Preservação da fertilidade Preservação da fertilidade masculinamasculina

Sidney Verza Jr

Biólogo, ANDROFERT- Centro de Referência em Reprodução Masculina

Campinas – São Paulowww.androfert.com.br

25º Congresso Brasileiro de Reprodução Humana – São Paulo, Nov-2012

HistóricoHistórico Desenvolvido em ~1960 Desenvolvido em ~1960 (Sherman, JK, 1964);(Sherman, JK, 1964);

Ganhou ênfase após o desenvolvimento Ganhou ênfase após o desenvolvimento da R. A. Alta Complexidade:da R. A. Alta Complexidade:

FIV convencional FIV convencional (Steptoe & Edwards, 1978)(Steptoe & Edwards, 1978)

ICSI ICSI (Palermo et al, 1992)(Palermo et al, 1992)

Expandido para as técnicas de extração Expandido para as técnicas de extração espermáticaespermática

IndicaçõesIndicações

Anterior ao tratamentos gonadotóxicos;Anterior ao tratamentos gonadotóxicos;

Profissões de risco;Profissões de risco;

Pré vasectomia;Pré vasectomia;

Sincronização de datas em RA;Sincronização de datas em RA;

Programas de doação de óvulos;Programas de doação de óvulos;

IndicaçõesIndicações Associado às técnicas de extração de Associado às técnicas de extração de

espermatozoides do epidídimo/testículo;espermatozoides do epidídimo/testículo;

Câncer e Fertilidade no homemCâncer e Fertilidade no homem

Homens idade reprodutiva:Homens idade reprodutiva:

Brasil: 15.000 novos casos de Brasil: 15.000 novos casos de câncer/anocâncer/ano

Testículo, linfoma Hodgkin e Testículo, linfoma Hodgkin e leucemia leucemia

CA Testículo: CA Testículo: 1-2%dos homens1-2%dos homens

Efeitos da quimioterapia na fertilidade

Tipo decâncer

Agentequimioterápico

Efeito nafertilidade

Duração doefeito

MOPP = mecloretamina, vincristina (Oncovin), procarbazina e prednisona; CPP = ciclofosfamida, vincristina (Oncovin), procarbazina e prednisona; MVPP = mecloretamina, vinblastina, procarbazina e prednisona.

Monga M. et al, Contemporary Urology, 1999.

Doença de Hodgkin MOPP, CPP, MVPP Azoospermia: 94% Frequentementeirreversível

Sarcoma Agentes alquilantes Azoospermia: 90% Irreversível em50%

Câncer de testículo Bleomicina,etoposídeo, cisplatina

Azoospermia: 20% 50% derecuperação em2 anos

Avaliação das características seminais nos homens com câncer no momento do armazenamento

(Banco de Sêmen)

Laboratório de Andrologia e Banco de Sêmen Terapêutico ANDROFERT – Centro de Referência em Infertilidade Masculina, Campinas, São Paulo

70%

35%

63%

85%

Controlen=24

CA testículo

n=106

Linfoma/Leucemia

n=84

Sarcoma/outrosn=22

Concentração espermática normal (>20 milhões/mL)

* *

*p<0,01

*

4839

3639

49

controle cancer CA test linf/leuc sarcoma/outros

Sobrevida %

Características de um Banco de Sêmen Terapêutico para homens com câncer no Brasil

Laboratório de Andrologia e Banco de Sêmen Terapêutico ANDROFERT – Centro de Referência em Infertilidade Masculina, Campinas, São Paulo

Sarcoma/outros

Banco Sêmen Banco Sêmen pacientes pacientes oncológicos oncológicos AndrofertAndrofert

IIU33%

FIV21%

ICSI46% CA Testículo

Técnica de Reprodução

Assistida indicada

conforme qualidade

seminal pós-

descongelamento

Linfoma/ Leucemia

Agência Nacional de Vigilância SanitáriaAgência Nacional de Vigilância Sanitária

Normas técnicas para o funcionamento de Banco Normas técnicas para o funcionamento de Banco

de Células e Tecidos Germinativosde Células e Tecidos Germinativos

Infra-estrutura: sala coleta, laboratório, tanques armazenamento, sistema alarme, cabine segurança biológica, equipamentos congelamento, centro cirúrgico

Infra-estrutura e regrasInfra-estrutura e regras

Diluição com crioprotetorDiluição com crioprotetor Objetivo: evitar a formação intracelular Objetivo: evitar a formação intracelular

de cristais de gelo (glicerol)de cristais de gelo (glicerol)

Adição fracionada (25% cada vez)Adição fracionada (25% cada vez)

AcondicionamentoAcondicionamento

Crio:Crio: Fase resfriamentoFase resfriamento

Fase vaporFase vapor

Fase armazenamentoFase armazenamento

25

4

-79

-196

16 Tempo (min)8136

T(graus/Celsius)

Equilíbrio

Criopreservação de EspermatozoidesCriopreservação de Espermatozoides

Nitrogênio Nitrogênio líquidolíquido

15-18 15-18 cmcm

VVAAPPOORR

- 79°C

NitrogêNitrogênio nio

líquidolíquido

- 196°C

Alterações na penetração no muco cervical (Fjallbrant & Ackerman, 1969)

Diminuição da motilidade espermática e integridade da

membrana plasmática (Keel et al., 1987, Esteves et al., 1996)

Diminuição da penetração em oócitos de hamster (Critser et al., 1987)

Alterações na estrutura acrossômica (Cross & Hanks, 1987; Esteves et al., 1998, 2000)

Diminuição da atividade da acrosina (Mack & Zaneveld, 1987; Lasso et al., 1994)

Efeitos da criopreservação sobre os espermatozoides

25-75% dos espermatozoides morrem ou sofrem 25-75% dos espermatozoides morrem ou sofrem lesões irreversíveis.lesões irreversíveis.

Impacto da técnicaImpacto da técnica

Impacto do crioprotetorImpacto do crioprotetor

RA sêmen criopreservado: RA sêmen criopreservado: resultadosresultados

IIU: 16%-30%/ciclo; taxa IIU: 16%-30%/ciclo; taxa cumulativa até 70%/ 6 cicloscumulativa até 70%/ 6 ciclos

II Consenso Brasileiro de Infertilidade Masculina, SP, 2003

FIV/ICSI: taxas FIV/ICSI: taxas semelhantes sêmen semelhantes sêmen fresco fresco

(25%-50%/ciclo; taxa (25%-50%/ciclo; taxa cumulativa até 75%/4 cumulativa até 75%/4

ciclos)ciclos)

RA e Sptz criopreservado de RA e Sptz criopreservado de Epidídimo/Testículo: Epidídimo/Testículo: resultadosresultados

Epidídimo: Epidídimo:

Tx gravidez Tx gravidez similares entre similares entre fresco fresco vs. vs. criopreservado;criopreservado;

Testículo: Testículo: Friedler, Ben Rhouma, Friedler, Ben Rhouma,

Habermann, Huang:Habermann, Huang:

Resultados similares;Resultados similares; De Croo:De Croo:

Resultados inferiores no Resultados inferiores no congelado congelado vs.vs. fresco fresco

Seleção de espermatozoides Seleção de espermatozoides vivos para ICSIvivos para ICSI

THO: Teste hiposmótico

(Liu et al, 1997);

Teste da flexibilidade da cauda

(Soares et al, 2003)

Uso de substâncias estimulantes da motilidade

(Esteves et al, 1998).

T.H.O. T.F.C.

Comparação dos parâmetros seminais entre o subgrupo CÂNCER, após o 1º e após o 2º

descongelamento.

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Conc. Sptzmoveis

(x106/ml)

motilidadetotal (%)

motilidadeprogressiva

(%)

vitalidade (%) morfologia(%)

Câncer (1º) Câncer (2º)

20 amostras sêmen homens câncer

que solicitaram descarte

Descongelamento e recongelamento

Avaliação parâmetros espermáticos

PesquisasPesquisas

PesquisaPesquisa

O que há de novo?O que há de novo? Vitrificação:

Uso de capilares para congelamento de pequenas amostras (10 µL);

Relato de bebês nascidos com espermatozoides vitrificados.

Isachenko V et al , 2012

Congelamento de sptz em pequenos volumes pós PESA/TESA/micro-TESE.

Endo et al, 2012

ConclusõesConclusões

Técnica bem estabelecida: Vapor de nitrogênio líquido e glicerol;

Resultados similares de gravidez associado às técnicas de RA;

Baixa qualidade seminal pós-crio não inviabiliza paternidade (TRA);

Criopreservação espermatozoides extraídos do epidídimo ou parênquima testicular: viável.

Preservação da fertilidade Preservação da fertilidade masculinamasculina

Contato: labfiv@androfert.com.brContato: labfiv@androfert.com.br

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