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Regras de Esterilização e não Contaminação em Ambientes

Laboratoriais Versão 2

Trabalho Realizado por:

Aida Sofia Santos

Lucília Santos

Maria de Fátima Santos

Isabel Passos

José João Clemente

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Introdução

A assepsia é extremamente importante em microbiologia.

Esterilização de meios de cultura e soluções.

Material de vidro, plástico ou metal que se utiliza.

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Instruções Gerais

As condições de higiene e limpeza devemser rigorosas, para evitar possíveis fontes de contaminações.

Além dos cuidados normais de boas práticas de laboratório, são necessários procedimentos específicos para minimizar os riscos de acidentes pessoais e de contaminação ambiental.

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Normas gerais para uso de um Laboratório de Microbiologia

Desinfeção diária do laboratório: Esta, visa eliminar qualquer interferência externa que possa influenciar na qualidade dos trabalhos desenvolvidos,assim como proteger o pessoal envolvido de qualquer Contaminação ambiental.

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Normas Gerais para uso de um Laboratório de Microbiologia

No início e término de cada trabalho prático, a superfície da bancada deve ser desinfetada.

Em caso de acidentes provocados por salpicos, quebras de frascos, tubos e placas que contenham materiais contaminados, deve proceder-se imediatamente á desinfeção.

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Técnicas de assepsia

Para manter uma cultura pura,

é necessário que o meio de cultura

que se pretende utilizar seja mantido desprovido de qualquer

organismo vivo contaminante

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Para a prevenção de contaminações

durante a manipulação de culturas puras

recorre-se a técnicas de assepsia.

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As técnicas de assepsia são um conjunto

de medidas experimentais, simples mas

muito importantes num laboratório de Microbiologia.

Estas técnicas devem ser praticadasdurante a manipulação de culturas puras e de meios de cultura estéreis.

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Nomeadamente,

um recipiente que contenha uma dada cultura deve ser aberto perto da chama do bico de Bunsen,

de forma a impedir uma contaminação

devido à entrada de ar exterior contaminado.

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Além disso,

após a sua preparação, cada meio de cultura

deve ser submetido a esterilização,

por forma a eliminar

qualquer organismo vivo contaminante

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A transferência de uma porção da cultura contida num tubo

ou balão para outro recipiente (inoculação) é realizada

normalmente com uma ansa previamente esterilizada

pela passagem pela chama do bico de Bunsen (e

posteriormente arrefecido) ou através de uma

micropipeta com pontas de plástico previamente

esterilizadas (em autoclave, por exemplo).

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1- passar a ansa pela chama do bico de Bunsen até a extremidade ficar incandescente; deixar arrefecer, ao ar, mantendo a ansa sempre perto da chama;

2- destapar a placa de Petri que contem a cultura a usar como inóculo, perto da chama;

3- remover uma porção da cultura com a ansa arrefecida;

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5- transferir a cultura para o meio de cultura e passar o gargalo do balão novamente pela chama;

6- esterilizar a ansa, passando-a novamente pela chama até ficar incandescente.

7- colocar a ansa esterilizada num suporte.

4- destapar o balão contendo o meio de cultura líquido a inocular e passar o gargalo pela chama;

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Algumas Regras Básicas Todo material contaminado antes de ser lavado, deve passar pelo processo de esterilização, para que toda a sua flora microbiológica seja completamentedestruída, evitando-se que o mesmo seja uma fonte de contaminação.

Nunca se deve deixar sobre a bancada de trabalho, lâminas retiradas do microscópio. Este material deve ser colocado em recipiente contendo umasolução desinfetante adequada.

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Regras BásicasTodo material que deve ser esterilizado e/ou lavado (tubos, pipetas, placas, frascos,etc.) deverá ser colocado em lugar indicado, no final de cada atividadedesenvolvida no laboratório..

As ansas e as agulhas inoculadas, após o uso, devem ser esterilizadas à chama.

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Regras Básicas (Cont.)

O autoclave, que é um equipamento usado nas atividades rotineiras dolaboratório, deve ser inspecionado e verificado quanto à eficiência de esterilização periodicamente.

Deve-se ter sempre o cuidado de lavar e realizar a antissepsia das mãos, antese após o término dos trabalhos realizados no laboratório.

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(Continuação)

Soluções químicas devem ser pipetadas com auxiliar de pipetagem (pera deborracha) e as pipetas químicas devem estar separadas das microbiológicas.

Utilizar sempre uma bata limpa

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Lavar as mãos no início e no final de cada sessão de trabalho experimental

Manter os bicos de Bunsen e as lamparinas acesas apenas enquanto são necessários

Não comer, beber ou fumar no laboratório

Identificar todo o material, utilizando para isso marcadores de vidro apropriados.

Regras Básicas (Cont.)

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Algumas Regras Básicas (Cont.)

No manuseamento de compostos químicos considerados perigosos, evitar o contacto cutâneo ou a sua inalação, recorrendo ao uso de uma hote, de luvas, máscara ou óculos de proteção, consoante as características dos compostos

Não pipetar com a boca

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Estabelecer regras bem definidas para o circuito do material de vidro e de plástico no laboratório, assim como para a sua lavagem

Manusear com muita precaução certos materiais e aparelhos frágeis e/ou muito sensíveis e mantê-los devidamente limpos. É o caso dos termómetros, cabeças de aquecimento termostatizadas, aparelhos de medição de pH e balanças, entre outros

Continuação

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Nunca usar aparelhos sem conhecer em pormenor o procedimento de utilização

Colocar as pipetas de vidro sujas em contentores de plástico com uma solução com detergente e devidamente identificados para esse fim

Continuação

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Antes de colocar na pia de lavagem do laboratório, material de vidro sujo contendo soluções/suspensões, deixar informação sobre os riscos do seu conteúdo, de modo a ficar claro o destino que se lhe deve dar

Colocar todo o material de vidro/plástico contendo suspensões de microrganismos, no local indicado para posterior autoclavagem

Continuação

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O processamento dos produtos devem seguir um fluxo direcionado sempre da área suja para a área limpa.Um laboratório deve possuir minimamente os seguintes ambientes:

1-Area de receção e limpeza2- Sala de preparo e esterilização3- Sala de desinfeção química, quando aplicável4- Área de monitoramento de processo de esterilização5- Sala de armazenamento e distribuição de materiais esterilizados

Continuação

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Muito Importante!!!.Não lamber etiquetas ou colocar qualquer material na boca (p.ex. canetas);

Evite o hábito de levar as mãos à boca, nariz, olhos, rosto ou cabelo

Não mantenha plantas, bolsas, roupas ou qualquer outro objeto não relacionado com o trabalho dentro do laboratório.

As unhas devem ser curtas, bem cuidadas e não podem ultrapassar a ponta dos dedos. Preferencialmente sem conter verniz, pois liberta micro fraturas.

Não mastigue chicletes, pois provocam bactérias na boca.

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Lavagem Correta das Mãos 1. Utilize a água corrente para molhar as mãos;2. Esfregue a palma e o dorso das mãos com sabonete, inclusive as unhas e os espaços entre os dedos durante mais ou menos 15 segundos;

3. Enxague bem com água corrente retirando todo o sabonete;4. Seque-as com papel toalha ou outro sistema de secagem eficiente;5. Esfregue as mãos com um pouco de produto antissético.

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Regras de Segurança no Laboratório

Regras Gerais de Segurança

1- Conhecer a localização das saídas de emergência.2- Conhecer a localização e o funcionamento de extintores de incêndio, caixas de primeiros socorros, chuveiros e equipamentos de proteção.3- Não comer, beber, fumar ou guardar alimentos no laboratório.4- Nunca trabalhar sozinho no laboratório.

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5- Utilizar os aparelhos só depois de ter lido e compreendido as respetivas instruções de manuseamento e segurança.6- Antes de efetuar qualquer atividade experimental, ler com atenção o protocolo experimental e procurar compreender a sua finalidade.7- Manter as bancadas limpas e arrumadas, o chão limpo e seco, e as passagens desobstruídas.8- Efetuar o trabalho laboratorial sempre de pé.

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9- Todos os recipientes que contenham produtos devem estar devidamente rotulados.10- Reagentes e equipamento devem ser arrumados após ter terminado a sua utilização.11- Os bicos de gás apenas devem ser acendidos quando for necessário e deve ser vigiado o seu funcionamento.12- Não aquecer recipientes fechados.

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13- Colocar o material de vidro partido ou rachado em recipiente próprio.14- Realizar na hotte os trabalhos que envolvam libertação de gases ou vapores.15- Findo o trabalho experimental, verificar se as torneiras de água e de gás se encontram fechadas e se os aparelhos elétricos foram desligados

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Materiais de Laboratório

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Conclusão

Embora existam vários meios para ajudar a avaliar os riscos inerentes a uma determinada experiência ou processo, a componente mais importanteé a ponderação profissional. A avaliação dos riscos deve ser efetuada pelas pessoas mais familiarizadas com ascaracterísticas especificas dos eventuais organismos, normas, e equipamentos a utilizar, bem como do equipamento de confinamento e instalações disponíveis.

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http://www.colegioweb.com.br/trabalhos-escolares/quimica/substancias-e-misturas/material-de-laboratorio.html

http://recife.ifpe.edu.br/recife/manual_microbiologia_5_ed_2007_final.pdf

Referencias Bibliográficas

http://portuguese.alibaba.com/product-gs/glassware-lab-supplies-553213266.html

http://quimicaensinada.blogspot.pt/2011_01_01_archive.html

http://profs.ccems.pt/PauloPortugal/CFQ/Segurana_Laboratrio/Laboratrio.htm

https://fenix.ist.utl.pt/departamentos/dbe/lateral/laboratorios

http://pt.wikipedia.org/wiki/Laborat%C3%B3rio

http://www.cienciaempauta.am.gov.br/2013/03/programa-de-iniciacao-cientifica-do-inpa-recebe-inscricoes/

http://e-escola.ist.utl.pt/topico.asp?hid=312http://repositorium.sdum.uminho.pt/bitstream/1822/2241/1/U1.pdf

http://www.ci.esapl.pt/lab/

http://profs.ccems.pt/PauloPortugal/CFQ/Segurana_Laboratrio/Laboratrio.htm