cromatografia em papel

Curso: Agronomia. Disciplina: Técnicas Experimentais em Fisiologia e Bioquímica Vegetal

Tema: Cromatografia em Papel. Alunos: Adrielle Rodrigues Prates Luis Aurelio Sanches Professor: Liliane Santos de Camargos

Analise de pigmentos de pimentões por cromatografia em papel.

O que é cromatografia?

A cromatografia é uma técnica de separação especialmente adequada para ilustrar os conceitos de interações intermoleculares, polaridade e propriedades de funções orgânicas, com uma abordagem ilustrativa e relevante.

Experimento.

O objetivo deste trabalho é utilizar a

cromatografia em papel para separar os

pigmentos de pimentões verdes,

amarelos e vermelhos e, com base no

resultado dos cromatogramas

Procedimento experimental

Pimentões verdes, amarelos e vermelhos

(Figura 3, a) foram picados em pedaços

pequenos. Foram pesados cerca de 30 g

dos pedaços de cada pimentão, aos

quais foram adicionados 10 mL de

acetona e 50 mL de hexano (Figura 3, b).

Figura 3.

As misturas foram maceradas

separadamente, em gral de porcelana

com pistilo, e deixadas em repouso por 1

hora (Figura 3, c). Após esse período, as

misturas foram filtradas em funil comum,

com papel de filtro pregueado

Whatmann nº 1

Figura 3, c

em seguida, as fases aquosas dos filtrados

foram separadas em funil de separação,

resultando cerca de 30 mL de cada uma

das fases hexânicas (Figura 3, d)

Figura 3, d

Sulfato de sódio anidro foi adicionado a

essas fases orgânicas que, após filtração,

foram concentradas até o volume de 1

mL, com aquecimento em banho-maria

mantido a 70 ºC e sob agitação.

O concentrado resultante de cada

extrato foi aplicado em fita de papel

preparada com papel de filtro

Whatmann nº 1, com dimensões de 3,0

por 8,5 cm. Uma gota de cada amostra

foi aplicada, com um capilar, próxima à

base do papel (cerca de 1 cm acima da

borda), cuidando para que o diâmetro

da mancha não ultrapassasse 0,5 cm.

A cuba cromatográfica foi preparada

com um recipiente cilíndrico de vidro

com tampa e contendo um pedaço de

papel de filtro embebido com fase

móvel, deixando a atmosfera interna do

recipiente saturada com vapores da fase

móvel para facilitar a “corrida”

cromatográfica

Após a evaporação do

solvente no qual a amostra

estava diluída para

aplicação, a fita de papel

foi posicionada na cuba

cromatográfica de modo

que o nível da fase móvel

ficasse abaixo do ponto

onde a amostra havia sido

aplicada. Os extratos

aplicados foram eluídos

com hexano com 5% de

acetona (Figura 3, e)

Figura 3, e

Resultados

A extração dos pimentões com

hexano:acetona 5:1 fornece extratos

contendo os principais pigmentos dos

pimentões: carotenos, criptoxantinas,

capsantinas e capsorubina

Conclusões A cromatografia em papel de extratos de

pimentões permite a visualização da

separação cromatográfica dos principais

pigmentos existentes no extrato: os

carotenos, as criptoxantinas, as

capsantinas e a capsorubina.

A simplicidade do experimento torna sua

realização viável em laboratórios que

não dispõem de muitos recursos

materiais.

Para realizar o experimento com materiais mais

acessíveis, podem ser feitas as seguintes

substituições:

1- hexano por thinner

2- acetona por removedor de esmalte

3- papel de filtro Whatmann nº 1 por filtro de papel

para coar café

4- sulfato de sódio anidro por sal de cozinha

5- o recipiente cilíndrico de vidro com tampa por

copo de vidro coberto com um pires.

Referências Bibliográficas RIBEIRO, N.M; NUNES, C.R. Análise de pigmentos de pimentões por cromatografia de papel. Química

Nova Escola, Agosto de 2008, n° 29. p 34-37