Extração do DNA

Biologia-Geologia

EXTERNATO RIBADOURO

Biologia e Geologia-11.º ano de Escolaridade

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Índice

Objetivo ...................................................................................................................................................... 3

Introdução .................................................................................................................................................. 4

Materiais..................................................................................................................................................... 6

Procedimento ............................................................................................................................................. 7

Resultados .................................................................................................................................................. 8

Discussão de resultados/Conclusão ........................................................................................................... 9

Anexos ......................................................................................................... Error! Bookmark not defined.

Bibliografia................................................................................................................................................ 10

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Objetivo

Extração e visualização do DNA de um kiwi.

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Introdução

Cada organismo possui um património genético que o torna único. O seu DNA,

molécula biológica universal, é o suporte da informação, genética que coordena todas as

atividades celulares e que é transmitida a todas as células-filhas no decurso do

desenvolvimento.

Desta forma, a molécula de ADN (ácido desoxirribonucleico, constituinte essencial

dos cromossomas do núcleo celular), pode ser comparada a uma longa escada de corda

enrolada em torno de um eixo imaginário, isto é, é formado por uma dupla hélice. As

cordas das escadas são formadas pela alternância regular duma molécula de açúcar, a

desoxirribose (pentose), e de um grupo fosfato. Os degraus, fixados às moléculas de

açúcar, são formados por um par de bases azotadas, com quatro variantes possíveis -

adenina-timina (A-T), timina-adenina (T-A), guanina-citosina (G-C) ou citosina-guanina

(C-G) - que se ligam entre si, através de ligações/pontes de hidrogénio. Estas bases

pertencem a duas famílias moleculares - a adenina e a guanina são as bases púricas, a

citosina e a timina são bases pirimídicas.

O conjunto base-pentose-fosfato (Fig.1) constitui um nucleótido. A articulação de

um nucleótido com o seguinte efetua-se graças a uma ligação bioquímica que une um

átomo de oxigénio dum agrupamento fosfato a um átomo de hidrogénio associado à

pentose. A sucessão das bases resultantes do encadeamento dos nucleótidos representa a

mensagem genética.

A molécula de DNA, extremamente dobrada, cabe numa estrutura – o núcleo da

célula – cujo diâmetro não excede alguns milésimos de milímetro, mas que contudo, se a

desdobrássemos, obteríamos um filamento de cerca de 1,20 m de comprimento.

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Foi em 1869, que pela primeira vez, o DNA, foi isolado, pelo físico Friedrich

Miescher, pelo que, hoje em dia, com a evolução da ciência, é nos possível fazê-lo até

mesmo em casa, extraindo o DNA por exemplo de um kiwi.

Fig1 – Composição do DNA: 1- Pentose (desoxirribose);

2- base azotada; 3- Grupo Fosfato.

Fig 3 – Formação de uma falha

geradora de tsunamis.

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Material

Material de Laboratório Material

Tabuleiro Detergente sem marca (10mL)

Almofariz com Pilão Água (70mL)

Provetas (25 ± 0.5) mL Sal

Faca 1 Kiwi

Coador

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Procedimento

Descascou-se e cortou-se o kiwi em pequenos fragmentos e colocou-se no

almofariz.

Deitou-se o detergente num gobelé com água. Agitou-se suavemente.

Colocou-se a mistura obtida no almofariz e triturou-se.

Filtrou-se, sucessivamente, o produto obtido através de um coador.

Fez-se escorrer, lentamente o álcool refrigerado em quantidade aproximadamente

igual à do filtrado ao logo da parede da proveta.

Esperou-se algum tempo, e procurou-se começar a observar os resultados

pretendidos.

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Resultados

Fig 2- Mistura heterogénea

dividida em três fases: uma

superior, filamentosa e

esbranquiçada, uma

intermédia, alcoólica, e outra

inferior, aquosa.

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Discussão de resultados/Conclusão

Para extrair e visualizar DNA, são necessários vários componentes –

detergente, sal, álcool - cada um deles utilizado para um fim específico.

Uma célula é constituída por duas membranas, a plasmática e o invólucro nuclear;

estas são ainda formadas pela camada fosfolípida. O detergente terá, então,

principal função de dissolver as gorduras, logo as membranas, de modo a que o

DNA extravase, tornando-se então possível obtê-lo. O sal (cloreto de sódio) é

também um dos componentes a ser utilizado na experiência tendo como função, a

neutralização. O grupo fosfato, um dos componentes do DNA, apresenta elevado

número de cargas negativas, o que significa que estas cargas têm tendência para se

repelirem entre elas. O ião sódio ( tem carácter neutralizante, pelo que,

quando colocado, é atraído pelo grupo fosfato e o DNA ficará neutro, pelo que será

possível aglutiná-lo. O cloro ), apesar de fazer parte do processo, não interfere

neste, pois dissolve-se na água. Por fim, com a adição de álcool etílico refrigerado

pretende-se que se formem duas fases, uma superior, alcoólica e uma inferior,

aquosa, para que, a cromatina (DNA associado a proteínas), sendo mais denso que

água, sobe, aproxima-se do álcool, desidrata, aglutina, ficando mais visível.

Assim, o DNA ascendeu da fase inferior para a superior porque, é mais

denso que a água. No entanto, houve pouca formação de bolhas de ar já que

a temperatura do álcool, não era tão baixa quanto devia de modo a que

houvesse um grande choque térmico.

Porem não podemos afirmar que a massa filamentosa corresponde única e

exclusivamente ao DNA Essa massa filamentosa é a cromatina, que e

constituída pelo DNA e proteínas (nomeadamente as histonas), pois ao

longo da experiencia não foi realizada nenhuma etapa que permitisse a

separação destas duas biomoléculas.

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Bibliografia

Livros:

V.V, Terra, Universo de vida, 1º Parte - Biologia, Biologia – Geologia, 11º ano. Porto Editora.

Larousse, Enciclopédia Moderna. Círculo de Leitores. p. 104-105. 1v.

V.V, (2012), Preparação para o Exame Nacional 2013 Biologia e Geologia – 11º ano. Porto:

Porto Editora

V.V, (2010), Preparar o Exame Nacional Biologia e Geologia – 11º ano. Lisboa: Texto

Editores, Lda.