manejo del microscopio.docx

5/25/2018 MANEJO DEL MICROSCOPIO.docx

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MANEJO DEL MICROSCOPIO

MANEJO DEL MICROSCOPIO

OBJETIVOS:

1. Conocer y manejar adecuadamente las partes del microscopio

2. Aprender a enfocar correctamente en el microscopio

3. Conocer los cuidados del microscopio

4. Aprender a preparar una muestra adecuadamente para la observacin al

microscopio

INTRODUCCION

El estudio de los organismos vivos requiere de aparatos de precisin como lo es el

microscopio, en el laboratorio de biologa empleamos dos tipos:

MICROSCOPIO COMPUESTO. El cual utiliza un juego de 2 lentes (ocular y objetivos)

para ampliar la imagen, la cual se observa invertida. Las muestras apropiadas para

su observacin sern aquellas que dejen pasar luz a travs de ellas, debern de ser

monoculares.

MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO O LUPA BINOCULAR. La visin se obtiene por

reflexin de la luz que incide sobre la muestra, posee un inversor que permite

observar la imagen derecha. Su observacin es generalmente de conjunto, debido a

su gran campo; por ejemplo: se puede observar una mosca completa, mientras que

en microscopio compuesto, slo sera posible

ver las alas y stas por ser muy transparentes. La visin estereoscpica o sensacin

de relieve se obtiene cuando cada ojo recibe una imagen por separado captada por
http://bp3.blogger.com/_EdiSPJX1jg8/Rtl49zs16LI/AAAAAAAAAAs/3O6fBaCKea8/s1600-h/microscopio[1].jpg


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cada sistema ptico prcticamente cada ocular constituye un microscopio

compuesto independiente.

Aunque las variaciones del microscopio son muy diversas, podemos considerar que

bsicamente estn constituidos por 3 sistemas:

a) Sistema mecnico;

b) Sistema de iluminacin;

c) Sistema ptico.

a) SISTEMA MECANICO

Base o pie. Soporta las dems estructuras del microscopio y contiene a la fuerza de

luz.

Brazo. Une a la base con el tubo ocular, contiene a los tornillos macromtricos y

micromtricos, sirve de apoyo para trasladar el microscopio.

Tornillo macromtrico. Proporciona avances rpidos en la platina, en el orden de

centmetros.

Tornillo micromtrico. Proporciona avances en la platina en orden de milmetros.

Platina. Sirve para colocar las muestras a observar y contiene al condensador y al

diafragma

Carro de platina. Controla los desplazamientos del portaobjetos.

Revlver. Contiene a las lentes oculares. (10X, 40X, 100X)

b) SISTEMA DE ILUMINACION

CONDENSADOR. Est situado por debajo de la platina de modo que puede subir o

bajar, su funcin es concentrar y enfocar los rayos provenientes de la fuente

luminosa situada en la base del microscopio a fin de iluminar el campo visual.Diafragma o iris. Se localiza en la parte inferior del condensador, una abertura

regulable por medio de una placa lateral que va a controlar la cantidad de luz que

saldr hacia el condensador.

Fuente luminosa. Se localiza en el pie o base del microscopio, es generalmente una

lmpara integrada a la base.

c)SISTEMA OPTICO

Lente objetivo. Aumenta la imagen de la muestra a observar; se presenta en

diversos aumentos: Lupa (X), Seco dbil (10 X), Seco fuerte (40 X), e Inversin

(100 X).NOTA: La palabra SECO para las lentes de 10 X y 40 X, se emplea porque para su

utilizacin no se requiere colocar ninguna sustancia entre el lente y la preparacin.

La palabra INMERSION se emplea porque se debe sumergir la lente 100 X en aceite

de inmersin, para poder observar con nitidez la muestra.

Lente ocular. Amplia la imagen producida por el lente objetivo, est localizada en la

parte superior del tubo del microscopio.

NOTA: El smbolo X (por) que aparece despus del nmero de cada lente, significa

que se deber multiplicar el aumento de la lente objetivo por el aumento de la lente

ocular, para as obtener el aumento total alcanzado por el juego de lentes.

REGLAS GENERALES PARA EL CUIDADO DEL MICROSCOPIO


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1. Traslado. Se toma con la mano derecha el brazo del microscopio y con la mano

izquierda la base.

2. El cordn se deber enrollar sobre si mismo , no alrededor del cuerpo del

microscopio.

3. El microscopio se encender hasta que comience la observacin.

4. Ya encendido, no se apagar constantemente, sino hasta finalizar la observacin

de todas las muestras que se indiquen en la prctica, mientras no se observe, se

disminuir la intensidad luminosa.

5. Mientras permanezca encendido se evitar realizar cualquier movimiento brusco.

6. Se evitar manejarlo con las manos hmedas o mojadas.

7. Cuando no se est observando, deber eliminarse la lente ocular con el objeto de

menor aumento.

8. El sistema ptico y de iluminacin nunca deber ser tocado con los dedos.

9. No se debern colocar los portaobjetos mojados sobre la platina.

10. Despus de usar el lente de inmersin se deber limpiar con un pao suave o

con un papel higinico.

11. En las preparaciones en fresco siempre deber cubrirse con cubreobjetos.

OBTENCION DE UN BUEN ENFOQUE:

MICROSCOPIO COMPUESTO:

l. Colocar el portaobjetos sobre la platina del microscopio.

2. Utilizar el objetivo de menor aumento.

3. Deslizar el tubo del microscopio por medio del tornillo macromtrico, observandolateralmente hasta que el objetivo quede cerca del portaobjetos.

4. Observar a travs de los oculares subiendo lentamente el tubo del microscopio

hasta observar la preparacin enfocada, no debe bajarse el tubo del microscopio

mientras se est observando, porque puede llegar a chocar el objetivo con el

portaobjetos y ocasionar desperfectos.

5. Afinar la imagen moviendo lentamente el tornillo micromtrico.

6. Si se desea mayor aumento, girar el revolver al objeto adecuado.7. Si se utiliza

el objeto de inmersin (100 X) colocar sobre la preparacin una gota de aceite de

inmersin y baja el tubo del microscopio hasta que la lente del objetivo toque a la

gota, observa y ajusta cuidadosamente despus de su uso limpiar el objetivo conun tejido suave (papel seda).http://benitobios.blogspot.com/2007/08/manejo-del-microscopio.html
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3.9 Observar por el ocular y verificar que la imagen permanece enfocada y soloes necesario mover eltornillo micromtrico en la mayora de los casos aumentar la intensidad de laluz NOTA: El microscopio tienela propiedad de ser parfocar por lo que al enfocar uno de los objetivos,los dems quedan en foco3.10 Iluminar el microscopio varias veces y enfocar tantas preparacionescomo sea posible3.11 Observar primero las letras, despus del colorante seco y luego las preparacionesde microorganismosproporcionadas por elprofesor 3 . 1 2 D e s p u s d e r e t i r a r l a p r e p a r a c i n , l i m p i a r e l a c e i t e q u e

q u e d a e n e l o b j e t i v o c o n u n p a u e l o d esec ha bl e, sep ar ando su s d os ho ja s yusando las partes interiores que no sueltan pelusa, no utilizar algodn por que dejafragmentos que ensucian las lentes3.13 Dejar el microscopio con el objetivo de menor aumentoalineado con el tubo y lo mas cercano posible ala platinaGUIA DE OBSERVACION

Procedimiento:Identificar las partes del microscopio compuestoEnfocar, iluminar y observar las preparaciones proporcionadas; hacer esquemas.

A partir de la muestra del agua del lago realizar preparaciones en fresco y observar a 10x a 40xTratar de localizar protozoarios y algas microscpicas y esquematizar.A partir de la muestra de pulque, realizar una preparacin en fresco y observar a 40x y 100x a inmersin.Diluir una gota de yakult en 9 gotas de agua y realizar la preparacin en fresco. Observar lactobacilos.RESULTADOS:1) Partes delMicroscopio:1 . o c u l a r 2 . r e v l v e r 3 . o b j e t i v o 4 . m e c a n is m o de enfoque5 . t o r n i l l o d e enfoquefino6 . p l a t i n a 7 . e s p e j o 8 . c o n d e n s a d o r10


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ANLISIS DE RESULTADOS:

Primero en el laboratorio se identificaron cada una de las partes que componan al microscopioutilizadoen laboratorio, para su uso correcto.

Una vez identificadas las partes, se prosigui a colocar muestras previamente

preparadas para suobservacin en el microscopio; para esto se tuvo que enfocar primero lasimgenes en el microscopio,ini cian do por el meno r aum ento (en este cas o l os aum ento s


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eran de 5x, 10x, 40x y 100x) y hacia elobjetivo con mayor aumento. Se observaron las muestras yse dibujaron.

Se observ en el agua del lago algunos protozoarios que se movan constantemente (5x), en el 10x,seobservaron protozoarios y una euglena que se mova constantemente sobre s misma.En el 40x, seobserv un paramesium, los protozoarios y algunas algas ms cerca, se

o bs er va ba s u p ar ed c el ul a r mu y d e f i n i d a y a l g u n o s f l a g e l o s . E n e l 1 0 0 x , s eobservaron mejor las algas marinas, y como losprotozoarios se movan en s mismoscircularmente, se observaba su pared celular y en el paramesiumse logr ob serv ar me jo r su pa re dcelular, los flagelos y como se haba comido algunos protozoarios yotras bacterias; estaespecie a comparacin de las dems observadas, fue la de tamao ms grande.

En el pulque se lograron observar cocos (solos), diplococos, cocos en cadena, protozoarios y bacilosdeleumococo.

Por ltimo en el yakult se observaron los lactobacilos, aunque nos costo mucho trabajo encontrarlosyaque an con el aumento de 100x , fueron demasiado pequeas las especies.CUESTIONARIO:

1)Qu es el movimiento browniano?El mov imi ento que llev a a cabo una part cul a muy pequ ea que est inmersa en un fluido, sellama movimiento browniano. Este movimiento se caracteriza por ser continuo y muy irregular. Latrayectoria que sigue la partcula es en zigzag.2)Cmo funciona el microscopio de campo oscuro?

La microscopia del campo oscuro se consiguesitua nd o u na pan ta ll a c ir cul ar opa ca en la ent rad adel condensador de ABBE, de manera que seosc ur ez ca la pa rt e cen tr a l , o b i en ,e mp l e a n d o t i p o s e s p e c i a l e s d e c o n d e n s a d o r e s ( p a r a b o i d e o cardioide), la

preparacin se ilumina con un haz de luz suficientemente fino, bajo un ngulo agudo, def o r m a q u en o i n c i d a e n l a l e n t e f r o n t a l d e l o b j e t i v o . e j . S e m u e s t r a c o m o e l h a z d e l u ziluminaoblicuamente al espcimen y alcance el objetivo, el campo aparecerun if or me ment e os cu ro y ca da partcula se vera como un punto luminoso por efecto de difusin dela luz que incide sobre ella

E n q u c o n s i s t e e l m i c r o s c o p i o d e c o n t r a s t e d e f a s e s ?m i c r o sc o p i o pt i c o qu e , po r la s modificaciones de la fase de luz, debidas a ladiferencia del ndice de refraccin, permite distinguir lasestructuras de objetos incoloros o pococontrastados4)Principales aportaciones a la ciencia gracias al microscopio:Algunos descubrimientos en la historia de la microscopa ptica1 6 1 1 K e p l e r s u g i r i l a m a n e r a d e c o n s t r u i r u n m i c r o s c o p i o c o m p u e s t o 1 6 5 5 H o o k e u t i l i z u n

m i c r o s c o p i o c o m p u e s t o p a r a d e s c r i b i r u n a s p e q u e a s c e l d i l l a s e n los cortesde corcho a las que denomin "clulas".1 6 7 4 L ee u we n h o e k i n f o r m s o b re s ude sc ub ri mi en to de pr ot oz oo s. Nu ev e a os m s ta rd e observ por primera vezbacterias.1 8 3 3 B r o w n p u b l i c s u s o b s e r v a c i o n e s m i c r o s c p i c a s d e l a sor qu d ea s, y de sc ri bi claramente el ncleo celular.18 38 Sc hl ei de n y Sc hw an np r o p u s i e r o n l a t e o r a c e l u l a r , a f i r m a n d o q u e l a c l u l a n u c l e a d a es la unidadestructural y funcional de las plantas y los animales.1 8 5 7 K o l l i k e r d e s c r i b i l a sm i t o c o n d r i a s d e l a s c l u l a s m u s c u l a r e s . 1 8 7 6 A b b a n a l i z l o s e f e c t o s d ela di fr ac c i n en la fo rm ac i n de la im ag en en el microscopio y mostr la manerade optimizar el diseo de los microscopios.1 8 7 9 Fl e m m i n g d e s c r i b i c o n g r a ncl a r id ad e l com por tam ie n to d e l os cro mos oma s d u r ant e la mitosis de lasclulas animales18 81 Re tz iu s de sc ri bi muc ho s te j i do s an im al es c on u nap r e c i s i n q u e a n n o h a s i d o superada por ningn especialista en microscopa ptica.

En las dos dcadassiguientes, tanto l como Cajal y otros histlogos, disearon mtodos detincin y establecieron las bases de la anatoma microscpica.1 8 8 2 K o c h u t i l i z c o l o r a n t e s d e a n i l i n a p a r a t e i r m i c r o o r g a n i s m o s e i d e n t i f i c l a s


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b a c t e r i a s que causan la tuberculosis y el clera. En las dos dcadas siguientes,otrosbacterilogos, como Klebs y Pasteur, identificaron los agentes causantes de otrasmuchasenfermedades examinando al microscopio preparaciones teidas.1 8 8 6 Z e i s s h i z ou n a s e r i e d e l e n t e s , s i g u i e n d o l a s l e y e s d e A b b , q u e p e r m i t i e r o n al o s especialistas en microscopa la resolucin de estructuras situadas en los lmitestericos de laluz visible.1 89 8Go l g i ob s e rv por pr i me r a v e z e l a par ato l l a mad o " d e

Go lg i" , im pr eg na nd o c lu la scon nitrato de plata.19 24 Lac as sa gn e y su sc o l a b o r a d o r e s d e s a r r o l l a r o n l a p r i m e r a t c n i c a a u t o r r a d i o g r f i c a paralocalizar el polonio radiactivo en las muestras biolgicas.1 9 3 0 L e b e d e f f d i s e yc o n s t r u y e l p r i m e r m i c r o s c o p i o d e c o n t r a s t e i n t e r f e r e n c i a l . E n 1 9 3 2 ,Zernicke invent el microscopio de contraste de fases. Estos dos adelantos permitieron observarpor primera vez clulas clulas vivas no teidas en detalle.19 4 1 C o o n s u t i l i z a n t i c u e r p o s a c o p l a d o s a c o l o r a n t e s f l u o r e s c e n t e s p a r a d e t e c t a r antgenosce l u l are s .1 952Nomars k i id e y pate nt e l s i s te ma d e contras tein te rf er en ci al pa ra el mi cr os co pi o ptico., que an lleva su nombre.19 81 Al le n eI n o u p e r f e c c i o n a r o n l a m i c r o s c o p a p t i c a d e c o n t r a s t e v i d e o -a m p l i f i c a d a . N.T. Generalmente se considera que el primer microscopio compuesto fueconstruido por losholandeses H. Jansen y Z. Jansen en 1590.CONCLUSIONES:

Por medio de esta prctica se identif icaron cada una de las partes delmicroscopio, para despus lograr unabuena i luminacin y enfoque delm i s m o a l r e a l i z a r a l g u n a s p r u e b a s p a r a e s t e f i n c o n a l g u n a sm u e s t r as preparadas y otras preparadas por nosotros mismos para observar algunosmicroorganismos y lograr enfocarloscorrectamente, para su posterior estudio.E s t a e s u n ap r c t i c a i n d i s p e n s a b l e y m u y i m p o r t a n t e y a q u eu n o d e l o s e l e m e n t o s i n d i s p e n s a b l e s e n m i c r o b i o l o g a e s e l m i c r o s c o p i o ,d e b i d o a q u e e n e s t a m a t e r i a s u p r i n c i p a l o b j e t i v o d e e s t u d i o s o n l o s12


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organismos microscpicos, para los que se requiere este aparato y si no se sabeut il izar correc tamente, ser muy difcil lograr una buena prctica en laboratorio.REFERENCIAS:

http://personales.mundivia.es/mggalvez/micro2.htm


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Tabla

Alberts, Bruce,Biologa Molecular de la Clula(2da. Edicin, Ediciones Omega, Barcelona, 1994)

Atlas, R.M. (1990) Microbiologa, fundamentos y aplicaciones. CECSA: Mxico*Manual demicrobiologa general:Departamento de Microscopia de Carl Zeiss (1980) La microscopia desde el principio. MxicoMadigan, M. T.; Martinko, J.M. Y Parker, J. (1997) Block. Biologa de los microorganismos. 8ed. PrenticeHall. Iberia, Espaa


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OBJETIVOS:

1. Conocer y manejar adecuadamente las partes del microscopio

2. Aprender a enfocar correctamente en el microscopio

3. Conocer los cuidados del microscopio

4. Aprender a preparar una muestra adecuadamente para la observacin al

microscopio

INTRODUCCION

El estudio de los organismos vivos requiere de aparatos de precisin como lo es el

microscopio, en el laboratorio de biologa empleamos dos tipos:

MICROSCOPIO COMPUESTO. El cual utiliza un juego de 2 lentes (ocular y objetivos)

para ampliar la imagen, la cual se observa invertida. Las muestras apropiadas para

su observacin sern aquellas que dejen pasar luz a travs de ellas, debern de ser

monoculares.

MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO O LUPA BINOCULAR. La visin se obtiene por

reflexin de la luz que incide sobre la muestra, posee un inversor que permite

observar la imagen derecha. Su observacin es generalmente de conjunto, debido a

su gran campo; por ejemplo: se puede observar una mosca completa, mientras que

en microscopio compuesto, slo sera posible ver las alas y stas por ser muy

transparentes. La visin estereoscpica o sensacin de relieve se obtiene cuando

cada ojo recibe una imagen por separado captada por cada sistema ptico

prcticamente cada ocular constituye un microscopio compuesto independiente.

Aunque las variaciones del microscopio son muy diversas, podemos considerar que

bsicamente estn constituidos por 3 sistemas:

a) Sistema mecnico;

b) Sistema de iluminacin;c) Sistema ptico.

a) SISTEMA MECANICO

Base o pie. Soporta las dems estructuras del microscopio y contiene a la fuerza de

luz.

Brazo. Une a la base con el tubo ocular, contiene a los tornillos macromtricos y

micromtricos, sirve de apoyo para trasladar el microscopio.

Tornillo macromtrico. Proporciona avances rpidos en la platina, en el orden de

centmetros.

Tornillo micromtrico. Proporciona avances en la platina en orden de milmetros.Platina. Sirve para colocar las muestras a observar y contiene al condensador y al

diafragma

Carro de platina. Controla los desplazamientos del portaobjetos.

Revolver. Contiene a las lentes oculares. (10X, 40X, 100X)

b) SISTEMA DE ILUMINACION

CONDENSADOR. Est situado por debajo de la platina de modo que puede subir o

bajar, su funcin es concentrar y enfocar los rayos provenientes de la fuente

luminosa situada en la base del microscopio a fin de iluminar el campo visual.

Diafragma o iris. Se localiza en la parte inferior del condensador, una aberturaregulable por medio de una placa lateral que va a controlar la cantidad de luz que


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saldr hacia el condensador.

Fuente luminosa. Se localiza en el pie o base del microscopio, es generalmente una

lmpara integrada a la base.

c) SISTEMA OPTICO

Lente objetivo. Aumenta la imagen de la muestra a observar; se presenta en

diversos aumentos: Lupa (X), Seco dbil (10 X), Seco fuerte (40 X), e Inversin

(100 X).

NOTA: La palabra SECO para las lentes de 10 X y 40 X, se emplea porque para su

utilizacin no se requiere colocar ninguna sustancia entre el lente y la preparacin.

La palabra INMERSION se emplea porque se debe sumergir la lente 100 X en aceite

de inmersin, para poder observar con nitidez la muestra.

Lente ocular. Amplia la imagen producida por el lente objetivo, est localizada en la

parte superior del tubo del microscopio.

NOTA: El smbolo X (por) que aparece despus del nmero de cada lente, significa

que se deber multiplicar el aumento de la lente objetivo por el aumento de la lente

ocular, para as obtener el aumento total alcanzado por el juego de lentes.

REGLAS GENERALES PARA EL CUIDADO DEL MICROSCOPIO

1. Traslado. Se toma con la mano derecha el brazo del microscopio y con la mano

izquierda la base.

2. El cordn se deber enrollar sobre si mismo , no alrededor del cuerpo del

microscopio.

3. El microscopio se encender hasta que comience la observacin.

4. Ya encendido, no se apagar constantemente, sino hasta finalizar la observacin

de todas las muestras que se indiquen en la prctica, mientras no se observe, se

disminuir la intensidad luminosa.5. Mientras permanezca encendido se evitar realizar cualquier movimiento brusco.

6. Se evitar manejarlo con las manos hmedas o mojadas.

7. Cuando no se est observando, deber eliminarse la lente ocular con el objeto de

menor aumento.

8. El sistema ptico y de iluminacin nunca deber ser tocado con los dedos.

9. No se debern colocar los portaobjetos mojados sobre la platina.

10. Despus de usar el lente de inmersin se deber limpiar con un pao suave o

con un papel higinico.

11. En las preparaciones en fresco siempre deber cubrirse con cubreobjetos.

OBTENCION DE UN BUEN ENFOQUE:

MICROSCOPIO COMPUESTO:

l. Colocar el portaobjetos sobre la platina del microscopio.

2. Utilizar el objetivo de menor aumento.

3. Deslizar el tubo del microscopio por medio del tornillo macromtrico, observando

lateralmente hasta que el objetivo quede cerca del portaobjetos.

4. Observar a travs de los oculares subiendo lentamente el tubo del microscopio

hasta observar la preparacin enfocada, no debe bajarse el tubo del microscopiomientras se est observando, porque puede llegar a chocar el objetivo con el


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portaobjetos y ocasionar desperfectos.

5. Afinar la imagen moviendo lentamente el tornillo micromtrico.

6. Si se desea mayor aumento, girar el revolver al objeto adecuado.

MICROSCOPIO ESTEREOSCOPICO:

1. Sobre la platina del microscopio estereoscpico se coloca el vidrio de reloj con la

muestra a observar.

2. Se observa con los lentes oculares y se baja lentamente el tubo del microscopio

hasta ver la imagen clara.

MATERIAL:

Alumno:

un trozo de corcho (de botella de vino)

una navaja de rasurar nueva

una pequea letra recortada "e"

un insecto

una flor (gladiola)

un lpiz graso (marcador)

Escuela:

2 portaobjetos

2 cubreobjetos

un microscopio compuesto

un microscopio estereoscpico

un vidrio de reloj

DESARROLLO:

Todas las observaciones que se lleven a efecto sern con los objetivos seco dbil y

seco fuerte, y se deber realizar los dibujos correspondientes calculando el

aumento logrado en cada observacin.

1. Observar una lnea de lpiz graso trazado sobre un portaobjetos.

2. Realiza un corte fino de corcho (lo suficientemente delgado para que deje pasar

la luz), colcalo en un portaobjetos, ponle el cubreobjetos y observa.

3. Observa la imagen invertida de una letra recortada.

4. Con la navaja realiza un corte fino del tallo de la gladiola, coloca en el portaobjetos cubre con el cubreobjetos y observa.

5. Coloca en un vidrio de reloj un insecto, y sobre la platina del microscopio

estereoscpico para hacer la observacin.

CUESTIONARIO:

1. Qu lentes componen los dos sistemas de lentes del microscopio compuesto?

2. Qu funcin desempea el condensador y el diafragma?

3. Qu nombre reciben y que aumentos tienen los objetivos del microscopio?

4. Qu diferencia hay entre una preparacin en fresco y una en frote?5. Mencionar las diferencias entre los microscopios estereoscpico y el compuest


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