DNA Fingerprint

Área – Sociedade, Ciência e Tecnologia

Núcleo Gerador 7

Domínio de Referência 2 – Processos e Métodos Científicos

Professor: Graça Mendonça

Trabalho Realizado: Ana Fonseca nº3

Marta Dinis nº13

Herança Genética

• Herança genética é processo pelo qual um organismo adquire características semelhantes à do organismo que o gerou, através de informações codificadas (código genético) que são transmitidas à descendência.

DNA Fingerprint – O que é?

• O DNA Fingerprint é um método de identificação que compara fragmentos de ácido desoxirribonucleico (DNA). O DNA é o material genético que se encontra no núcleo (ou não se o organismo for procarionte) das células de todos os seres vivos. Com exceção de gémeos idênticos

• O DNA completo de cada indivíduo é único.

• A estrutura química do DNA de todos é o mesmo. A única diferença entre as pessoas (ou qualquer animal) é a ordem dos pares de bases. Há tantos milhões de pares de bases no DNA de cada pessoa que cada pessoa tem uma sequência diferente.

• Usando estas sequências, cada pessoa pode ser identificada unicamente pela sua sequência de pares de base.

• No entanto, porque há tantos milhões de pares de bases, a tarefa seria muito demorada. Em vez disso, os cientistas são capazes de usar um método mais rápido, por causa da repetição de padrões de DNA.

• Esses padrões DNA são capazes de determinar se duas amostras de DNA são da mesma pessoa, pessoas relacionadas, ou não-relacionados com as pessoas.

• Diferentes fragmentos de DNA movimentam-se de modo diferente quando submetidos a electroforese (técnica em que determinadas moléculas são sujeitas à ação de um campo elétrico num meio poroso) e o resultado é um padrão de bandas que difere de indivíduo para indivíduo.

Técnicas de obtenção do DNA

• Existem várias técnicas de obtenção das impressões digitais genéticas, entre as quais a de RFLP (Restriction Fragment Lenght Polymorphism/Polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição) , a mais utilizada, e ainda a de PCR (Polymerase Chain Reaction/Reação em cadeia de polimerase)

O Processo da técnica de RFLP

Origem Animal Origem Vegetal

Sangue Folhas

Secreções (como esperma) Caule

Saliva Raiz

Urina Semente

Tecidos moles Pólen

Pêlos com folículos Pétalas e outros

Caspa

Dentes

Ossos e outros

1ºPasso – Extracção e purificação do DNA.

• O DNA é purificado através da utilização de métodos químicos (ex:fenol, chelex, etc.)

2ºPasso (facultativo) - Processo de PCR

(Reação de polimerização em cadeia)

• Usado quando a amostra de DNA é inferior ao necessário para realizar a sua análise;

• Permite obter cópias de uma parte do material genético em quantidade suficiente.

3ºPasso – DNA é submetido a enzimas de restrição específicas

• Esta passo baseia-se na existência de padrões repetitivos no DNA ;

• Seleccionam-se determinadas enzimas de restrição, que dividem o DNA nestes segmentos de restrição cujas dimensões, composição em nucleótidos e localização variam muito de pessoa. para pessoa;

4ºPasso – Electroforese • A electroforese

de DNA é realizada em gel de agarose;

• O gel de agarose que é imerso numa tina de electroforese com uma solução-tampão que estabelece a condução eléctrica com a fonte de alimentação.

5º Passo – método de Southern blot

• Desnaturação

• Transferência do DNA para uma membrana

• Tratamento com a sonda

Sondas Radioativas

Saco de Plástico

• A membrana é agora tratada com uma sonda hibridizadora - que é uma molécula de DNA isolada cuja sequência é conhecida e é idêntica, ou então complementar, aquela sequência a qual se quer determinar a presença ou não na amostra

Aplicações do DNA Fingerprint

• Análise forense;

• Determinação de paternidade;

• Diagnóstico de doenças;

• Diagnóstico molecular.

FIM!