hay bases

complementarias adquieran un

aspecto de bucles, como una hoja de

trebol.

- Los plegamientos se llegan a hacer

tan complejos que adquieren una

estructura terciaria

- Su misión es unir aminoácidos y

transportarlos hasta el ARNm para

sintetizar proteinas.

SINTESIS Y LOCALIZACIÓN DE LOS ARN

En la célula eucarionte los ARN se sintetizan

gracias a tres tipos de enzimas:

- ARN polimerasa I, localizada en el nucleolo y se

encarga de la sinteis de los ARNr 18 S, 5,8 S y 28

S.

- ARN polimerasa II, localizada en el nucleoplasma

y se encarga de la síntesis de los ARNhn, es decir

de los precursores de los ARNm

- ARN polimerasa III, localizada en el

nucleoplasma y se encarga de sintetizar los ARNr 5

S y los ARNm.

NUCLEOTIDOS

ON

NN

N

NH2

OHOH

CH2OP-O

O

O-

H

H H

Pentosa Base

NucleósidoFosfato

Nucleótido

COMPONENTES

Los nucleótidos están formados por: una base nitrogenada (BN), un azúcar (A) y ácido fosfórico (P); unidos en el siguiente orden: P-A-BN

LAS BASES NITROGENADAS

Estructura de las Bases Nitrogenadas.

Unión Fosfodiester en los Ácidos

Nucleicos.

ACIDO FOSFORICO

Figura 1.1.1.G.-Estructura de los Pares de Bases.

NUCLEOSIDOS

IMPORTANCIA DE LOS NUCLEOTIDOS

• ACUMULADORAS Y DONANTES DE ENRGIA•FUNCION COENZIMATICA

O

-O

H2C

O

P

-O

ON

NH3C

O

H

O

ON

N

O

NHH

ON

N

N

N

O

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H

ON

N

N

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-O

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H2C

O

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-O

O

-O

H2C

O

P

-O

ON

N

N

N

OH

NH

H

H

HOCH2

OH

Polinucleótido

Extremo 5’

Extremo 3’

Enlacefosfodiéster

5’- CpApTpTpGpCpGpGpApApTpGpCpCp -3’

5’-CATTGCGGAATGCC-3’

3’-GTAACGCCTTACGG-5’

Formas de representación de polinucleótidos

O

-O

H2C

O

P

-O

O

O-

CH2

O

P

O-

O

ON

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O

H

O

NN

N

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O

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CH2

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CH2

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O-

H

O

-O

H2C

O

P

-O

O

O-

CH2

O

P

O-

O

5’

3’ 5’

3’

Polinucleótidoen doble hélice

Propiedades de los polinucleótidos, 1

1. Absorción de luz UV a 260 nm

% A260,

Hipocromismo

T (ºC)100

110

120

En el DNA doble hélice se da elfenómeno de hipocromismo:

el DNA desnaturalizado por el calorabsorbe un 20-30 % más que elDNA nativo

Propiedades de los polinucleótidos, 2

2. Reacción positiva de los polidesoxirribonucleótidos a ladifenilamina y al reactivo de Schiff

3. Reacción positiva de los polirribonucleótidos al orcinol

4. Reacción con agentes intercalantes (acridinas)

5. Hidrólisis completa del RNA con álcali; el DNA es resistentea álcali.

Rotura química de polinucleótidos

- Tratando un polinucleótido (DNA) con dimetil sulfato (DMS)tiene lugar la metilación de purinas; por calentamiento a pH neutrose rompe el enlace glicosídico y queda un sitio apurínico; el tra-tamiento ulterior con ácido diluído rompe la cadena por el sitioapurínico.

- Tratando un polinucleótido (DNA) con hidrazina se rompe el enlace glicosídico de las pirimidinas, quedando un sitio apirimi-dínico; el tratamiento ulterior con piperidina rompe la cadena porel sitio apirimidínico.

O

-O

H2C

O

P

-O

ON

NH3C

O

H

O

O

O

ON

N

N

N

NH

H

O

-O

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O

P

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O

O

-O

H2C

O

P

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N

N

NH H

O

OH

pH bajo

Sitio apurínico

Calentamiento

O

-O

H2C

O

P

-O

ON

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O

H

O

O

O

ON

N

N

N

NH

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O

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O

-O

H2C

O

P

-O

O

O

-O

H2C

O

P

-O

N

N

NH H

O

OH

Sitio apurínico

O

O

-OO-

P

-O

O

-O

H2C

O

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-O

N

N

NH H

O

O

-O

H2C

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H

O

ON

N

N

N

NH

H

-O

H2C

O

P

-O

O

O-

Ácido diluído

Rotura enzimática de polinucleótidos

Endonucleasas: atacan enlaces fosfodiéster situados enel interior de una cadena polinucleotídica, y suelen serespecíficas de cada ácido nucleico:

- Ribonucleasas- Desoxirribonucleasas

Exonucleasas: atacan enlaces fosfodiéster situados en losextremos (3’ o 5’) de una cadena polinucleotídica, y suelenatacar indistintamente ambos tipos de ácidos nucleicos:

- Exonucleasa de bazo (rotura tipo b)- Exonucleasa de veneno de serpiente (rotura tipo a)

O

-O

H2C

O

P

-O

ON

NH3C

O

H

O

ON

N

O

NHH

ON

N

N

N

O

NH

H

ON

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N

N

NH

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O

-O

H2C

O

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O

-O

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O

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O

O

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O

P

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ON

N

N

N

O

NH

H

H

OH

CH2OP

O

-O

O-

ON

N

N

N

NH

H

OH

OP

O

-O

O-

CH2

OP

O

-O

O-

CH2O

N

NH3C

O

H

O

OH

OP

O

-O

O-

CH2O

N

N

O

NHH

OH

Rotura tipo a:

Da lugar a unamezcla de5’-nucleótidos

O

-O

H2C

O

P

-O

ON

NH3C

O

H

O

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N

O

NHH

ON

N

N

N

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N

N

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H

H

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O

P O-O

O-

ON

N

N

N

NH

H

O

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HOCH2

ON

N

O

NHH

O

P O-O

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HOCH2

ON

NH3C

O

H

O

O

P O-O

O-

HOCH2

Rotura tipo b:

Da lugar a unamezcla de3’-nucleótidos

Endonucleasas:

DNAasa I: rotura completa, tipo aDNAasa II: rotura completa, tipo bRNAasa pancreática: rompe (b) enlaces Py-XRNAasa T-1: rompe (b) enlaces G-X

Endonucleasas de restricción

Exonucleasas:

Exonucleasa de bazo: libera 3’-nucleótidosExonucleasa de veneno de serpiente: libera 5’-nucleótidos

Endonucleasas de restricción, 1:

1. Reconocen secuencias específicas, por lo general palindrómicas:

5’- ATCGTTGCCTACAATTGAATTCCCAATAACCCTT -3’

3’- TAGCAACGGATGTTAACTTAAGGGTTATTGGGAA -5’

La secuencia reconocida en este caso es GAATTC

Endonucleasas de restricción, 2:

2. Suelen romper el polinucleótido dejando extremos cohesivos:

5’- ATCGTTGCCTACAATTGAATTCCCAATAACCCTT -3’

3’- TAGCAACGGATGTTAACTTAAGGGTTATTGGGAA -5’

5’- ATCGTTGCCTACAATTG

3’- TAGCAACGGATGTTAACTTAA

AATTCCCAATAACCCTT -3’

GGGTTATTGGGAA -5’

Lo que permite la soldadura de fragmentos de DNA rotos por lamisma endonucleasa de restricción

Endonucleasas de restricción, 3:

3. Al reconocer secuencias relativamente largas, cortan el DNApor un número muy limitado de sitios, lo que facilita la manipula-ción experimental del mismo.

EcoRI GAATTCClaI ATCGATHaeIII GGCCRsrII CGGATCCG

Algunas endonucleasas de restricción:

Supongamos la secuencia reconocida por la endonucleasade restricción EcoRI, que es

5’-GAATTC-3’

En un DNA que contenga 30% de A, 30 % de T, 20 % de G y20 % de C, la probabilidad de encontrar esta secuencia al azarsería de

0.2 x 0.3 x 0.3 x 0.3 x 0.3 x 0.2 = 0.000324

O lo que es lo mismo, aproximadamente una cada 3086 nucleótidos

DUPLICACION O REPLICACION

LAS DOS CELULAS HIJAS PROVENIENTES DE UNA DIVISION CELULAR CONTIENEN COPIAS IDENTICAS DEL ADN PRESENTE EN LA CELULA QUE SE DIVIDIO

PASOS

•SEPARACION DE LAS CADENAS

•LAS BASES NITROGENADAS SE AGREGAN

•FORMACION DE ARN MENSAJERO

•FLUJO(ENVIO DE LA INFORMACION GENETICA A LOS RIBOSOMAS Y ESPECIFICACION DE LA SINTESIS PROTEICA)

REPLICACIÓN DEL ADN ANIMACIÓN EN LA QUE SE REPRESENTA EL

PROCESO DE REPLICACIÓN, LOS ENZIMAS QUE INTERVIENEN Y LA FUNCIÓN DE CADA ENZIMA

http://www.biorom.uma.es/contenido/biomodel/biomodel-misc/anim/replic/replic1.html

MODIFICADORESRECOMBINACION : Es cuando se modifica la molecula de ADN provenientes de otro organismo.

TRANSICION: Cuando es cambiada una pirinida por otra purina.

TRANSVERSION: Cuando es cambiada una purina por pirimida.

CAMBIO DE MARCO: Cuando se agrga o disminuye bases nitrogenadas.

Asi es que se presentan las mutaciones.