UNIVERSIDADE DE CAXIAS DO SUL

BIOQUMICA BSICA

PROTENAS

Alunos

Camila Carniel

Cristine Horn

Dbora Muniz de Souza

Fernanda Dorigon

Leandro Lopes da Silva

Sabrina Vailatti

Professor: Fernando Jos Castro Dumond

Caxias do Sul, 11 de abril de 2014.

INTRODUO

PROTENAS

As protenas so compostos de elevada massa molecular (5000 a vrios

milhes) produzidas pelas clulas vivas de todas as formas de vida. So polmeros

complexos de -aminocidos, unidos entre si por um tipo especfico de ligao

covalente a ligao peptdica. As protenas so constitudas por 20 aminocidos

diferentes reunidos em combinaes praticamente infinitas, possibilitando a formao

de milhes de estruturas diversas. As combinaes permitem s clulas a produo de

protenas com diferentes tamanhos, formas, estruturas, propriedades e funes.

A sequncia de aminocidos, que define as caractersticas das protenas,

determinada pelas informaes genticas contidas no ncleo da clula.

As funes biolgicas atribudas s protenas so variadas e importantes.

Atuam como:

Enzimas

Protenas transportadoras

Protenas de armazenamento

Protenas contrteis ou de motilidade

Protenas estruturais

Protenas de defesa

Protenas reguladoras.

So milhares as funes das protenas. Citam-se algumas de grande

importncia clnica: manuteno da distribuio de gua entre o compartimento

intersticial e o sistema vascular do organismo; participao da homeostse e coagulao

sangunea; nutrio de tecidos; formam tampes para a manuteno do pH.

PROTENAS

As protenas so elementos essenciais para o crescimento e reparao,

funcionamento e estrutura de todas as clulas vivas. Hormonais, como a insulina, que

controlam o acar sanguneo; enzimas, como as amilases, lipases e proteases que so

cruciais na digesto dos alimentos; anticorpos, que nos ajudam a combater as infeces,

protenas, musculares, que nos permitem a contrao, etc.

As protenas so compostas por aminocidos, peas bsicas, que se vo unindo

entre si. Uma protena normal pode conter 300 ou mais aminocidos. Cada protena tem

um nmero e uma sequncia de aminocidos especficos. A forma da molcula

importante, uma vez que determina a funo da protena.

Quando uma protena contm os aminocidos essenciais na quantidade

necessria para os seres humanos, diz-se que esta apresenta um elevado valor biolgico.

Quando um ou mais aminocidos essenciais esto presentes, mas em quantidades

insuficientes, diz-se que a protena tem um baixo valor biolgico. O aminocido que

est presente em menor quantidade do que a necessria, e chamado de aminocido

limitante.

No nosso organismo, as protenas esto constantemente a ser formadas e

utilizadas. Aps comer, as protenas so degradadas em aminocidos pela digesto. Os

aminocidos so absorvidos e, em seguida, utilizados para a formao de outras

protenas do organismo.

ALBUMINA

A albumina uma protena presente no plasma sanguneo, produzida pelo

fgado depois de metabolizar alimentos ricos em protena, como carne, leite ou ovos.

Ela pode ser utilizada como suplemento alimentar a fim de produzir mais msculos.

A albumina serve para regularizar a presso osmtica do sangue; transportar

hormnios e controlar o pH sanguneo. Quando utilizada como forma de suplemento,

serve para ajudar a ganhar massa muscular.

A albumina humana um expansor do volume plasmtico que a parte

protica do sangue que atua mantendo a presso coloidal osmtica no plasma,

(intravenosa).

PROTENAS HEPTICAS

Cerca de 95% das protenas sanguneas so processadas pelo fgado, cuja

produo protica de 75 a 100 gramas por dia. As funes mais importantes desse

metabolismo so a desaminao e interconverso de aminocidos e a formao de uria.

Substncias que tornam possvel a coagulao sangunea, como o fibrinognio, tambm

so sintetizadas no fgado.

Entre as protenas sintetizadas pelo hepatcito, destaca-se a albumina, uma

substncia muito importante para o organismo, porque mantm a gua dentro da

circulao. A principal presso colide-osmtica representada pela presso onctica

das protenas.

A albumina compreende ao redor de 60% das protenas presentes no plasma

humano, sendo sintetizada aproximadamente 15g/dia em velocidade dependente da

ingesto protica, mas regulada por retroalimentao pelo teor de albumina circulante.

Quando a produo de albumina diminui, a gua escapa das veias, extravasa

para os tecidos que esto debaixo da pele e produz inchao, ou seja, edemas nas pernas,

barriga dgua (ascite), e em outras partes do organismo. Alm disso, a albumina tem

outra funo, servindo de meio de transporte, na corrente sangunea, para outras

substncias, como hormnios, pigmentos, drogas e outras substncias.

A falta de albumina no a nica explicao para o inchao caracterstico dos

alcolicos, pois na cirrose, por exemplo, doena comum nos usurios de lcool, os rins

retm gua e sdio o que tambm ajuda a produzir inchao.

GLOBULINAS

As globulinas so protenas presentes no soro sanguneo, usadas para testar e

determinar as chances de se desenvolver uma infeco no organismo. Seu valor normal,

compreendendo todos os seus componentes, varia de 1,5 a 3,5g/dL.

Dos mais de 30 componentes que compreendem essa protena, esto as

globulinas alfa, beta e gama:

A globulina alfa, o tipo de protena encontrada quando h processos

inflamatrios, neoplasias, e tambm quando h danos nos tecidos.

A betaglobulina pode ser encontrada nas decorrncias de sndrome nefrtica,

diabetes, hipotireoidismo, cirrose biliar, hepatite aguda, dentre outras patologias, onde

nestas, h a ocorrncia de elevao dos nveis normais deste componente. Para essa

elevao, d-se o nome de hiperbetaglobulinemia. Contrrio a esse dado, baixos nveis

de betaglobulina so chamados de hipobetaglobulinemia.

As gamaglobulinas constituem a classe de mxima importncia pelo papel que

representam na esfera da imunologia e da hipersensibilidade. a frao que sofre as

maiores oscilaes, podendo compreender at 50% das protenas totais ou se reduzir

consideravelmente.

PROTENAS TOTAIS - PROTENAS DA URINA (SENSIPROT)

As protenas presentes na urina representam alguma anormalidade, em

condies normais no teremos pois a protena uma molcula muito grande e no

filtrada pelo glomrulo, ao menos que se tenha algum dano, em condies normais o

sangue passa pelos rins e filtrado, sendo o produto a urina, varias molculas presentes

na corrente sangunea no devem ser excretadas pelos rins. Proteinria o termo que

indica a presena de protena na urina (indica doena) especialmente a albumina. Esta

uma protena presente no plasma sanguneo, fabricada pelo fgado, resultante do

metabolismo de alimentos proticos, como carnes, ovos, leites e seus derivados... As

principais causas so as glomerulonefrites (inflamao dos glomrulos), mas a

proteinria pode estar presente, normalmente em quantidades menores, na

nefroesclerose (doena renal secundria hipertenso arterial), na nefrite intersticial

(processo inflamatrio do tecido renal, entre os glomrulos, sem les-los), nas infeces

das vias urinrias, entre outras causas menos comuns.

A presena d protenas na urina sinal de insuficincia renal, ou seja, algo no

funcionou como devia para isso acontecer. Temos trs tipos de insuficincia renal: pr

renal, renal e ps- renal.

A pr- renal um edema pulmonar, uma insuficincia cardaca junto com

insuficincia renal. Falncia cardaca que leva a no filtrao renal: Insuficincia

cardaca congnita crnica.

A renal a Nefrite que destri o nefrn que a unidade filtradora dos rins, esse

dano ai permitir a passagem de protenas.

A ps renal o calculo renal, as pedras no rim podem se formar quando a

urina contm certas substncias em excesso. Essas substncias podem criar pequenos

cristais que se transformam em pedras os clculos podem ser encontrados nos rins ou

ureteres ao mesmo tempo. E tambm conhecida como Litase renal.

A maneira mais precisa de se avaliar a presena de protenas na urina por

meio da dosagem de protenas em toda a urina coletada num perodo de 24 horas.

PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL

Albumina

A albumina tem a propriedade de se ligar a uma grande variedade de nions

orgnicos e molculas complexas de corantes.

O sistema de medio se baseia no desvio do pico de absortividade mxima de

um corante complexo, neste caso, foi utilizado verde de bromocresol, quando este se

liga a albumina. A cor formada medida colorimetricamente entre 600 e 640 nm, sendo

proporcional quantidade de albumina na amostra at a concentrao de 6 g/dL.

Para determinao da concentrao de albumina, alem da amostra (soro), foi

utilizado um frasco padro e um frasco branco.

As quantidades colocadas de reagentes e amostras esto descritas no quadro

abaixo.

Quadro 1: quantidade de reagente a ser colocado em cada frasco.

Branco Teste Padro

Reagente de cor 2 mL 2 mL 2 mL

Amostra - 0,02 mL -

Padro - - 0,02 mL

Depois de dois minutos da mistura, foi feito a leitura em espectrofotmetro na

faixa de 630 nm.

Para calculo da concentrao, foi utilizada a seguinte equao:

Albumina (g/dL): absorbncia do teste x 3,8=

absorbncia do padro

[]albumina: 0,569 x 3,8 = 5,69 g/dL

0,380

Protenas Totais

Os ons de Cu+, provenientes do reagente de biureto, em meio alcalino reagem

com as ligaes peptdicas das protenas sricas formando cor prpura, que tem

absorbncia mxima em 550 nm, proporcional concentrao das protenas da amostra.

Concentraes de birrubina e hemoglobina presentes na amostra no provocam

erros significativos. As concentraes de triglicrides maios que 500 mg/L produzem

interferncias positivas que podem ser minimizadas utilizando branco de amostra ou

aplicando fotometria de leitura bicromtica com filtro primrio em 545 nm e em filtro

secundrio em 700 nm.

Para este ensaio foram utilizados trs tubos de ensaio um contendo a amostra

um contendo o padro e o terceiro foi o branco. As quantidades de reagentes esto

descritas no quadro 2.

Quadro 2: reagentes utilizados no ensaio de protenas totais

Branco Teste Padro

Reagente biureto 2 mL 2 mL 2 mL

Amostra - 0,02 mL -

gua deionizada 0,02 mL

Padro - - 0,02 mL

Aps a homogeneizao, as amostras foram incubadas a 37C por dez minutos

em banho-maria.

Para clculo da concentrao de protenas totais, foi utilizado a equao

abaixo.

Protenas totais= Absorbncia amostra x 4 g/dL

Absorbncia do padro

[] protenas totais= 0,795 x 4 g/dL

0,487

[] protenas= 6,53 g/dL

Sensiprot Determinao da protena da urina

O vermelho de pirogalol reage com o molibdato de sdio formando um

complexo que, quando combinado com a protena em meio cido desenvolve um

cromforo de cor azul, com o mximo de absoro em 600 nm.

Neste ensaio foram utilizado os reagentes descritos abaixo.

Quadro 3: reagentes utilizados

Branco Teste Padro

Reagente de cor 2 mL 2 mL 2 mL

Amostra - 0,02 mL -

gua deionizada 0,02 mL

Padro - - 0,02 mL

As amostras, aps homogeneizao, foram incubadas em banho-maria a 37C

por cinco minutos e a leitura foi realizada em 600 nm.

Para calculo da concentrao de protenas na urina foi utilizada a equao

abaixo.

Protena (mg/dL)= Absorbncia do teste x 50

Absorbncia do padro

[]protena (mg/dL)= 0,090 x50 = 10,69 mg/dL

0,421

CONCLUSO

As protenas so as biomolculas mais abundantes nos seres vivos e exercem

funes fundamentais em todos os processos biolgicos. A importncia das protenas,

entretanto, est relacionada com suas funes no organismo, e no com sua quantidade.

Elas exercem funes diversas, podendo ser agrupadas em vrias categorias de

acordo com sua funo. De uma maneira geral desempenham nos seres vivos as

seguintes funes: estrutural, enzimtica, hormonal, de defesa, nutritivo, coagulao

sangunea e transporte. Dentre todas as protenas a mais abundante a Albumina,

relacionada com a regulao osmtica e com a viscosidade do plasma, uma vez que el

responsvel pelo transporte de elementos insolveis em gua, promovendo assim o

equilbrio hdrico.

Em nossos estudos podemos observar os diferentes nveis de absorbncia das

protenas, sendo possvel relacionar tais resultados com casos clnicos, e identificar

resultados determinantes para elaborao de diagnsticos de patologias.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

MARTINS, Mario Jorge. As protenas na prtica mdica. Jan. 2012. Disponvel em:

. Acesso em 04 abril 2014.

MARTINS, Luana. Total de protenas sricas. 07 out. 2012. Disponvel em

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Acesso em 04 abril 2014.

MOTTA, Valter T, Bioqumica Clnica para o Laboratrio Princpios e

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