enzimas de diagnÓstico fundação faculdade federal de ciências médicas de porto alegre...

ENZIMAS DE DIAGNÓSTICOENZIMAS DE DIAGNÓSTICO

Fundação Faculdade Federal de Ciências Médicas de Porto AlegreDepartamento de Ciências Fisiológicas

Disciplina de Bioquímica

Fernando Pivatto JúniorFernando Pivatto JúniorMonitor de Bioquímica Monitor de Bioquímica

2005/22005/2

ENZIMAS

Proteínas catalisadorasProteínas catalisadoras que que aumentam a velocidade das reaçõesaumentam a velocidade das reações sem serem, sem serem,

elas próprias, alteradas nesse processo. elas próprias, alteradas nesse processo.

ISOENZIMASISOENZIMAS

Enzimas com uma Enzimas com uma estrutura primáriaestrutura primária (seqüência de AA) (seqüência de AA) diferentediferente, ,

catalisando a mesma reaçãocatalisando a mesma reação, ,

codificadas por genes diferentescodificadas por genes diferentes..

ISOENZIMASISOENZIMAS

Isoenzimas diferentesIsoenzimas diferentes podem originar-se de podem originar-se de tecidos diferentestecidos diferentes, e sua , e sua

determinação específicadeterminação específica pode fornecer pistas a respeito do pode fornecer pistas a respeito do sítio da patologiasítio da patologia..

São de dois tipos:São de dois tipos:

• um tipo está presente emum tipo está presente em concentração mais elevada concentração mais elevada, é , é específica do específica do

plasmaplasma e e tem um papel funcionaltem um papel funcional no plasma no plasma

ENZIMAS PLASMÁTICASENZIMAS PLASMÁTICAS

Ex.:Ex.: enzimas associadas à cascata de coagulação do sangue (trombina), enzimas associadas à cascata de coagulação do sangue (trombina), à dissolução da fibrina (plasmina) e ao processamento de quilomícrons à dissolução da fibrina (plasmina) e ao processamento de quilomícrons

(lipoproteína lipase).(lipoproteína lipase).


• o segundo tipo está normalmente presente em concentração muito baixa

e não tem nenhum papel funcional no plasma. Elas aparecem no sangue

incidentalmente, e sua dosagem tem valor diagnóstico.

A A lesão dos tecidoslesão dos tecidos de origem ou a de origem ou a proliferação aumentadaproliferação aumentada das células das células de onde surgem essas enzimas levarão a um aumento da atividade de onde surgem essas enzimas levarão a um aumento da atividade

dessas enzimas no plasma.dessas enzimas no plasma.


Para que o diagnóstico do envolvimento de um órgão específico seja feito, é necessário:


• conhecer a proporção entre as várias enzimas, que varia de tecido para tecido, • combinado com o estudo da cinética de aparecimento e desaparecimento no plasma. Enzimas não plasma-específicas são depuradas do plasma a velocidades variáveis, que dependem da estabilidade da enzima e de sua captação pelo sistema retículo-endotelial.

As principais enzimas que são usadas no diagnóstico de doenças são:As principais enzimas que são usadas no diagnóstico de doenças são:

Fosfatase ÁcidaFosfatase ÁcidaFosfatase AlcalinaFosfatase Alcalina

TGOTGOTGPTGP

GGTGGTAmilaseAmilaseLipaseLipase

CKCKLDHLDH


Na verdade, Na verdade, existem mais de 20 enzimasexistem mais de 20 enzimas que são tipicamente usadas em que são tipicamente usadas em laboratórios clínicos para o diagnóstico de doenças.laboratórios clínicos para o diagnóstico de doenças.

Uma vez que essas enzimas são relativamente Uma vez que essas enzimas são relativamente fáceis de medirfáceis de medir, inclusive , inclusive por meio da utilização de técnicas automatizadas, elas fazem parte dos por meio da utilização de técnicas automatizadas, elas fazem parte dos

exames de sangue de rotinaexames de sangue de rotina que o médico pode vir a requisitar. que o médico pode vir a requisitar.


Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

Fosfatase Ácida

• Maiores concentrações: Maiores concentrações: próstatapróstata, no fígado, na , no fígado, na medula óssea, nos eritrócitos e plaquetas.medula óssea, nos eritrócitos e plaquetas.

• ↑ ↑ fração não-prostática: fração não-prostática: crianças em fase de crianças em fase de crescimento e patologicamente aumentada em crescimento e patologicamente aumentada em condições em que existe um hipermetabolismo ósseo. condições em que existe um hipermetabolismo ósseo.

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

Fosfatase Ácida

• Utilidade Diagnóstica: Utilidade Diagnóstica: diagnóstico e diagnóstico e monitoramento da resposta ao tratamento e no monitoramento da resposta ao tratamento e no aparecimento de metástases no aparecimento de metástases no câncer de próstatacâncer de próstata. .

Fosfatase Alcalina

• Maiores Concentrações: Maiores Concentrações: presente em praticamente presente em praticamente todos os tecidos do organismo, especialmente nas todos os tecidos do organismo, especialmente nas membranas das células dos túbulos renais, membranas das células dos túbulos renais, ossosossos (superfície dos osteoblastos), placenta, trato intestinal e (superfície dos osteoblastos), placenta, trato intestinal e fígadofígado. .

• Função: Função: transporte de lipídios no intestino e nos transporte de lipídios no intestino e nos processos de calcificação óssea. processos de calcificação óssea.

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

Fosfatase AlcalinaFosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Utilidade Diagnóstica: Utilidade Diagnóstica: doenças ósseas que cursam doenças ósseas que cursam com aumento da atividade osteoblástica e na com aumento da atividade osteoblástica e na investigação de doenças hepatobiliares. investigação de doenças hepatobiliares.

A A resposta hepáticaresposta hepática a a qualquer tipo de agressão da qualquer tipo de agressão da árvore biliar é árvore biliar é sintetizar sintetizar fosfatase alcalinafosfatase alcalina principalmente nos principalmente nos canalículos biliares.canalículos biliares.

Fosfatase AlcalinaFosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

•Obs.: Obs.: recém-nascidos e crianças, mas especialmente recém-nascidos e crianças, mas especialmente adolescentes, apresentam adolescentes, apresentam valores significativamente valores significativamente mais elevadosmais elevados do que os adultos, devido ao do que os adultos, devido ao crescimento ósseocrescimento ósseo..

TGO Transaminase Glutâmico Oxalacética

• Maiores Concentrações: Maiores Concentrações: é encontrada em diversos é encontrada em diversos órgãos e tecidos, incluindo coração, fígado, músculo órgãos e tecidos, incluindo coração, fígado, músculo esquelético e eritrócitos. esquelético e eritrócitos.

• Está presente no Está presente no citoplasma e também nas citoplasma e também nas mitocôndriasmitocôndrias, e, portanto, sua elevação indica um , e, portanto, sua elevação indica um comprometimento celular mais profundocomprometimento celular mais profundo. .

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

TGO Transaminase Glutâmico OxalacéticaFosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Utilidade Diagnóstica: Utilidade Diagnóstica: hepatites virais agudas,hepatites virais agudas, hepatites alcoólicas, metástases hepáticas e necroses hepatites alcoólicas, metástases hepáticas e necroses medicamentosas e isquêmicas, infarto agudo do medicamentosas e isquêmicas, infarto agudo do miocárdio (IAM). miocárdio (IAM).

TGP Transaminase Glutâmico Pirúvica

• Maiores Concentrações: Maiores Concentrações: fígadofígado, rim e em pequenas , rim e em pequenas quantidades no coração e na musculatura esquelética.quantidades no coração e na musculatura esquelética.

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Sua Sua origem é predominantemente citoplasmáticaorigem é predominantemente citoplasmática, , fazendo com que se fazendo com que se eleve rapidamente após a lesão eleve rapidamente após a lesão hepáticahepática, tornando-se um marcador sensível da função , tornando-se um marcador sensível da função do fígado.do fígado.

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Utilidade Diagnóstica: Utilidade Diagnóstica: patologias que cursam com patologias que cursam com necrose do hepatócitonecrose do hepatócito, como hepatites virais, , como hepatites virais, mononucleose, citomegalovirose e hepatites mononucleose, citomegalovirose e hepatites medicamentosas. medicamentosas.

TGP: TGP: um marcador um marcador hepatocelular.hepatocelular.


Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• ↑ [ ] recém-nascidos: é atribuído à imaturidade dos hepatócitos nos neonatos, que apresentam as membranas celulares mais permeáveis. Os valores se igualam aos níveis do adulto em torno dos 3 meses de idade.


GGT Gama Glutamil Transpeptidase

• Presente nas membranas celulares, envolvida no Presente nas membranas celulares, envolvida no transporte de aminoácidos através da membrana transporte de aminoácidos através da membrana celular. celular.

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Maiores Concentrações: túbulo proximal renal, fígado, pâncreas, intestino.

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

Apresenta-se freqüentemente Apresenta-se freqüentemente elevada em alcoólatraselevada em alcoólatras, , mesmo sem hepatopatia, mesmo sem hepatopatia, na obesidadena obesidade e no e no uso de uso de drogasdrogas como analgésicos, anticonvulsivantes, como analgésicos, anticonvulsivantes, quimioterápicos, estrogênio e contraceptivos orais. quimioterápicos, estrogênio e contraceptivos orais.

• Utilidade Diagnóstica: lesões hepáticasUtilidade Diagnóstica: lesões hepáticas ligadas ligadas ao álcool, colestase (bloqueio do fluxo biliar) ao álcool, colestase (bloqueio do fluxo biliar) crônica e outras patologias hepáticas e biliares.crônica e outras patologias hepáticas e biliares.

GGT Gama Glutamil Transpeptidase

Amilase

• Maiores Concentrações: Maiores Concentrações: a amilase presente no a amilase presente no sangue e na urina de indivíduos normais é de origem sangue e na urina de indivíduos normais é de origem pancreáticapancreática e das e das glândulas salivaresglândulas salivares..

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Função: Função: catalisar a hidrólise da amilopectina, da catalisar a hidrólise da amilopectina, da amilose e do glicogênio.amilose e do glicogênio.

AmilaseFosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Utilidade Diagnóstica: doenças do pâncreasUtilidade Diagnóstica: doenças do pâncreas e na e na investigação da investigação da função pancreáticafunção pancreática. Na pancreatite . Na pancreatite aguda, cerca de 20% dos casos podem cursar com aguda, cerca de 20% dos casos podem cursar com valores normais de amilase (dosagem concomitante valores normais de amilase (dosagem concomitante dos níveis de lípase).dos níveis de lípase).

As causas não-As causas não-pancreáticas de aumento pancreáticas de aumento

da amilase incluem da amilase incluem lesões inflamatórias das lesões inflamatórias das

glândulas salivaresglândulas salivares, , como parotidite, como parotidite, trauma trauma pancreáticopancreático, entre outras., entre outras.

LipaseFosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Maiores Concentrações: Maiores Concentrações: pâncreaspâncreas

• Função: Função: hidrolisar as longas cadeias de hidrolisar as longas cadeias de triglicerídeos no intestino delgado (lipólise).triglicerídeos no intestino delgado (lipólise).

• Utilidade Diagnóstica: Utilidade Diagnóstica: sua avaliação é essencial sua avaliação é essencial no diagnóstico das no diagnóstico das patologias pancreáticaspatologias pancreáticas. Seus . Seus níveis estão aumentados em pacientes com níveis estão aumentados em pacientes com pancreatite aguda e recorrente, abscesso ou pancreatite aguda e recorrente, abscesso ou pseudocisto pancreático, trauma, carcinoma de pseudocisto pancreático, trauma, carcinoma de pâncreas, obstrução dos ductos pancreáticos.pâncreas, obstrução dos ductos pancreáticos.

Amilase vs. LipaseFosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

O O uso combinado da avaliação séricauso combinado da avaliação sérica da lípase e de da lípase e de amilase permite um amilase permite um melhor diagnósticomelhor diagnóstico. .

• Cerca de Cerca de 20% dos casos de pancreatite aguda20% dos casos de pancreatite aguda cursam com cursam com níveis de amilase normaisníveis de amilase normais e com a e com a lipase lipase isoladamenteisoladamente elevada elevada. .

• Nas parotidites agudas, em que a amilase pode Nas parotidites agudas, em que a amilase pode se apresentar elevada, os níveis séricos de lípase se apresentar elevada, os níveis séricos de lípase não se alteram, auxiliando no diagnóstico não se alteram, auxiliando no diagnóstico diferencial. diferencial.

Amilase vs. LipaseFosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

A A lipaselipase, cujos níveis elevam-se quase que , cujos níveis elevam-se quase que

paralelamente aos da paralelamente aos da amilaseamilase, é, portanto, um , é, portanto, um

marcador mais específicomarcador mais específico de doença pancreática de doença pancreática

aguda do que a amilase. aguda do que a amilase.

CK Creatinoquinase

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Maiores Concentrações: Maiores Concentrações: vasta distribuição tissular, vasta distribuição tissular, está principalmente na musculatura estriada, no tecido está principalmente na musculatura estriada, no tecido cardíaco e no cérebro. cardíaco e no cérebro.

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Utilidade Diagnóstica: Utilidade Diagnóstica: lesões da musculatura lesões da musculatura esquelética e infarto agudo do miocárdio.esquelética e infarto agudo do miocárdio.

CK CK CreatinoquinaseCreatinoquinase

• São encontradas no citosol ou associadas com São encontradas no citosol ou associadas com estruturas miofibrilares e são estruturas miofibrilares e são liberadas no sangue liberadas no sangue posteriormente um dano ao tecido. posteriormente um dano ao tecido.

• Possui Possui 3 isoenzimas3 isoenzimas: CK-1 (CK-BB), CK-2 : CK-1 (CK-BB), CK-2 (CK-MB) e CK-3 (CK-MM).(CK-MB) e CK-3 (CK-MM).

TECIDOTECIDO CK-BB / CK-1 CK-BB / CK-1 %%

CK-MB / CK-2 CK-MB / CK-2 %%

CK-MM – CK-3 CK-MM – CK-3 %%

Musculatura EsqueléticaMusculatura Esquelética 0 1 9999

MiocárdioMiocárdio 1 2222 77

CérebroCérebro 97-9897-98 2 a 3 0

Estômago, íleo e cólonEstômago, íleo e cólon 96 0 4

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH


AVC, tumor AVC, tumor no cérebrono cérebro

Infarto, Infarto, miocarditemiocardite

Distrofia muscular de Duchenne, miosites, traumas musculares, injeções intramusculares recentes

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH


Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

CK Creatinoquinase

• Seus níveis séricos podem estar diminuídos em Seus níveis séricos podem estar diminuídos em situações nas quais ocorra perda de massa muscular. situações nas quais ocorra perda de massa muscular.

• A faixa de referência para a CK total é bastante A faixa de referência para a CK total é bastante ampla, variando com idade, estatura, atividade física e ampla, variando com idade, estatura, atividade física e volume da massa muscular.volume da massa muscular.

LDH Lactato DesidrogenaseFosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Maiores Concentrações: é amplamente distribuída em todas as células do organismo, concentrando-se mais especialmente no miocárdio, rim, fígado, hemácias e músculos.

• 5 diferentes formas:5 diferentes formas:

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

Distribuições Distribuições de isoenzimas de isoenzimas diferem entre diferem entre

tecidos tecidos

HH44 ( (LDHLDH11), ), H H33MM11 ( (LDHLDH22), ), H H22MM22 ((LDHLDH33), ), H H11MM33 ( (LDHLDH44) e ) e M M44 ((LDHLDH55).). Diagnosticar Diagnosticar

eventuais eventuais danos aos danos aos

tecidostecidos

Análise da Análise da atividade atividade total da total da LDH LDH

Perfil Perfil das das

isoenzimasisoenzimas

LDH Lactato Desidrogenase

Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

Isoenzimas da lactato desidrogenase Isoenzimas da lactato desidrogenase O conteúdo da isoenzima LDH varia por tecido. A O conteúdo da isoenzima LDH varia por tecido. A

figura mostra as formas específicas de LDH em figura mostra as formas específicas de LDH em tecidos adultos de rato. tecidos adultos de rato.

LDH 1

LDH 2

LDH 3

LDH 4

LDH 5


Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

• Utilidade Diagnóstica: seus valores encontram-se elevados em todas as situações em que ocorre grande destruição celular.

Ex.: anemia hemolítica, infarto agudo do miocárdio, infarto pulmonar, doenças musculares, lesões hepáticas, neoplasias primárias ou secundárias (metastásicas), hepatites.


Fosfatase Ácida

Fosfatase Alcalina

TGO

TGP

GGT

Amilase

Lipase

CK

LDH

Padrões de densitometria das isoenzimas LDH no soro Padrões de densitometria das isoenzimas LDH no soro normal e em condições patológicasnormal e em condições patológicas

A atividade sérica total da LDH também se encontra A atividade sérica total da LDH também se encontra aumentada nesses pacientes. aumentada nesses pacientes.


• Gaw, Allan. Gaw, Allan. Bioquímica Clínica.Bioquímica Clínica. 2. ed. Guanabara Koogan. 2. ed. Guanabara Koogan.• Bronstein, Mario / Cruz, Maria Christina. Bronstein, Mario / Cruz, Maria Christina. Índex Bronstein – Apoio Diagnóstico.Índex Bronstein – Apoio Diagnóstico. Rio de Janeiro: Sextante. 2001. 416 p.Rio de Janeiro: Sextante. 2001. 416 p.• Baynes, John / Dominiczak, Marek H.. Baynes, John / Dominiczak, Marek H.. Bioquímica Médica.Bioquímica Médica. 1. ed. Espanha: 1. ed. Espanha: Manole. 2000. 566 páginas.Manole. 2000. 566 páginas.• Devlin, Thomas M.. Devlin, Thomas M.. Manual de Bioquímica com Correlações Clínicas.Manual de Bioquímica com Correlações Clínicas. 5. ed. São 5. ed. São Paulo: Edgard Blücher Ltda. 2003. 1084 páginas.Paulo: Edgard Blücher Ltda. 2003. 1084 páginas.• Berg, Jeremy M. / Tymoczko, John L. / Stryer, Lubert. Berg, Jeremy M. / Tymoczko, John L. / Stryer, Lubert. Bioquímica.Bioquímica. 5. ed. Rio de 5. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan. 2004. 1059 páginas. Janeiro: Guanabara Koogan. 2004. 1059 páginas. • Campbell, Mary K.. Campbell, Mary K.. Bioquímica.Bioquímica. 3. ed. Porto Alegre: Artmed Editora. 2000. 752 3. ed. Porto Alegre: Artmed Editora. 2000. 752 páginas. páginas. • Smith, Colleen / Marks, Allan D. / Lieberman, Michael. Smith, Colleen / Marks, Allan D. / Lieberman, Michael. Marks´ Basic Medical Marks´ Basic Medical Biochemistry – A Clinical Aprroach.Biochemistry – A Clinical Aprroach. 2. ed. EUA: Lippincott Williams & Wilkins. 2. ed. EUA: Lippincott Williams & Wilkins. 2005. 977 páginas. 2005. 977 páginas. • Champe, Pamela C. Champe, Pamela C. Bioquímica Ilustrada.Bioquímica Ilustrada. • Siqueira, A.J. / Azevedo, A.M.P. / Remião, J.O. / Dutra, A.M.. Siqueira, A.J. / Azevedo, A.M.P. / Remião, J.O. / Dutra, A.M.. Enzimas.Enzimas.

BIBLIOGRAFIA

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