PI 7152 Rev 4, Abril 2011

ÁGAR SALMONELLA SHIGELLA – SALMONELLA SHIGELLA AGAR

(7152) Uso Previsto O Ágar Salmonella Shigella é utilizado para o isolamento de Salmonella spp. e algumas cepas de Shigella spp. Sumário e Explicação do Produto Salmonelose é um problema de saúde pública de nível mundial. Infecções causadas por Salmonella não-typhi causam doenças moderadas autolimitadas. A febre Tifoide causada por Salmonella typhi, é caracterizada pela presença de febre, dor de cabeça, diarreia, dor abdominal e pode resultar em danos fatais ao sistema respiratório, hepático e nervoso.1 Esta infecção pode ser resultado do consumo de alimentos contaminados com a Salmonella spp., crus, mal cozidos ou processados indevidamente. Shigelose causada por Shigella spp., é uma doença intestinal caracterizada por dor abdominal, febre, e diarreia aquosa. Quando associada com surtos, a Shigelose é normalmente transmitida através de alimentos e/ou água contaminados. O Ágar Salmonella Shigella é uma modificação do Ágar Citrato Desoxicolato descrito por Leifson.2 O Ágar Salmonella Shigella é superior a outros meios para o isolamento de Salmonella spp. e Shigella spp.3 O Ágar Salmonella Shigella é recomendado para testes de Salmonella spp. e certas Shigella spp. em espécimes clínicos e alimentos.1,4,5

Princípios do Procedimento Extrato de Carne Bovina, Digestão Enzimática de Caseína e Digestão Enzimática de Tecido Animal fornecem nitrogênio, carbono e vitaminas necessárias para o crescimento do organismo. A Lactose é o carboidrato presente no Ágar Salmonella Shigella. Sais Biliares, Citrato de Sódio e Verde Brilhante inibem bactérias Gram-positivas, a maioria dos coliformes e inibem Proteus spp., enquanto que permitem o crescimento de Salmonella spp. Tiossulfato de Sódio e Citrato Férrico permitem a detecção de sulfeto de hidrogênio através da produção de colônias com centros pretos. O Vermelho Neutro é o indicador de pH. Fórmula / Litro Extrato de Carne Bovina ........................................................... 5 g Digestão Enzimática de Caseína ........................................... 2,5 g Digestão Enzimática de Tecido Animal ................................. 2,5 g Lactose ................................................................................... 10 g Sais Biliares ........................................................................... 8,5 g Citrato de Sódio ..................................................................... 8,5 g Tiossulfato de Sódio .............................................................. 8,5 g Citrato Férrico ........................................................................... 1 g Verde Brilhante .............................................................. 0,00033 g Vermelho Neutro ................................................................ 0,025 g Ágar ..................................................................................... 13,5 g pH Final: 7,0 ± 0,2 a 25°C A fórmula pode ser ajustada e/ou suplementada conforme necessário para atender as especificações de desempenho. Precauções 1. Somente para o uso em laboratório. 2. IRRITANTE. Irritante para os olhos, sistema respiratório e pele.

PI 7152 Rev 4, Abril 2011

Modo de Preparo 1. Suspenda 60 g do meio em 1 L de água purificada 2. Aqueça, agitando frequentemente e ferva por 1 minuto para dissolver completamente o meio. 3. NÃO AUTOCLAVE. Especificações de Controle de Qualidade Aparência Desidratado: O pó é homogêneo, fluxo livre e claro a médio bege rosado. Aparência Preparado: O meio preparado é laranja avermelhado a pêssego e ligeiramente turvo. Resposta Esperada de Cultivo: Resposta de cultivo do Ágar Salmonella Shigella incubado aerobiamente a 35 ± 2°C e examinado para crescimento após 18–24 horas.

Micro-organismo Inóculo Aproximado

(UFC)

Resultados Esperados Crescimento Reações

Enterococcus faecalis ATCC® 29212 103 Inibição completa ---

Escherichia coli ATCC® 25922 103 Inibição parcial a completa

Colônias rosas a vermelho-rosadas,

podem ter precipitados de bile

Salmonella typhimurium ATCC® 14028 10–300 Regular a bom Colônias incolores com centros pretos

Shigella flexneri ATCC® 12022 10–300 Regular a bom Colônias incolores Os organismos listados são os mínimos que devem ser avaliados para o teste de controle de qualidade. Procedimento do Teste Para o isolamento de Salmonella spp. e Shigella spp. provenientes de espécimes clínicos, semeie amostras fecais e swabs retais em um quadrante do Ágar Salmonella Shigella. Incube as placas a 35°C e examine após 24 e 48 horas para colônias características de Salmonella spp. ou Shigella spp. Para testes em alimentos, consulte as referências apropriadas. Resultados Organismos entéricos são diferenciados de acordo com a habilidade em fermentar lactose. Salmonella spp. e Shigella spp. não são fermentadores de lactose e formam colônias incolores no Ágar Salmonella Shigella. Salmonella spp. positivas para a presença de H2S, produzem colônias com centros pretos. Algumas Shigella spp. são inibidas no Ágar Salmonella Shigella. E. coli produz colônias rosas a vermelhas e podem formar precipitado de bile. Armazenamento Armazene o frasco contendo o meio desidratado devidamente fechado entre 2–30°C. Uma vez aberto e fechado novamente, coloque o frasco em um ambiente de baixa umidade e na mesma temperatura de armazenamento. Proteja contra a umidade e luz mantendo o frasco firmemente fechado. Validade Refira-se à data de validade no frasco. O meio desidratado deve ser descartado se não fluir livremente ou se houver mudança na coloração original. A validade se aplica ao meio em sua embalagem intacta quando armazenado como indicado.

PI 7152, Rev 4, Abril 2011

Limitações do Procedimento 1. Ágar Salmonella Shigella é altamente seletivo e não é recomendado para o isolamento primário de

Shigella. 1,2,6 Algumas Shigella spp. podem ser inibidas. 2. Alguns organismos não patogênicos podem crescer no Ágar Salmonella Shigella. Esses organismos

podem ser diferenciados pela habilidade de fermentar a lactose e por outros testes confirmatórios. Embalagem Ágar Salmonella Shigella N° Código 7152A 500 g 7152B 2 kg 7152C 10 kg Referências 1. P. R. Murray, E. J. Baron, M. A. Pfaller, F. C. Tenover, and R. H. Yolken (eds.). Manual of clinical microbiology, 6th ed.

American Society for Microbiology, Washington, D. C. 2. Leifson, E. 1935. New culture media based on sodium desoxycholate for the isolation of intestinal pathogens and for the

enumeration of colon bacilli in milk and water. J. Pathol. Bacteriol 40:581. 3. Rose, H. M., and M. H. Kolodny. 1942. The use of SS (Shigella-Salmonella) Agar for the isolation of Flexner Dysentery bacilli

from the feces. J. Lab. Clin. Med. 27:1081-1083. 4. Isenberg, H. D. (ed.). 1992. Interpretation of aerobic bacterial growth on primary culture media, Clinical microbiology procedures

handbook, vol. 1 p. 1.61-1.67. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 5. Vanderzant, C., and D. F. Splittstoesser (eds.). 1992. Compendium of methods for the microbiological examination of foods, 3rd

ed. American Public Health Association, Washington, D.C. 6. Taylor, W. I., and B. Harris. 1965. Isolation of shigellae. II. Comparision of plating media and enrichment broths. Am. J. Clin.

Pathol. 44:476. 7. McFaddin, J. F. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria, Vol. 1. Williams & Wilkins,

Baltimore, MD. Informação Técnica Contate a Neogen do Brasil para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de cultura desidratado no telefone 19.3935-3727. Contate a Acumedia Manufacturers, Inc. para Serviços Técnicos ou questões envolvendo a preparação ou desempenho do meio de cultura desidratado no telefone +1 (517)372-9200 ou fax +1 (517)372-2006.