tecnicas transgenia

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Técnicas e métodos utilizados - Técnica do DNA recombinante: A tecnologia do DNA Recombinante foi desenvolvida em 1973 e permite a transferência do material genético de um organismo para o outro de forma efetiva e eficiente. Consiste em induzir um organismo e amplificar a sequencia de DNA de interesse, em sistemas que permitem uma fácil purificação e recuperação do referido fragmento de DNA. Para isso, são utilizados vetores de clonagem (plasmídeos ou vírus) nos quais a sequência de DNA de interesse é inserida, utilizando a enzima DNA ligase. Quando necessário, o fragmento de DNA de interesse pode ser libertado do vetor por meio de enzimas de restrição. Uma vez isolado o gene de interesse, estes fragmentos de DNA (genes) são incorporados (por meio das técnicas de Engenharia Genética) no Genoma do organismo alvo, resultando daí um OGM, cuja característica adquirida passa a ser hereditária. - Método de bombardeamento: micropartículas de um metal (tungstênio ou ouro) são revestidas por fragmentos de DNA contendo os genes selecionados. Através de um aparelho ("canhão de genes"), as partículas são aceleradas a altas velocidades e bombardeiam o tecido vegetal que vai sofrer a transformação. As partículas penetram nas células e libertam os fragmentos de DNA. As células da planta assimilam os genes e alguns passam a integrar o genoma. - Método de infecção por bactérias: O método de infecção por bactérias, em vez do bombardeamento de genes, usa bactérias para infectar a planta a ser modificada e transportar os novos genes para o seu genoma. O que os cientistas fazem é substituir os genes infectados, que ficam no plasmídeo Ti (T-DNA) da bactéria, pelos genes selecionados. Células de embriões da planta que se quer modificar são colocadas em contato com uma suspensão contendo as agrobactérias (são bactérias do solo com capacidade de se associarem espontaneamente a algumas plantas e transferir naturalmente alguns dos seus genes para elas). Ao infectar os embriões, elas transferem para o genoma da nova planta os genes com as instruções para dar as características desejadas. - Eletroporação de protoplastos e células vegetais: Protoplastos são células vegetais, desprovidas de parede celular. Para a transformação, são incubados em soluções que contêm os genes a serem transferidos e, em seguida, um choque eléctrico de alta voltagem é aplicado por curtíssimo tempo. O choque causa uma alteração da membrana celular, o que permite a penetração e eventual integração dos genes no genoma. - Biobalística: Técnica introduzida no início da década de oitenta. Baseia-se na utilização de microprojéteis de ouro ou tungstênio cobertos com os genes de interesse. Os microprojéteis são acelerados com pólvora ou gás em direção aos alvos que, neste caso, são os tecidos vegetais. Os genes e o projétil entram nas células juntos de maneira não-letal, localizando-se aleatoriamente nas organelas celulares. Em seguida, o DNA é dissociado das micropartículas pela ação do líquido celular, ocorrendo o processo de integração do gene exógeno no genoma do organismo a ser modificado. A velocidade alcançada pelos microprojéteis atinge cerca de 1500.

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  • Tcnicas e mtodos utilizados

    - Tcnica do DNA recombinante: A tecnologia do DNA Recombinante foi

    desenvolvida em 1973 e permite a transferncia do material gentico de um organismo

    para o outro de forma efetiva e eficiente. Consiste em induzir um organismo e

    amplificar a sequencia de DNA de interesse, em sistemas que permitem uma fcil

    purificao e recuperao do referido fragmento de DNA. Para isso, so utilizados

    vetores de clonagem (plasmdeos ou vrus) nos quais a sequncia de DNA de interesse

    inserida, utilizando a enzima DNA ligase. Quando necessrio, o fragmento de DNA de

    interesse pode ser libertado do vetor por meio de enzimas de restrio. Uma vez isolado

    o gene de interesse, estes fragmentos de DNA (genes) so incorporados (por meio das

    tcnicas de Engenharia Gentica) no Genoma do organismo alvo, resultando da um

    OGM, cuja caracterstica adquirida passa a ser hereditria.

    - Mtodo de bombardeamento: micropartculas de um metal (tungstnio ou ouro) so

    revestidas por fragmentos de DNA contendo os genes selecionados. Atravs de um

    aparelho ("canho de genes"), as partculas so aceleradas a altas velocidades e

    bombardeiam o tecido vegetal que vai sofrer a transformao. As partculas penetram

    nas clulas e libertam os fragmentos de DNA. As clulas da planta assimilam os genes e

    alguns passam a integrar o genoma.

    - Mtodo de infeco por bactrias: O mtodo de infeco por bactrias, em vez do

    bombardeamento de genes, usa bactrias para infectar a planta a ser modificada e

    transportar os novos genes para o seu genoma. O que os cientistas fazem substituir os

    genes infectados, que ficam no plasmdeo Ti (T-DNA) da bactria, pelos genes

    selecionados. Clulas de embries da planta que se quer modificar so colocadas em

    contato com uma suspenso contendo as agrobactrias (so bactrias do solo com

    capacidade de se associarem espontaneamente a algumas plantas e transferir

    naturalmente alguns dos seus genes para elas). Ao infectar os embries, elas transferem

    para o genoma da nova planta os genes com as instrues para dar as caractersticas

    desejadas.

    - Eletroporao de protoplastos e clulas vegetais: Protoplastos so clulas vegetais,

    desprovidas de parede celular. Para a transformao, so incubados em solues que

    contm os genes a serem transferidos e, em seguida, um choque elctrico de alta

    voltagem aplicado por curtssimo tempo. O choque causa uma alterao da membrana

    celular, o que permite a penetrao e eventual integrao dos genes no genoma.

    - Biobalstica: Tcnica introduzida no incio da dcada de oitenta. Baseia-se na

    utilizao de microprojteis de ouro ou tungstnio cobertos com os genes de interesse.

    Os microprojteis so acelerados com plvora ou gs em direo aos alvos que, neste

    caso, so os tecidos vegetais. Os genes e o projtil entram nas clulas juntos de maneira

    no-letal, localizando-se aleatoriamente nas organelas celulares. Em seguida, o DNA

    dissociado das micropartculas pela ao do lquido celular, ocorrendo o processo de

    integrao do gene exgeno no genoma do organismo a ser modificado. A velocidade

    alcanada pelos microprojteis atinge cerca de 1500.