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ICB –USP Disciplina: Bioinformática Aplicada ao Estudo de Doenças Parasitárias Jaques Franco Plataforma SOLiD

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Page 1: ICB –USP Disciplina: Bioinformática Aplicada ao Estudo de Doenças Parasitárias Jaques Franco Plataforma SOLiD

ICB –USPDisciplina: Bioinformática Aplicada ao Estudo de Doenças

ParasitáriasJaques Franco

Plataforma SOLiD

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Carvalho et al ,2010

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Andreonte ,2011.

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Base -code Color-code

ATGTCGTGCTGCCGAGCGGAGGTGAATGAGCCAGTAACTCCCAGCTCCGCTTCATCATTGGAGTCTGACG

T012301123321023021123021001232332

ABI-SOLiDIllumina-SolexaRoche-454

c c

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SOLiD 4 SOLiD 5500

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Reação é catalisada por uma DNA ligase

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Nesse método os fragmentos de DNA são gerados e ligados aos adaptadores P1 e P2 que se ligam especificamente a uma microesfera

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Ciclo de hibridização a cada

35pb

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Código 0 1 2 3

Fluorocromos

FAM Cy3 TXR Cy5

AA AC AG AT

CC CA GA TA

GG GT CT CG

TT TG TC GC

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Saída do SequenciadorOs arquivos que representam as sequências obtidas estão no formato “csfasta”.

Valor da qualidade associada a cada transição de base das sequências lidas estão no formato “qual”.

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Pipeline De novo

É um conjunto de softwares utilizados para montagens de genomas onde não se conhece a referência, ele faz a montagem dos “reads” e gera sequências maiores como contigs e scaffolds.

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Limitações

1.Leituras curtas de 35 pares de bases

2. Regiões repetitivas

3. Construção de bibliotecas

4. Custo das máquinas

5. Erros de montagem

6. Processamento, análise e interpretação de

dados

8. DNA barcode