Diferenciação de BATPossível terapia celular contra a

obesidade?Leonardo Marques da Fonseca

Obesidade

• Acúmulo excessivo ou anormal de gordura que apresenta risco à saúde;

• BMI ≥ 30;• O dobro de 1980;• 43 milhões de crianças abaixo de 5 anos em

2010;• 65 % da população mundial vive em países

onde se morre mais por obesidade do que desnutrição.

(OMS, 2011)

(CDC, 2007)

Duncan, 2011

Termogênese

• Tremor – Conversão da energia química do ATP em energia cinética e calor

• Não-tremor – Dissipação da energia do gradiente de prótons como calor

BAT

(Nedergaard, 2007)

Terapia Celular

• Transplante de ilhotas;

Tratamento

http://www.clivir.com/lessons/show/is-there-a-cure-for-diabetes.html

Terapia Celular

• Transplante de ilhotas;• Células tronco

Tratamento

(Zhao, 2010)

Indução de Leptina

(Orci, 2003)

(Nedergaard, 2007)PET - fluorodeoxiglicose

• 5 a 10 % da população adulta apresenta BAT;• Quantidade varia muito entre indivíduos;• Forte indício de que a diferenciação de

adipócitos marrons pode ser induzida em roedores;

• Implicação clínica em humanos.

Objetivo

Transplante de adipócitos marrons em ratos que sofreram ablação de BAT.

Metodologia

(Cypess, 2010)

Cultura

• Biópsias de tecido adiposo de fossa supraclavicular de animais normais;

• Meio de proliferação (DMEM) – até coinfluência– Insulina, tri-iodotironina, isoprenalina;

• Meio de diferenciação – 10 a 30 d– Transferrina, dexamethasona, isobutil-

metilxantina, biotina, pantotenato, GH, rosiglitazona;

(Lee, 2011)

Cultura mostrando adipócitos marrons diferenciados(Lee, 2011)

(Lee, 2011)

Modelo Experimental

• Camundongos transgênicos UCP-DTA

Grupos Experimentais

• ScF (subcutaneous fat) – cultura primária de tec. Adiposo subcutâneo;

• BAT – cultura de adipócitos marrons;• Enxertos na região subclavicular;• Dietas diferenciadas (controle e “high fat”);

Experimentos

• Manter os animais a 29 oC (4 a 16 semanas);• Controlar a quantidade de calorias ingeridas e

peso do animal;• Verificar a temperatura retal;• Calorimetria antes e após administração de

NE;• Após sacrificar os animais dosar UCP1 nos

enxertos e verificar a quantidade de tecido adiposo branco;

Resultados Esperados

• Manutenção da temperatura corporal através de termogênese dependente de UCP nos animais tratados;

• Maior ganho de peso nos animais ScF alimentados com a dieta high fat;

• Consumo de O2 aumentado nos animais BAT talimentados com a dieta high fat após injeção de NE.

Conclusão

• Recuperação da capacidade termogênica (non-shivering) de animais que sofrerão ablação de BAT;

• Importantes implicações quanto à cura da obesidade em humanos.