Breves Noções de Engenharia Genética
• Engenharia genética: as metodologias do DNArecombinante.
• Enzimas de restrição.
• Clonagem molecular
• Hibridação molecular.
• Sequênciação de ácidos nucleicos.
• A reacção em cadeia da polimerase – PCR.
• Análises forenses e ‘DNA fingerprinting’
Bibliografia
• Bruce Alberts, Dennis Bray, Karen Hopkin, Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts and Peter Walter (2004) Essential Cell Biology 2ª ed. Garland Science Publishing. Cap.10
Sumário
Enzimas de Restrição:Enzimas de Restrição:‘Tesouras’ Moleculares‘Tesouras’ Moleculares
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
Visualização em Gel de Visualização em Gel de AgaroseAgarose
Gel corado com Brometo de Etídio visualizado sob luz
UV
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
Clonagem MolecularClonagem Molecular
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
Clonagem num Clonagem num PlasmídeoPlasmídeo
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
Hibridação Hibridação MolecularMolecular
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
Sonda
AlvoHibridação
SinalSonda
AlvoHibridação
Sinal
FFluorescent luorescent IIn n SSitu itu HHybridization ybridization (FISH)(FISH)
Southern BlottingSouthern Blotting
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
AA
BB
CC
Ab
Banco Banco GenómicoGenómico
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
Sequênciação Sequênciação com com ddNTPsddNTPs
Reacções de Reacções de SequênciaçãoSequênciação
dNTP (normal) ddNTP (sequênciação)
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
Método de Método de SangerSanger: Quatro : Quatro Reacções de Reacções de SequênciaçãoSequênciação
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
Sequenciação Sequenciação AutomáticaAutomática
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
Reacção em Cadeia da Reacção em Cadeia da Polimerase Polimerase (PCR)(PCR)
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
Análises Forenses: ‘DNA Análises Forenses: ‘DNA Fingerprinting’Fingerprinting’
Alberts et al (2004) Ess Cell Biol 2/e
Sangue Lavado bucal
Tecidos sólidos
Cabelos Sangue seco
Óssos fósseis
