atualizaÇÃo no diagnÓstico laboratorial e epidemiolÓgico
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ATUALIZAÇÃO NO DIAGNÓSTICO LABORATORIAL E
EPIDEMIOLÓGICO DAS MENINGITES
Marcia Nunes
Setor de Bacteriologia Clínica
SES/SVS/LACEN-RJ
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DAS MENINGITES
BACTERIANAS NA REDE
Quimiocitólogico Bacterioscópico semeadura Cultura e Látex
Cultura, Látex (pesq. Antígeno) Identificação Bacteriana Sorogrupagem Perfil de Sensibilidade
Identificação Fenotípica e Genotípica
Sorotipagem , Perfil de Sensibilidade
(CIM, Microaglutinação em caldo)
Caracterização genética, Banco de
cepas(Liofilização)
Laboratório Hospitalar
Lacen
IAL - LRN
Amostra Clínica
• Líquor
• Sangue
• Sangue/Soro • Raspado ou aspirado de lesões petequiais hemorrágicas de pele
Diagnóstico Laboratorial: Amostras Clínicas
A coleta de sangue (hemocultura) e soro deve ser feita para
TODOS os casos possíveis, mesmo na ausência de sinais de
sepse.
Lesões cutâneas
em pacientes com
meningococcemia
Raspado ou aspirado de lesões petequiais
hemorrágicas de pele
Diagnóstico Laboratorial: Exames
Exames
• Bacterioscopia
• Cultura
• Hemocultura
• Identificação
• Aglutinação pelo
Látex
Fonte: Lacen
O uso prévio de antimicrobianos reduz
muito as chances de isolar o agente
etiólogico na cultura
PROTOCOLO DE ENVIO DE AMOSTRAS
Amostras de LCR para Cultura não devem ser
transportadas sob refrigeração. As bactérias dos
gêneros Haemophilus, Neisseria e Streptococcus, são
exigentes para o seu crescimento em cultura e são
sensíveis às condições ambientais (baixa
temperatura), portanto é necessário cuidado quanto
ao acondicionamento, transporte e manuseio
evitando‐se contaminação e morte dos
microrganismos.
Neisseria meningitidis: Diplococos Gram-negativos,
encapsulados. Cresce em meios enriquecidos com sangue,
sob condições de umidade e microaerofilia , são sensíveis a
baixas temperaturas.
Fonte: Lacen Fonte Lacen
Identificação da Neisseria meningitidis
Gram-DGN
Oxidase Positiva
Catalase Positiva
Identificação da Neisseria meningitidis
• Utilização de carboidratos - MEIO CTA + 1% açúcar
G M L S
Haemophylus influenzae: Cocobacilos Gram negativo (CBGN), anaeróbios facultativos, Cresce em meios enriquecidos com sangue, sob condições de umidade e microaerofilia. Colônias pequenas, brilhantes e translúcidas. Para Crescimento in vitro requer ambos os fatores exógenos de crescimento: Hemina (fator X) e NAD (fator V)
Identificação do Haemophylus influenzae
Prova de Satelitismo
Gram - CBGN
Catalase Glicose Xilose Sacarose Lactose
+ + + - -
Fonte Lacen
Streptococcus pneumoniae: Diplococos Gram-positivos, encapsulados. Cresce em meios enriquecidos com sangue
(Agar sg e Agar Ch), sob condições de umidade e
microaerofilia, apresentando hemólise alfa.
Fonte Lacen
Identificação do Streptococcus pneumoniae
Colônias e Hemólise alfa
(sangue carneiro 5%)
Gram-DGP Catalase negativa
Optoquina Sensível
Sp
Sp
Aglutinação pelo Latex
As partículas de látex são
sensibilizadas com anticorpos
específicos. Reação
antigeno/anticorpo que permite
uma visualização de aglutinação
positiva na presença de antígenos
específicos.
• H. influenzae tipo b,
• Streptococcus pneumoniae,
• Streptococcus grupo B
•N. meningitidis dos Grupos A,
•B/E. coli K1, C, Y/ W135 Fonte Lacen
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
CulturasLCR
Latex LCR Latex soro
culturas
Positivos
Sp
EXAMES REALIZADOS NO LACEN-RJ: JULHO A SETEMBRO DE 2017
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
3,5
4
4,5
Cepas Recebidas
Sp
Nm
Klebsiella sp
S.aureus
Enterobacter sp
CEPAS RECEBIDAS DO IEISS: PERÍODO DE JULHO A SETEMBRO
DE 2017
0
10
20
30
40
50
60
CulturasRealizadas
CepasRecebidas
Total
Sp
S. sp
Nm
BGN NF
CULTURAS REALIZADAS NO LACEN E CEPAS RECEBIDAS DO
IEISS: OUTUBRO A 21 DE NOVEMBRO DE 2017
O Núcleo de Meningites, Pneumonias e
Infecções Pneumocócicas, Centro de Bacteriologia
do Instituto Adolfo Lutz (IAL), é o Laboratório de
Referência Nacional para Meningites Bacterianas e
para as Doenças Pneumocócicas Invasivas pelo
Ministério da Saúde. O IAL monitora as
características fenotípicas e moleculares das cepas
de Neisseria meningitidis, Haemophilus
influenzae e Streptococcus pneumoniae isoladas
de casos de doenças invasivas no Brasil através da
vigilância nacional
Vigilância sobre a DPI
Isolado bacteriano de S. pneumoniae (Spn) de sítio estéril (sangue,
LCR, Liq. pleural, ascite, abscessos internos e etc), deve ser
enviado ao IAL. É fundamental monitorar os sorotipos do Spn para
observar mudança ao longo dos anos e permitir avaliar o impacto da
introdução das vacinas conjugadas no país e pode dar grandes
contribuições à Vigilância das Doenças
Os municípios que dispõem de rotina bacteriológica, ao isolar
microrganismos em investigação de meningite ou Spn de sítio estéril,
deverão enviar a cepa ao LACEN. Enviar a placa ou tubo com o
crescimento recente do microrganismo. Ao enviar a cepa, o laboratório
local deverá especificar o sítio biológico
O manuseio das culturas deve obedecer às normas internacionais
de biossegurança. As bactérias são consideradas agentes
infecciosos de Risco Biológico Nível 2, que corresponde a
moderado risco individual e limitado risco para a comunidade.
Entretanto este risco aumenta para os profissionais que
manipulam rotineiramente isolados de N. meningitidis. A
recomendação é que as cepas sejam manipuladas por profissionais
treinados para o trabalho com agentes patogênicos; em Cabines de
Segurança Biológica (CSB)-NB2 e com uso obrigatório de EPIs
(luva, máscara,óculos e avental). As cabines de segurança devem
estar com a manutenção em dia.
BIOSSEGURANÇA
A Meningite tuberculosa é uma infecção das meninges decorrente de uma tuberculose, causada pela bactéria do complexo Mycobacterium tuberculosis. Diferentemente das demais meningites, a Meningite Tuberculosa pode apresentar uma evolução mais lenta, de semanas ou meses, tornando difícil o diagnóstico de suspeição.
Semear diretamente 0,2ml de LCR no meio de cultura Lowenstein-Jewsen, incubar em estufa a 37ºC por 56 dias. O Diagnóstico é realizado por cultura do LCR no meio Lowenstein-Jewsen, com resultado em 56 dias se for negativo. Se positivo, a partir do 20º dia de incubação. Existe o método automatizado MGIT, com resultado negativo em 42 dias e tempo menor de identificação do positivo
Meningite Causada por Mycobacterium
Equipe do Setor de
Bacteriologia
Clínica
Carla Felix
Ivan jorge
Lícia Lira
Liliane Fraga
Lucieny Faria
Marcia Nunes
Sandra Vasconcellos
Vita Ribeiro
Equipe do Setor
de
bacteriologia da
Tuberculose
Amanda
Elisangela
Fernanda
Gabriel
Marcia Nunes
Mônica
Rafael
Riceli
Thiago
