Breves Noções de Engenharia Genética

• Engenharia genética: as metodologias do DNArecombinante.

• Enzimas de restrição.

• Clonagem molecular

• Hibridação molecular.

• Sequênciação de ácidos nucleicos.

• A reacção em cadeia da polimerase – PCR.

• Análises forenses e ‘DNA fingerprinting’

Bibliografia

• Bruce Alberts, Dennis Bray, Karen Hopkin, Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts and Peter Walter (2004) Essential Cell Biology 2ª ed. Garland Science Publishing. Cap.10

Sumário

Enzimas de Restrição:Enzimas de Restrição:‘Tesouras’ Moleculares‘Tesouras’ Moleculares

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Visualização em Gel de Visualização em Gel de AgaroseAgarose

Gel corado com Brometo de Etídio visualizado sob luz

UV

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Clonagem MolecularClonagem Molecular

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Clonagem num Clonagem num PlasmídeoPlasmídeo

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Hibridação Hibridação MolecularMolecular

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Sonda

AlvoHibridação

SinalSonda

AlvoHibridação

Sinal

FFluorescent luorescent IIn n SSitu itu HHybridization ybridization (FISH)(FISH)

Southern BlottingSouthern Blotting

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

AA

BB

CC

Ab

Banco Banco GenómicoGenómico

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Sequênciação Sequênciação com com ddNTPsddNTPs

Reacções de Reacções de SequênciaçãoSequênciação

dNTP (normal) ddNTP (sequênciação)

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Método de Método de SangerSanger: Quatro : Quatro Reacções de Reacções de SequênciaçãoSequênciação

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Sequenciação Sequenciação AutomáticaAutomática

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Reacção em Cadeia da Reacção em Cadeia da Polimerase Polimerase (PCR)(PCR)

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Análises Forenses: ‘DNA Análises Forenses: ‘DNA Fingerprinting’Fingerprinting’

Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e

Sangue Lavado bucal

Tecidos sólidos

Cabelos Sangue seco

Óssos fósseis