pratica 6-morfologia de fungos.pdf

7/24/2019 Pratica 6-Morfologia de fungos.pdf

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UNIVERSIDADE FEDERAL DOS VALES DO JEQUITINHONHA E MUCRI

INSTITUTO DE CINCIA E TECNOLOGIA

CURSO DE BACHARELADO EM CINCIA E TECNOLOGIA

Morfologia de Fungos: Estudo Macrocpico e Microscpico

Grupo 02:

Anglica Dehone Parada - 20132020050

Gabriella Amaral Dias -2013202101

Letcia Morais Clarindo - 20131020085

Paloma Caroline de Lima - 20131020081

Disciplina: Microbiologia

Professora:Llian de Arajo Pantoja

Diamantina,

Maio / 2015


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Sumrio

1. Resumo................................................................................................................................. 3

2. Introduo............................................................................................................................ 4

3. Objetivo................................................................................................................................ 5

3.1 Objetivo Geral................................................................................................................. 5

3.2 Objetivos Especficos....................................................................................................... 5

4. Procedimento experimental................................................................................................ 6

4.2 Mtodos............................................................................................................................ 6

5. Resultados e discusses....................................................................................................... 7

6. CONCLUSO................................................................................................................... 12

7. REFERNCIAS................................................................................................................ 13


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1. Resumo

Em 1970, bilogos designaram certos microrganismos com caractersticas distintas de

outros organismos vivos, como seres pertencentes de um novo reino, o Reino Fungi.

Tais microrganismos so seres vivos eucariticos, heteretrficos, podendo serunicelulares ou multicelulares. Obtm seu alimento por absoro e possuem o

glicognio como reserva de substncia. Na prtica, objetivou-se reconhecer

microscopicamente e macroscopicamente os diferentes tipos de fungos e suas

caractersticas. Para que ocorresse as identificaes e caracterizaes das colnias, fez-

se necessrio o cultivo desses microrganismos em cmaras de micro cultivos e em

placas de Petri. Aps passado o perodo de crescimento, pode-se analisar colnia por

colnia, caracteriza-las e identifica-las.


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2. Introduo

Os fungos so seres vivos eucariticos, heterotrficos unicelulares, como por

exemplo, as leveduras, ou multicelulares, sendo um exemplo os fungos filamentosos.

Estes obtm seu alimento por absoro e possuem o glicognio como reserva de

substncia. Possuem a caracterstica de serem seres ubquos, ou seja, so encontrados

em todos os ambientes. De acordo com o local em que so encontrados, eles podem ser

classificados em anemfilos, geoflicos ou telricos, aquticos, zooflicos,

antropoflicos e fitoflicos, que so fungos do ar, do solo, da gua, de animais, do

homem e de vegetais respectivamente.

Tais microrganismos ainda apresentam caractersticas benficas como

decomposio de matria vegetal morta, devido necessidade de grande maioria das

plantas precisarem de associao simbitica deles para obter nutrientes para sua

sobrevivncia, e tambm serem utilizados pelo homem como alimento e para produzir

alimento. Possuem tambm caractersticas malficas como causarem doenas s plantas

e ao homem e provocarem a deteriorao de alimentos e materiais. Por possurem

caractersticas que so distintas dos outros organismos vivos, em 1970, os bilogos

designaram estes seres como pertencentes de um novo reino, o Reino Fungi.

Macroscopicamente, o Reino Fungi pode ser dividido em bolores ou leveduras.

Os bolores apresentam colnias filamentosas e as leveduras, geralmente apresentam

colnias cremosas. Alm do tipo, no estudo macroscpico, tambm leva-se em

considerao por exemplo, o verso e o reverso, a velocidade de crescimento e a

formao de pigmentos da colnia. Existem tambm alguns fungos, especialmente de

espcies patognicas, que apresentam crescimento dimrfico, ou seja, eles podem

crescer tanto na forma de fungo filamentoso, quanto na forma de levedura.

No estudo microscopicamente, os fungos multicelulares so compostos por

filamentos ramificados denominados de hifas, as quais contm o material celular do

fungo. As hifas ainda podem ser classificadas em septadas ou cenocticas e o conjunto

das hifas denominado de miclio. As hifas cenocticas so filamentos contnuos, sem

divises transversais, preenchidos por uma massa citoplasmtica com centenas de

ncleos. As hifas septadas possuem paredes transversais regulares (septos) que

delimitam compartimentos celulares com um ou dois ncleos, dependendo do estgiodo ciclo sexual. Os septos so incompletos, apresentando um orifcio central,


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denominado de poro septal, que pe em comunicao direta os citoplasmas das clulas

vizinhas.

As hifas crescem a partir do esporo por alongamentos da extremidade. Cada

parte de uma hifa possui a capacidade de crescimento e quando um fragmento quebrado, ele pode se alongar e formar uma nova hifa. A poro da hifa responsvel

pela obteno de alimento denominada de hifa vegetativa e o pedao responsvel pela

reproduo denominado de hifa reprodutiva.

O fungo pode se reproduzir sexuada ou assexuadamente. Na reproduo

assexuada, com exceo das leveduras que se reproduzem por brotamento ou

gemulao, o miclio se fragmenta originando novos miclios. Alguns fungos se

reproduzem tambm por esporulao, formando esporos, que so novas clulas

haplides especiais dotadas de paredes resistentes.

Na reproduo sexuada, geralmente, primeiro ocorre a plasmogamia (fuso de

hifas), depois ocorre cariogamia (fuso dos pares de ncleos haplides, produzindo

ncleos zigticos diplides) e em seguida os ncleos zigticos diplides se dividem por

meiose dando origem aos esporos sexuais. Nos ascomicetos e basidiomicetos, existe

uma fase denominada de dicariofase entre o processo de plasmogamia e cariogamia. Na

dicariofase cada clula apresenta dois ncleos de origens diversas, um de cada hifa

parental.

3. Objetivo

3.1Objetivo Geral

Objetivou-se reconhecer microscopicamente e macroscopicamente os diferentestipos de fungos e suas caractersticas.

3.2Objetivos Especficos

Manusear adequadamente um microscpio ptico;

Conhecer os principais mtodos de observao microscpica de microrganismos;

Executar o cultivo em lmina;

Descrever microscopicamente e macroscopicamente as caractersticas de fungos;


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Visualizar o arranjo das estruturas e a morfologia dos fungos;

Executar tcnica de colorao atravs de lactofenol.

4. Procedimento experimental

4.1Materiais

2 lminas;

2 lamnulas;

2 Placas contendo BDA;

gua destilada estril;

Ala de inoculao em formato de L;

Algodo hidrofbico;

Corante lactofenol;

Bico de Bunsen;

Esmalte incolor;

Papel Kraft;

Pina; Pipeta Pasteur;

Placa de Petri;

Suporte de vidro em formato de V;

Tubo de ensaio contendo fungoRizopus;

4.2

Mtodos

A prtica foi realizada no laboratrio da disciplina de Microbiologia, no Instituto

de Cincia e Tecnologia, situado na Universidade Federal do Vales do Jequitinhonha e

Mucuri.

Colocou-se dentro da placa de Petri o suporte de vidro em forma de V. Em

seguida, sobre o suporte, colocou-se uma lmina e sobre a lmina colocou-se 2

lamnulas , uma em cada extremidade da lmina, colocou-se um tufo de algodo na

borda da placa, entre o suporte de vidro. Fechou-se a placa de Petri e embalou-a em


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papel Kraft. Logo aps, a levou na autoclave a temperatura de 120C, presso de 1 atm

por 15 minutos e depois, colocou-a na estufa de secagem temperatura de 70 C.

Dentro da zona de segurana do bico de Bunsen, desembalou-se a cmara de

microcultivo j esterilizada. Em seguida, na mesma inseriu-se sobre a lmina da cmara,um pequeno quadrado de BDA, recortado com o auxlio de uma lmina de bisturi.

Posteriormente, fez-se a inoculao do microrganismo nos extremos do pequeno

pedao de BDA contido dentro da cmara e colocou-se uma lamnula sobre o mesmo.

Depois com o auxlio da pipeta Pasteur, umedeceu-se o tufo de algodo e fechou-se a

placa. A seguir, preparou-se um inoculo em outra placa de Petri com o fungo Rhyzopus

e consequentemente levou a cmara e esta placa para a estufa a temperatura de 30C por

6 dias.

Ao passar de seis dias, preparou-se uma lmina a partir da cultura desenvolvida,

colocando uma pequena gota do corante lactofenol em uma lmina, depois com o

auxlio de uma pina, retirou-se a lamnula que estava sobre o pedao de BDA e

colocou-a sobre o corante. Para vedar a lmina usou-se esmalte incolor. Aps o preparo

da lmina, levou-a ao microscpio para visualizao das estruturas do fungo Rhyzopus.

Tambm observou-se uma lmina j preparada, que continha leveduras.

Visualizou-se cinco fungos de gneros diferentes com auxlio de microscpios

pticos e fez-se o desenho de cada um deles. Depois observou-se macroscopicamente

quatro colnias de fungos preenchendo-se a ficha de cada um deles com informaes

sobre a forma, o tamanho, a superfcie, o tipo da borda, o perfil, a elevao, a margem, a

textura, o relevo e a pigmentao.

5. Resultados e discusses

A tcnica de micro cultivo em lmina apresenta uma alta eficincia na anlise e

estudo morfolgico dos fungos, uma vez que a cultura cresce na lmina e lamnula,

possibilitando a visualizao das estruturas que podem permanecem intactas ao retirar-

se a lamnula cuidadosamente.


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Aps o preparo da cmara de micro cultivo e decorrido o tempo de incubao

desta, o crescimento fngico mostrou-se visualmente suficiente. Em seguida, com o

auxlio da pina, retiramos a lamnula com cuidado, afim de no danificar as estruturas.

Devido ao alto crescimento do fungo na lmina, esta foi descartada por no possibilitar

condies de visualizao microscopicamente.

Desta anlise foi possvel a identificao das estruturas do Aspergillus niger tais

como vescula, conidiforo e conidisporos que se encontram na figura abaixo.

Figura 1- Visualizao microscpica doAspergillus niger.

Estruturas de fungos observadas microscopicamente:


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Caractersticas observadas nas quatro colnias:


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Interpretao

Culturas

1 2 3 4

Textura ou

consistncia Granulosa Arenoso Camura Aveludada

Pigmentao da

superfcie e do verso Alterada Inalterada Alterada Inalterada

Superfcie Rugosa Fissurada Rugosa Fissurada

Borda Regular Regular Irregular Irregular

Topografia Pregueada Umbilicada Pregueada Convexo

Cor da colnia Preta Marrom Verde Cinza

Aspecto Opaco Opaco Opaco Opaco

Pigmento Presena Presena Presena Presena

S: Preto V: Amarelo Marrom claro S: Verde V: Amarelo Cinsa

Restrito a colnia Difuso Restrito a colnia Difuso

Tempo de crescimento Alto Alto Baixo Mdio

Dimetro da colnia 5,5 cm 9 3,5 cm 7,5

Tabela 1: Descrio macroscpica das colnias observadas em laboratrio.

Segue abaixo, imagens das colnias citadas na tabela 1:

Colnia 1: Colnia no identificada

Figura 8- Frente da placa Figura 9- Verso da placa


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Colnia 2:Placa do ar da prtica de ubiquidade.


Colnia 3:Penicyllium



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Colnia 4: Placa de , da prtica de ubiquidade


6. CONCLUSO

Aps realizada a prtica, pode-se concluir que macroscopicamente, mesmo com

certa dificuldade, podemos caracterizar cada colnia de fungo presente em Placa de

Petri. Alm disso, a execuo da mesma proporcionou uma observao microscpica

onde visualizou-se diferentes caractersticas presentes na estrutura de fungos

filamentosos.

Contudo, aps caracterizadas todas as colnias, micro e macroscopicamente,

pde-se perceber as caractersticas particulares de cada espcie, que possibilita

diferencia-las de outras.


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7. REFERNCIAS

Apostila de Fungos. Disponvel em:

. Acesso em: 09 de

junho de 2015.

ICB. Estudo macro e microscpico de fungos filamentosos e leveduriformes.

Disponvel em: < http://icb.ufmg.info/mic/diaadia/wp-content/uploads/2012/10/Estudo-

macrosc%C3%B3pico-e-microsc%C3%B3pico-de-fungos-e-leveduras.pdf>. Acesso

em: 09 de junho de 2015.

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