METABOLISMO

METABOLISMO

•Metabolismo é o conjunto de transformações (reacções químicas) que as substâncias químicas sofrem no interior dos organismos vivos (células).

•Estas reacções são responsáveis pelos processos de síntese e degradação dos nutrientes na célula e constituem a base da vida, permitindo o crescimento e reprodução das células, mantendo as suas estruturas e adequando respostas aos seus ambientes.

•Anabolismo A parte do metabolismo que se refere à

complexidade de substâncias num organismo, ou seja, a partir de moléculas mais simples, são criadas moléculas mais complexas.

•Catabolismo A parte do metabolismo que se refere à

assimilação ou processamento da matéria adquirida para fins de obtenção de energia. Parte sempre de macromoléculas, que contêm quantidades importantes de energia (glicose, triglicéridos, etc). Estas substâncias são transformadas de modo a que restem, no final, micromoléculas, pobres em energia (H2O, CO2, NH3), aproveitando, o organismo, a formação e libertação de energia resultante deste processo.

Relações energéticas

entre anabolismo e catabolismo

CAMINHOS METABÓLICOS• Os “caminhos” metabólicos são séries de reacções

enzimáticas interligadas, que produzem produtos específicos.

• Os processos catabólicos e anabólicos estão relacionados da seguinte maneira: ▫ nos processos catabólicos, complexos compostos

(metabólitos) são “partidos” em produtos mais simples; ▫ a energia livre libertada neste processo é conservada

pela consequente síntese de ATP a partir de ADP+Pi, ou pela redução do coenzima NADP+ para NADPH.

• O ATP e o NADPH são as mais importantes fontes de energia para as reacções anabólicas.

• O acetil-coenzimaA participa na maior parte dos processos catabólicos.

Caminhos Metabólicos do Organismo

Considerações Termodinâmicas

• Os mecanismos metabólicos são irreversíveis. ▫ Uma reacção altamente exergónica é irreversível; se se tratar

de uma reacção em vários passos, se um deles for irreversível, então todo o processo se torna irreversível.

• Todos os mecanismos metabólicos têm um primeiro passo cometido. ▫ Embora a maioria das reacções metabólicas estejam muito

próximas do equilíbrio químico, há quase sempre uma reacção exergónica irreversível num dos primeiros passos do metabolismo.

• Os mecanismos catabólico e anabólico são diferentes. ▫ Se um metabolito é convertido noutro metabolito por um

processo exergónico, tem que ser fornecida energia livre para converter o segundo metabolito novamente no primeiro e assim diferentes caminhos de reacção têm de ser tidos em conta pelo menos nalguns passos.

Estrutura do fosfato inorgânico (ATP)O ATP (adenosina trifosfato), que aparece em todas as formas de vida

conhecidas, consiste numa adenosina (adenina+ribose) na qual três grupos fosforil (-PO3

2-) estão sequencialmente ligados por uma ligação fosfoéster e duas ligações fosfoanídricas.A importância biológica do ATP assenta na grande quantidade de energia que acompanha a quebra das suas ligações fosfoanídricas.

Grupos Funcionais -Tipos de Reacções

Grupos funcionais

Reacção de oxidação redução

METABOLISMO DOS GLÚCIDOS

ENERGIA DO METABOLISMO• Cada macromolécula é dividida noutras mais

pequenas.

▫ Glúcidos – açúcares simples▫ Lípidos – ácidos gordos e glicerol▫ Proteínas – aminoácidos

• Cada etapa da sua cisão deve ser um processo controlado.

• ATP – unidade básica de transferência de energia.

NADH – NICOTINAMINA ADENINA DINUCLEÓTIDOFADH2 – FALVINA ADENINA DINUCLEÓTIDO

VISÃO GERAL DOS PROCESSOS CATABÓLICOS

PROTEÍNAS

AMINOÁCIDOS

AÇUCARES SIMPLES

ÁCIDOS GORDOS

GLICÓLISE

PIRUVATO

ACETIL CoA

CICLO DO ÁCIDO CÍTRICO

FOSFORILAÇÃO OXIDATIVA

GLÚCIDOS LÍPIDOS1ª ETAPA

2ª ETAPA

3ª ETAPA

ATP

ATP

•Fígado e vesícula biliar▫Produzem sais biliares.▫Emulsionam as gotas de gorduras –

digestão mais fácil.•Intestino delgado

▫Degradação posterior.▫Produz aminoácidos, hexoses, ácidos

gordos e glicerol.▫Desloca materiais para o sangue para

serem transportados às células.

PRIMEIRA ETAPA

•Hidrólise dos alimentos em subunidades mais pequenas (sistema digestivo).▫Glândulas salivares

Segregam amilase – digere amido.▫Estômago

Segrega HCl – desnatura as proteínas e pepsina.

▫Pâncreas Segrega enzimas proteolíticos e lipases.

Degradam proteínas e lípidos.

SEGUNDA ETAPA

•Conversão de monómeros numa forma que pode ser oxidada completamente.▫Açúcares – começa com a glucose ou

frutose – convertida em acetil-CoA.

▫Aminoácidos – todos os desaminados podem entrar em qualquer etapa.

▫Ácidos gordos – convertidos em acetil-CoA.

TERCEIRA ETAPA

•Oxidação completa de nutrientes e a produção de ATP.

▫Tudo é convertido em acetil-CoA

▫O acetil entra no ciclo do ácido cítrico

▫Onde é convertido em CO2 e energia (ATP)

METABOLISMO DA GLUCOSE

Glucose-6-P

Glucose

Poliósidos

Ácido Pirúvico

GlicerolLípidos

Pentoses

Ciclo de KrebsCO2 + H2O

Ácido Láctico

Ácido Pirúvico

Glicólise

Fermentação

Ácidos Gordos

Aminoácidos

Proteínas

VIAS METABÓLICAS A PARTIR DA GLUCOSE-6-P

GLICÓLISE Catabolismo da Glucose

• 1ª etapa do metabolismo dos glúcidos.

• Os açúcares simples são degradados em

piruvato.

• Processo anaeróbico (Fermentação) – não é

necessário oxigénio.

• Todos os seres vivos utilizam este processo.

A glicólise é o processo que leva à “quebra” da

glucose. É a sequência de dez reacções enzimáticas,

na qual uma molécula de glucose é convertida em

duas moléculas de gliceraldeído-3-fosfato. Dos três

piruvatos carbónicos há o aparecimento de 2 ATP’s.

A glicólise é extremamente importante pois tem um

papel de destaque no fornecimento de energia sob a

forma de ATP e na preparação da glucose e outros

compostos para seguintes degradações oxidativas.

• A glicólise pode ser decomposta em duas partes:

• Parte I (Investimento energético – reacções 1-5)▫ Na sua fase inicial a glucose é fosforilada e partida de

forma a “aguentar” duas moléculas de fosfato. Este processo consome 2 ATP’s.

• Parte II (Recuperação energética – reacções 6-10)▫ As duas moléculas de gliceraldeído-3-fosfato são

convertidas em piruvato, com a redução de 4 ATP’s.

• Assim a glicólise vai ter um balanço total positivo de 2 ATP’s, visto que na fase inicial são gastos dois ATP’s.

Equação geral da glicólise

Parte I

• Hexocinase: Primeira utilização do ATP:▫ A reacção 1 da glicólise é a transferência de um grupo fosforil

do ATP para a glucose, formando glucose-6-fosfato (G6P), numa reacção catalisada pelo enzima hexocinase.

• Isomerase fosfoglucosídica:▫ A reacção 2 da glicólise é a conversão do G6P em frutose-6-

fosfato (F6P), através da acção do enzima isomerase fosfoglucosídica (transformação de uma hexose numa pentose).

• Fosfofrutocinase: segunda utilização de ATP:▫ A reacção 3 da glicólise é catalisada pelo enzima

fosfofrutocinase. Este último fosforila o F6P, formando fructose-1,6-bifosfato (FBP ou F1,6P). Esta reacção é semelhante à reacção 1 e também se dá na presença do ião Mg2+.

ENZIMAS E REACÇÕES DA PARTE I

• Aldolase:▫ A reacção 4 da glicólise é catalisada pelo aldolase e é onde há

a quebra do FBP para formar duas trioses: gliceraldeído-3-fosfato (GAP) e dihidroxoacetonofosfato (DHAP).

• Isomerase Fosfotriose:▫ A reacção 5 da glicólise, apenas o GAP continua o processo

glicolítico. No entanto, como o GAP e o DHAP são isómeros funcionais aldeído-cetona, podem ser interconvertidos por uma reacção de isomerização por intermédio de um enodiol. O triosefosfato isomerase catalisa este processo.

Parte II

ENZIMAS E REACÇÕES DA PARTE II

• Gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase: primeira formação energética:▫ A reacção 6 da glicólise é a oxidação e fosforilação do GAP

pelo NAD+ e Pi, catalisada pelo enzima gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase. Nesta reacção (oxidação aldeídica), uma reacção exergónica conduz à síntese do altamente energético 1,3-bofosfoglicerato (1,3-BPG).

• Fosfoglicerato-cinase: primeira formação de ATP:▫ Na reacção 7 da glicólise forma-se 1 ATP, sobrando 3-

fosfoglicerato (3PG), numa reacção catalisada pelo enzima fosfoglicerato-cinase. De notar a ligação Mg2+-ADP.

• Fosfoglicerato-mutase:▫ Na reacção 8 da glicólise 3PG é convertido em 2-fosfoglicerato

(2PG) pelo enzima fosfoglicerato-mutase. Um mutase cataliza a troca intramolecular de um grupo funcional de uma posição para outra.

• Enolase: segunda formação energética:▫ Na reacção 9 o 2PG é desidratado para fosfoenolpiruvato

(PEP), numa reacção catalisada pelo enolase.

• Piruvato-cinase: segunda formação de ATP:▫ Na última reacção (10) da glicólise, o enzima pirovato-cinase

junta a energia livre resultante da “quebra” do PEP, sintetizando ATP e formando piruvato.

Três destinos possíveis para o Piruvato formado na Glicólise

PIRUVATO É O ACEITADOR TERMINAL NA FERMENTAÇÃO DO ÁCIDO LÁCTICO

• Quando os tecidos humanos não são fornecidos com oxigénio suficiente para suportar a oxidação aérobica do piruvato e do NADH produzidos na glicólise, o NAD+ é regenerado pela redução do piruvato em lactato. (fígado – ciclo de Cori).

ETANOL É O PRODUTO DA REDUÇÃO NA FERMENTAÇÃO ALCOÓLICA

• Os microorganismos fermentam a glucose em etanol e CO2, em vez de lactato. A glucose é convertida em piruvato pela glicólise, e o piruvato é convertido em etanol e CO2 num processo de duas etapas:

CICLO DO ÁCIDO CÍTRICO•Etapa final do metabolismo dos glúcidos,

lípidos e aminoácidos.•É também chamado de ciclo de Krebs em

honra de Hans Krebs, primeira pessoa a descrevê-lo.

•É um processo com 9 etapas (8+1).•É um ciclo oxidativo.

Requer oxigénio (Aeróbico)

SÍNTESE DO ACETIL-COEZIMA A• O acetil-coenzima A é formado do piruvato através de

descarboxilação oxidativa por um complexo multienzimático (grupo de enzimas associadas entre si não covalentemente que catalisam dois ou mais passos sequenciais de um processo metabólico) chamado desidrogenase pirúvica.

• Este complexo possui múltiplas cópias de três enzimas: E1, E2 e E3.

• O complexo desidrogenase pirúvica catalisa cinco reacções sequenciais:▫ O piruvato é oxidado a acetato, com a libertação de CO2.▫ Alguma energia da oxidação é conservada pela redução de

NAD+ a NADH.▫ Parte da energia restante é armazenada temporariamente,

adicionando a molécula de CoAAcetil-CoA.

ENZIMAS E REACÇÕES DO CICLO DO ÁCIDO CÍTRICO

• Reacção 1: Citrato sintase▫ O enzima citrato sintase medeia a reacção da Acetil-CoA e oxaloacetato a citrato.

• Reacção 2: Aconitase▫ Mediador da reacção de isomerização do citrato a isocitrato.

• Reacção 3: Isocitrato desidrogenase▫ Este enzima conduz à descarboxilação oxidativa do isocitrato a

α- cetoglutarato.

• Reacção 4: a-cetoglutarato desidrogenase▫ Esta reacção é a reacção de descarboxilação oxidativa do α-

cetoglutarato a succinil-CoA.

• Reacção 5: Succinil-CoA sintetase▫ Hidrólise da succinil-CoA a succinato por fosforilação do

GTP.

• Reacção 6: Succinato desidrogenase▫ Desidrogenação estereoespecífica do succinato a

fumarato.

• Reacção 7: Fumarase▫ Hidratação estereoespecífica do fumarato a L-malato.

• Reacção 8: Malato desidrogenase▫ Oxidação do L-malato a oxaloacetato.

REGULAÇÃO DO CICLO DO ÁCIDO CÍTRICO

•A disponibilidade de substratos, a inibição pelos produtos e a inibição por feedback por outros intermediários do ciclo, influenciam a operacionalidade deste ciclo.

•O ciclo á assim regulado por mecanismos de feedback, que coordenam a produção de NADH com o gasto energético.

NATUREZA ANFIBÓLICA DO CICLO DE KREBS

Um trajecto metabólico ou é catabólico ou é anabólico. O ciclo de Krebs é catabólico,

pois envolve degradação e é um importante sistema de conservação

energético nos organismos. No entanto, muitos dos produtos intermediários deste ciclo são usados em biossíntese, ou seja, em reacções anabólicas. O ciclo de Krebs é assim anfibólico (catabólico e anabólico

em simultâneo).

Balanço global em termos de número de moléculas de ATP produzidas por molécula de glucose

• A energia do transporte electrónico é conservada através da síntese de ATP pela fosforilação oxidativa:▫ Por cada NADH são produzidas cerca de 2,5 moléculas de ATP.▫ Por cada FADH2 são produzidas cerca de 1,5 moléculas de ATP.

Fase NADHFADH2

ATP (formado)

ATP (mobilizado)

Glicólise 2 2,5 X 2 +2 = 7 ou 5* 2

Formação de Acetil CoA

2 2,5 X 2 + 2 = 7

Ciclo de Krebs 42

6 X 2,5 + 2 X 1,5 + 2 (GTP/ATP) = 20

SUB-TOTAL

34 ou 32 2

Total 32 ou 30

Nos músculos e no cérebro 3 ATP30 ATP por molécula de glucose => 2 Ciclos de Krebs

Uma molécula de glucose => 2 piruvatos

As três etapas do catabolismo das proteínas, ácidos gordos e hidratos de carbono na respiração celular.Etapa 1: oxidação dos ácidos gordos, glucose alguns aminoácidos produzem acetil-CoA. Etapa 2: oxidação de grupos acetil no ciclo de Krebs inclui quatro passos onde os electrões são abstraídos. Etapa 3: os electrões são levados pelo NADH e FADH2 são funilizados para uma cadeia de transportadores de electrões mitocondriais – cadeia respiratória – reduzindo o O2 a H2O. Esta corrente de electrões leva à produção de ATP.

MITOCÔNDRIA• A mitocôndria é um

organelo celular que possui uma membrana externa permeável à maioria das micromoléculas e uma outra membrana interna, que contém uma vasta área de invaginações. O número de invaginações chama-se crista e reflecte a actividade respiratória da célula, pois é aí que se dá o transporte electrónico.

FOSFORILAÇÃO OXIDATIVAA fosforilação oxidativa é um processo pelo qual é formado ATP quando os electrões são transferidos do NADH e do FADH2 para o O2,

através de uma série de transportadores electrónicos. A fosforilação ocorre na

membrana interna da mitocôndria. O ciclo de Krebs e a oxidação dos ácidos gordos, que

fornecem a maior parte dos cofactores reduzidos, dão-se na matriz mitocondrial. A

oxidação e a fosforilação são processos acoplados.

• A transferência electrónica dá-se passo a passo, do NADH ou FADH2 para o O2, através de uma série de transportadores electrónicos (I, III, IV), o que produz um bombardeamento de protões para fora da matriz mitocondrial. Gera-se assim uma força, que consiste num gradiente de pH e num potencial electroquímico transmembranar.

• O ATP é assim sintetizado quando os protões voltam a entrar na matriz mitocondrial através de um complexo enzimático (V-ATPase). A cadeia respiratória consiste em 3 complexos enzimáticos (I, III, IV), ligados por dois transportadores electrónicos: CoQ e Citocromo C.

•A energia livre libertada no transporte electrónico é conservada de modo a ser utilizada pelo ATPsintetase. Tal conservação energética é chamada de acoplamento energético de transdução de energia.

•Hipótese Quimiosmótica:▫Esta teoria pressupõe que á acoplamento do

transporte electrónico gerando a síntese de ATP devido à criação de um gradiente protónico na membrana mitocondrial interna.

•Dados experimentais que comprovam a Teoria de Mitchell:▫ 1. A fosforilação oxidativa requer membranas

intactas.▫ 2. A membrana mitocondrial interna é

impermeável a iões, pois a sua livre difusão iria descarregar o gradiente electroquímico.

▫ 3. Durante o transporte electrónico é gerado um gradiente protónico através da membrana.

▫ 4. Compostos que aumentam a permeabilidade da membrana a H+, dissipando assim o gradiente electroquímico (desacopladores), permitindo o transporte electrónico, mas parando a síntese de ATP.

▫ 5. O aumento artificial da acidez no exterior da membrana estimula a síntese do ATP.

FORÇA PROTOMOTRIZ

Força protomotriz = Gradiente Químico (∆pH) + Potencial da membrana (Em)

∆G= 2.3 RT ∆pH + Z ∆ψ F

Sendo: Z – carga do protão ∆ψ- potencial da membrana F- constante de Faraday

∆pH = (pH matriz) – (pH citosol)

METABOLISMO DO GLICOGÉNIO E

GLUCONEOGÉNESE•O glicogénio funciona nos animais como

uma reserva de glucose (polimerizada) de fácil mobilidade, sendo uma constante fonte de glucose/energia para todos os tecidos. O glicogénio é armazenado principalmente no fígado.

•O glicogénio é assim um polímero de glicose, com ligações α-1,4 em cadeia e ligações α-1,6 para as ramificações (cada ramificação tem de 8 a 12 resíduos).

Grânulos e Estrutura do Glicogénio

• Porquê glicogénio?▫1. Regulação dos níveis de glucose no

sangue, pois o gerado pelo metabolismo das gorduras é insuficiente.

▫2. Libertação da glucose entre refeições e durante a actividade muscular, pois os músculos não mobilizam a gordura tão rapidamente como o glicogénio.

• Porquê estrutura ramificada?▫1. Maior solubilidade.▫2. Maior número de pontos de

metabolização, ou seja, vai possuir vários extremos não redutores por onde a remoção sequencial se dá, tendo por seu lado apenas um extremo redutor.

DEGRADAÇÃO DO GLICOGÉNIO

• A degradação do glicogénio dá-se através de um processo que inclui 3 enzimas: glicogénio fosforilase, transferase e fosfoglucomutase.

• 1. Glicogénio fosforilase

• 2. “Debranching enzyme” (transferase)

• Este enzima remove as ramificações do glicogénio, tornando os resíduos de glicose acessíveis para a acção da enzima glicogénio fosforilase.

• 3. Fosfoglucomutase• Converte G1P em G6P, que pode ter vários destinos metabólicos.

SÍNTESE E TRANSPORTE DA GLUCOSE

CONTROLO DO METABOLISMO DO GLICOGÉNIO

• A síntese e degradação do glicogénio são

exergónicos em condições fisiológicas, logo, tal

facto torna a sua regulação importante, de acordo

com as necessidades celulares. Assim, o glicogénio

fosforilase entra em “competição” com o

glicogénio sintetase, consoante as necessidades do

organismo em questão.

• O controlo dá-se por:▫ 1. Regulação alostérica: controlo da concentração

de cada uma dos enzimas anteriores por inibidores.▫ 2. Modificações covalentes, por controlo hormonal:▫ Insulina, situado no fígado, estimula a síntese do

glicogénio.▫ Epinefrina (músculo) e glucagon (fígado),

estimulam a degradação do glicogénio, mediada pelo AMP cíclico (cAMP).

▫ 3. Regulação em cascata: fosforilação/defosforilação/

controlo hormonal.

• Para uma taxa de glucose baixa no sangue, temos:

Para uma taxa alta de glucose no sangue, temos:

CONTROLO DOS NÍVEIS DE GLUCOSE

•Insulina▫ Hormona produzida pelas células beta do

pâncreas.▫ Armazenada como pro-insulina (forma inactiva)

sob a forma de pequenos grânulos.▫ A sua libertação é desencadeada pelo aumento

dos níveis de glucose no sangue.▫ Estimula a absorção de glucose nos tecidos

pela ligação a receptores na membrana celular. Permitindo assim a entrada de glucose na célula.

ACÇÃO DA INSULINA

•Glucagon▫ Hormona produzida no pâncreas sob forma

inactiva.▫ Baixos níveis de glucose resulta a sua conversão

numa forma activa e é libertada.▫ A sua entrada nas células do fígado (hepatócitos)

resulta na conversão do glicogénio em glucose. A glucose é libertada no sangue.

•Epinefrina▫Adrenalina – hormona de emergência e combate.▫Também actua no sistema nervoso.▫Resulta uma prontidão rápida de todos os

sistemas.

ACÇÃO DO GLUCAGON E DA EPINEFRINA