tema 11 bases de la genética molecular

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Bases de la genética molecular

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Page 1: Tema 11  bases de la genética molecular

Bases de la genética molecular

Page 2: Tema 11  bases de la genética molecular

El ADN portador de la información genética

A principios del siglo XX ya se sabía que los genes (los factores hereditarios) estaban en los cromosomas.Se sabía que éstos estaban formados por ADN y proteínas. Los trabajos de Grifith (1928) Avery, Mac Leod y MacCarthy (1944) demostraron que era el ADN y no las proteínas la molécula portadora de la información genética.

Page 3: Tema 11  bases de la genética molecular

Duplicación del ADN para transmitir información a las siguientes generaciones por medio de los cromosomas (asociaciones de ADN y proteínas). Transcripción del ADN para formar ARNm principalmente, pero también ARNr, ARNt y ARNn. Traducción, en los ribosomas, del mensaje contenido en el  ARNm a proteínas. Capacidad de cierta mutación química, para conseguir nueva variabilidad genética y por tanto fuente de evolución en las especies.

Funciones de los ácidos nucléiccos

Page 4: Tema 11  bases de la genética molecular

El dogma central de la Biología

“El dogma central de la Biología” se refiere al paso desde el ADN hasta las proteínas para expresar el mensaje genético. El esquema de este “dogma” ha sido encontrado repetidamente y se considera una regla general (salvo en los retrovirus)

ADN ARNm ProteínaTranscripción

Transcripcióninversa

Duplicación

Duplicación

Traducción

Page 5: Tema 11  bases de la genética molecular

Transcriptasa inversa

Transcriptasa inversa

Transcriptasa inversa

Transcriptasa inversa

ARN vírico

EnvolturaRETROVIRUS

Membrana plasmática de la célula huésped

ADNc(complementario) ADNc

bicatenario

ADNcmonocatenarioDegradación

del ARN

Los retrovirusAlgunos virus poseen ARN replicasa, capaz de obtener copias de su ARN. Otros poseen transcriptasa inversa que sintetiza ADN a partir de ARN mediante un proceso de retrotranscripción.

Page 6: Tema 11  bases de la genética molecular

Duplicación del ADN

Page 7: Tema 11  bases de la genética molecular

Hipótesis

Page 8: Tema 11  bases de la genética molecular

Hipótesis conservativa Hipótesis dispersiva

Duplicación del ADN

Page 9: Tema 11  bases de la genética molecular

F1

Replicación

medio con 14N

15N-15N

15N-14N

15N-14N 15N-14N

Duplicación del ADNHipótesis semiconservativa

Page 10: Tema 11  bases de la genética molecular

F2

15N-14N

15N-14N

14N-14N

15N-14N

14N-14N

Duplicación del ADNHipótesis semiconservativa

Page 11: Tema 11  bases de la genética molecular

Matthew Meselson Franklin Stahl

Duplicación del ADN

Estos autores descubrieron hacia 1958 que la replicación es semiconservativa

Page 12: Tema 11  bases de la genética molecular

Enzimas que intervienen

Page 13: Tema 11  bases de la genética molecular

Helicasas

Su misión es romper los puentes de hidrógeno que unen las bases nitrogenadas de ambas hebras. Este desenrollamiento provoca a su vez, superenrollamiento en el resto de la doble hélice. Otro par de enzimas, llamadas topoisomerasas, liberan esta tensión al cortar y luego reunir la doble hélice.

Page 14: Tema 11  bases de la genética molecular

Helicasa

helicasa

Page 15: Tema 11  bases de la genética molecular

Topoisomerasas Además de lo visto, son capaces de actuar sobre la forma del ADN, ya sea:

enredándolo para permitir que se almacene y no se transcriba. desenredándolo para que controle la síntesis de proteínas transcribiéndose y para facilitar la replicación.

Page 16: Tema 11  bases de la genética molecular

Topoisomerasas

topoisomerasa

Estas enzimas son necesarias debido a los inherentes problemas causados por la propia estructura del ADN.

Page 17: Tema 11  bases de la genética molecular

Las ADN polimerasas son las que sintetizan la nueva cadena de ADN. No pueden empezar a añadir nucleótidos sin tener un soporte al que unirlos (no pueden empezar “de novo”)Utilizan un cebador (segmento corto de ARN) al que se le agregan los nuevos nucleótidos.

ADN polimerasas

Page 18: Tema 11  bases de la genética molecular

La ADN polimerasa copia la cadena molde con alta fidelidad. Sin embargo, introduce en promedio un error cada 107 nucleótidos incorporados. Tiene, además, la capacidad de corregir sus propios errores, ya que puede degradar ADN que acaba de sintetizar.

ADN polimerasas

Page 19: Tema 11  bases de la genética molecular

ADN polimerasa

ADN polimerasa

Page 20: Tema 11  bases de la genética molecular

Hay varias, con dos funciones: Polimerasa. Va uniendo los nucleótidos, añadiendo siempre al extremo 3’. Necesita una base de ARN o ADN (cebador) para ir uniendo los nucleótidos ya que no puede empezar de cero. Exonucleasa. Va retirando los trozos de cebador además de retirar trozos de ADN erróneos como vimos.

ADN polimerasa

Page 21: Tema 11  bases de la genética molecular

ADN polimerasaEstá constituida por un complejo (holoenzima) formado por varias subunidades. P ej. Pol III de E. coli

Subunidad a: cuerpo central. Sintetiza ADN.Subunidad e: actividad exonucleasa.Subunidad θ : ensambla las anteriores.Subunidad τ: mantienen unido el dímero.Subunidad γ y δ: ayudan al avance de la enzima.Subunidad b: Une la enzima a las hebras de ADN

Curiosidad

Page 22: Tema 11  bases de la genética molecular

La ADN polimerasa solo puede unir nucleótidos al extremo 3’ y como las dos hebras de ADN se orientan en sentido contrario, cada hebra se replica de manera totalmente distinta:

la hebra que se lee en sentido 5’ se va a replicar en sentido 3’ por lo que no hay problema y se sintetiza de seguido. Da lugar a la hebra conductora.

ADN polimerasa

Page 23: Tema 11  bases de la genética molecular

ADN polimerasala hebra que se lee en sentido 3’ se va a replicar en sentido 5’ por lo que se va a sintetizar a trozos. Da lugar a la hebra retardada.

La ADN polimerasa recorre las hebras molde en el sentido 3’-5’ uniendo los nuevos nucleótidos en el extremo 3’.

Page 24: Tema 11  bases de la genética molecular

Fragmentos de Okazaki

Page 25: Tema 11  bases de la genética molecular

Otras enzimas que intervienen en el proceso son:

Primasas: sintetizan los iniciadores de ARN cebador que se necesitan para iniciar la replicación. Son ARN polimerasas que no necesitan un trozo previo para empezar a añadir nucleótidos. Pueden empezar de novo.

Otras enzimas

Page 26: Tema 11  bases de la genética molecular

Ligasas: sellan las lagunas dejadas por las exonucleasas cuando retiran los ARN cebadores. Catalizan los enlaces fosfodiester entre nucleótidos adyacentes.Proteínas de unión (SSB) se unen a la hebra sencilla del ADN: estabilizan la horquilla de replicación, impidiendo que las hebras se unan.

Otras enzimas

Page 27: Tema 11  bases de la genética molecular

Mecanismo general

Page 28: Tema 11  bases de la genética molecular

Duplicación del ADN

La duplicación o replicación del ADN tiene lugar antes de la división celular. El mecanismo consiste en:

Separación de las dos cadenas de polinucleótidos. Cada una actúa como plantilla de la nueva. La cadena original se abre, cada uno de los nucleótidos atrae a otro nucleótido complementario formado previamente por la célula.

Page 29: Tema 11  bases de la genética molecular

Los nucleótidos que intervienen son desoxirribonucleótidos trifosfato:

ATP, GTP, TTP, CTP.Al unirse a la cadena en formación pierden un grupo pirofosfato(P-Pi) y se aprovecha la energía desprendida.

Duplicación del ADN

Page 30: Tema 11  bases de la genética molecular

Los nucleótidos complementarios van encajando en su lugar, a través una enzima ADN polimerasa.Los nucleótidos nuevos se unen:

a los de la cadena molde por enlaces de hidrógeno entre ellos, por enlaces fosfodiester.

Este proceso continúa hasta que se ha formado una nueva cadena de polinucleótidos.

Duplicación del ADN

Page 32: Tema 11  bases de la genética molecular

En procariotas

Page 33: Tema 11  bases de la genética molecular

En procariotas se han descrito tres ADN polimerasas, todas ellas con actividad polimerasa y exonucleasa

ADN polimerasa I: retira el cebador de ARN y lo sustituye por ADN. ADN polimerasa II: repara ADN dañado por agentes externos. No participa en la replicación. ADN polimerasa III: es la que sintetiza el ADN, salvo el que sustituye a los cebadores.

ADN polimerasas

Page 34: Tema 11  bases de la genética molecular

La replicación se inicia en una secuencia concreta, llamada origen de la replicación. Intervienen helicasas y topoisomerasas para desespiralizar y separar ambas hebras.

Inicio

Por la acción de estos enzimas (SSB) se forma y mantiene la horquilla de replicación.

Horquilla de replicación

Page 35: Tema 11  bases de la genética molecular

A partir del origen, la replicación es en ambos sentidos.Debido a las limitaciones de las ADN polimerasas cada hebra se duplica de distinta manera:

una cadena produce la hebra conductora otra cadena produce la hebra retardada,

Elongación

Page 36: Tema 11  bases de la genética molecular

Hebra continua La ADN pol necesita un cebador al que añadir nucleótidos. Una ARN polimerasa, primasa, fabrica el trozo de ARN cebador o “primer”. La ADN polimerasa III utiliza ese cebador para fabricar la nueva cadena de ADN.

Page 37: Tema 11  bases de la genética molecular

Hebra continuaCuando termina, una ADN polimerasa I retira el ARN cebador y lo sustituye por ADN. Finalmente una ligasa une los dos fragmentos de ADN (el sintetizado por la ADN-polimerasa III y el que sustituye al ARN cebador. En E. coli las ADN polimerasas I y III, tienen capacidad para corregir errores.

Page 38: Tema 11  bases de la genética molecular

Hebra continua

Page 39: Tema 11  bases de la genética molecular

Hebra retardada La enzima Primasa (ARN polimerasa que utiliza como molde ADN) comienza sintetizando un corto segmento de ARN cebador a unos 1000 nucleótidos del origen. la ADN polimerasa III sintetiza ADN a partir del cebador, en sentido 3’, hasta llegar al origen, dando lugar a un fragmento de OkazakiOrigen

ADN

ARN

5’

Page 40: Tema 11  bases de la genética molecular

Fragmentos de Okazaki

Se conocen como fragmentos de Okazaki a las cadenas cortas de ADN recién sintetizadas en la hebra discontinua. Éstos se sintetizan en dirección 5’→ 3’ a partir de cebadores de ARN que después son eliminados.Los fragmentos de Okazaki se unen entre sí mediante la ADN ligasa completando la nueva cadena.

Page 41: Tema 11  bases de la genética molecular

Se van fabricando fragmentos de Okazaki nuevos a medida que el ADN patrón se va abriendo. Cuando la ADN polimerasa III que fabrica el ADN del fragmento llega a un nuevo cebador, la ADN polimerasa I sustituye a la ADN polimerasa III.

Hebra retardada

Page 42: Tema 11  bases de la genética molecular

Hebra retardada La ADN polimerasa I retira el ARN cebador mediante su actividad exonucleasa y rellena el hueco sintetizando ADN

Por último, los dos fragmentos de Okazaki tienen que unirse, enlazando el extremo 3'OH de un fragmento con el 5'P del siguiente fragmento. Dicha labor de sellado y unión de los sucesivos fragmentos la realiza la Ligasa.

Page 43: Tema 11  bases de la genética molecular

Hebra retardada

Page 44: Tema 11  bases de la genética molecular

Hebra continua

Page 46: Tema 11  bases de la genética molecular

En eucariotas

Page 47: Tema 11  bases de la genética molecular

Duplicación en eucariotasEs muy similar a procariotas excepto por:

El empaquetamiento y espiralización del ADN es mucho más complejo por lo que los procesos previos son más complicados.Existen cuatro tipos de ADN polimerasas (a, b, y ).

Page 48: Tema 11  bases de la genética molecular

Las histonas también se duplican durante la replicación. Junto al ADN formarán el nucleosoma. Los nuevos nucleosomas se incorporan a la hebra retardada y los viejos en la conductora.Los fragmentos de Okazaki son más cortos que en procariotas

Duplicación en eucariotas

Page 49: Tema 11  bases de la genética molecular

Orígenes de replicaciónComo la molécula de ADN es muy larga, existen múltiples orígenes de replicación (replicones) para hacer la duplicación mas rápida (si lo hiciera a partir de un extremo, tardaría 30 días!!!!)

Page 51: Tema 11  bases de la genética molecular

3’

5’

5’

3’3’

5’

5’3’

3’5’

3’

La ADN polimerasa necesita un fragmento de ARN (cebador o primer) con el extremo 3’ libre para iniciar la síntesis.

Una de las hebras se sintetiza de modo contínuo. Es la conductora o lider.

Fragmentos de Okazaki

La otra hebra se sintetiza de modo discontinuo formándose fragmentos que se unirán más tarde. Es la retardada.

La ADN polimerasa recorre las hebras molde en el sentido 3’-5’ uniendo los nuevos nucleótidos en el extremo 3’.

El mecanismo de elongación (I)

Mitad de una burbuja de replicación

Page 52: Tema 11  bases de la genética molecular

El mecanismo de elongación (II)

1 2

3 4

5 6

La primasa sintetiza un cebador en cada hebra de la burbuja de replicación.

Las ADN polimerasa comienzan la síntesis de la hebra conductora por el extremo 3’ de cada cebador.

La primasa sintetiza un nuevo cebador sobre cada hebra retardada.

La ADN polimerasa comienza a sintetizar un fragmento de ADN a partir del nuevo cebador.

Cuando la ADN polimerasa llega al cebador de ARN, lo elimina y lo reemplaza por ADN.

La ligasa une los fragmentos de ADN.

Nuevo cebador

Cebador

Ligasas

Hebra retardada

Hebra retardada

Primasas

Cebador

Nuevo cebador

Page 54: Tema 11  bases de la genética molecular

Síntesis de proteínas

Page 55: Tema 11  bases de la genética molecular

Genes, enzimas y caracteres

En 1901, el médico británico Garrod estableció la relación entre los genes y las sustancias químicas al ver que enfermedades genéticas dependían de sustancias presentes o ausentes.En 1948, Beadle y Tatum establecieron la relación entre genes y enzimas, llegando a la conclusión de que las alteraciones de los nucleótidos alteraban la secuencia de aminoácidos de las enzimas.

Page 56: Tema 11  bases de la genética molecular

Al alterarse los enzimas, se alteran las rutas metabólicas en las que intervienen y no se producen las sustancias finales de dichas rutas, alterándose el carácter que depende de dichas enzimas.

Genes, enzimas y caracteres

Page 57: Tema 11  bases de la genética molecular

Por lo tanto, para que se expresen los genes en los distintos caracteres, tienen que traducirse a proteínas. Este proceso consta de varias fases.

Genes, enzimas y caracteres

Page 58: Tema 11  bases de la genética molecular

SÍNTESIS PROTEÍCA: Fases Transcripción:

ADN ARNm, ARNr y ARNtTraducción:

ARNm Secuencia de aminoacidos

Procesamiento de Proteínas Formación de Estructuras:

Primaria, Secundaria, Terciaria y Cuaternaria.

Page 59: Tema 11  bases de la genética molecular

Transcripción

Page 60: Tema 11  bases de la genética molecular

IntroducciónLa transcripción del ADN es el primer proceso de la expresión génica.Mediante este proceso se pasa la información contenida en la secuencia de ADN a la secuencia de aminoácidos de la proteína utilizando diversos ARN como intermediarios.

Page 61: Tema 11  bases de la genética molecular

La transcripción: requisitos

La síntesis de ARN se produce gracias a la acción de la enzima ARN polimerasa.

Necesita una molécula de ADN como molde o patrón para establecer la secuencia específica de bases del ARN que se va a sintetizar.

Page 62: Tema 11  bases de la genética molecular

La transcripción: requisitosLa ARN polimerasa se fija a regiones específicas del ADN (regiones promotoras que no se transcriben) para comenzar su acción a partir de ese punto.

Page 63: Tema 11  bases de la genética molecular

Son enzimas complejas formadas por varias subunidades (holoenzimas) No requiere cebador. No tiene la función de corregir errores. Sintetiza en sentido 3’ En procariotas hay un sólo un tipo con múltiples subunidades.

ARN polimerasa

Page 64: Tema 11  bases de la genética molecular

ARN polimerasaEn eucariotas hay 3 tipos de ARN-polimerasa:

I sintetiza ARNr (El ARN de las subunidades grandes de los ribosomas) II sintetiza ARNm (mensajero) III sintetiza ARNt, ARNr 5S (el ARN de la subunidad pequeña de ribosomas)

Page 65: Tema 11  bases de la genética molecular

Tan solo se transcribe una de las dos hebras de ADN. Se la llama hebra molde, sin sentido o no codificante. La otra hebra es la no transcrita, inactiva, codificante.

ADN ARN

Page 66: Tema 11  bases de la genética molecular

(5)’ CGCTATAGCG (3’) cadena codificadora del ADN (la secuencia de ARN es idéntica a esta cadena, salvo por tener uracilo en vez de timina. Por eso se la llama no transcrita, con sentido o codificante)(3’) GCGATATCGC (5’) cadena molde del ADN. (la secuencia de ARN es complementaria de esta cadena, Por eso se la llama transcrita, sin sentido o no codificante) (5’) CGCUAUAGCG (3’) transcrito de ARN

Orientación y nomenclatura de las cadenas en relación a la transcripción

ADN ARN

Page 67: Tema 11  bases de la genética molecular

¿Qué cadena de la doble hélice es la codificadora?

Depende de cada gen, no es una propiedad del cromosoma. Siempre se transcribe en dirección 3’

ADN ARN

Page 68: Tema 11  bases de la genética molecular

Mecanismo

Page 69: Tema 11  bases de la genética molecular

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EL PROCESO DE LA TRANSCRIPCIÓN EN

PROCARIOTAS1. INICIACIÓN

2. ELONGACIÓN3. TERMINACIÓN

Page 70: Tema 11  bases de la genética molecular

HOLOENZIMA = 4 subunidades

2 a (alfa): ensamblan el enzima y promueven interacciones b (beta): actividad catalítica b’: se une al ADN ω (omega): ensamblaje y regulación expresión (sigma): se une al promotor y posiciona a la holoenzima en el sitio de inicio

ARN polimerasa en procariotas

Curiosidad

Page 71: Tema 11  bases de la genética molecular

El promotor de un gen es la sección de ADN que controla el inicio de la transcripción. Es una secuencia específica de ADN, generalmente TATA (caja TATA). Es a donde se une la ARN polimerasa.

Inicio

Page 72: Tema 11  bases de la genética molecular

Inicio Los promotores se localizan en los extremos 5' de los genes, a -35 y -10 nucleótidos del comienzo del gen (+1), y a ellos se une la ARN pol.La ARN pol, unida al promotor, abre la doble hélice de ADN.

Page 73: Tema 11  bases de la genética molecular

InicioPrimero se une al promotor -35 .Luego avanza hasta el -10 donde la la subunidad que la ayudó a fijarse () se desprende. La ARN pol avanza hasta el primer nucleótido del gen y comienza a transcribir.

Page 74: Tema 11  bases de la genética molecular

Inicio La ARN polimerasa comienza a unir ribonucleótidos trifosfato mediante enlaces fosfodiéster.Lo hace sin necesidad de cebador. Una vez que se forma el primer enlace fosfodiéster (con separación de un pirofosfato), acaba la etapa de iniciación.Una vez comenzada la síntesis, el promotor queda libre para volver a funcionar de nuevo.

Page 75: Tema 11  bases de la genética molecular

Inicio

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Adición de sucesivos ribonucleótidos.Sentido de lectura del ADN por la ARN pol: 3’ 5’Sentido de síntesis ARN: 5’ 3’Se sintetiza la cadena complementaria.

Elongación

Page 77: Tema 11  bases de la genética molecular

ElongaciónLa ARN polimerasa reconoce a los ribo nucleótidos trifosfato entrantes. La ARN polimerasa cataliza la formación del enlace fosfodiéster y se separa un pirofosfato (P-Pi)Se aprovecha la energía desprendida ya que es anabolismo

Page 78: Tema 11  bases de la genética molecular

TerminaciónLa terminación está señalizada por ciertas secuencias del ADN que hacen que la ARN polimerasa se detenga. Estas secuencias forman un bucle al final del ARN. Así se favorece la separación del ARN, el ADN y la ARN polimerasa. El ADN se espiraliza de nuevo.

Page 79: Tema 11  bases de la genética molecular

Terminación

Page 80: Tema 11  bases de la genética molecular

Terminación

En bacterias, con mucha frecuencia, los ARN-m son poligénicos o policistrónicos, de manera que un solo ARN-m contiene información para la síntesis de varios polipéptidos distintos.

Page 81: Tema 11  bases de la genética molecular

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EL PROCESO DE LA TRANSCRIPCIÓN EN

EUCARIOTAS1. INICIO

2. ELONGACIÓN3. TERMINACIÓN

Page 82: Tema 11  bases de la genética molecular

Diferencias con procariotasExisten varias diferencias con procariotas:

Existen tres tipos de ARN-polimerasa. Se necesitan factores de transcripción (que se unen al promotor) para que se pueda unir a ellos la ARN-polimerasa

Page 83: Tema 11  bases de la genética molecular

Los genes están fragmentados por fragmentos sin sentido por lo que el ARN transcrito necesita un proceso de maduración. El ADN está enrollado a histonas formado nucleosomas y tiene que extenderse para transcribirse.Los genes que se transcriben continuamente, están continuamente extendidos.

Diferencias con procariotas

Page 84: Tema 11  bases de la genética molecular

ARN polimerasaExisten tres tipos de ARN polimerasa

ARN polimerasa I, 13 subunidades. Sintetiza subunidad grande de ribosomas (rARN).ARN polimerasa II, 12 subunidades. Sintetiza los precursores de los mARN. ARN polimerasa III, 17 subunidades. Sintetiza la subunidad pequeña de ribosomas rARN) y tARN.

Page 85: Tema 11  bases de la genética molecular

InicioEn eucariotas se necesitan toda una serie de factores de transcripción que ejercen de factores de iniciaciónSe unen a secuencias concretas de ADN (promotor en posición -25 nucleótidos) para reconocer el sitio donde ha de comenzar la transcripción.

Page 86: Tema 11  bases de la genética molecular

InicioUn factor de transcripción es una proteína que regula la transcripción, pero que no forma parte de la ARN polimerasa. Para que se pueda unir el factor de transcripción actúa una helicasa que separa las hebras de ADN en la secuencia del promotor (TATA).

Page 87: Tema 11  bases de la genética molecular

Iniciación Entonces ya se unen los factores

de transcripción permitiendo el acceso de la ARN polimerasa II al molde de ADN.

La ARN polimerasa II tiene como función establecer enlaces fosfodiester entre ribonucleótidos trifosfato.

Una vez que se forma el primer enlace, acaba la etapa de iniciación y comienza así la siguiente etapa

Page 88: Tema 11  bases de la genética molecular

ElongaciónLa ARN polimerasa II cataliza la elongación de cadena del ARN. Se van añadiendo los nucleótidos trifosfato. Para establecer los enlaces fosfodiéster, se desprende un pirofosfato (P-Pi) y se aprovecha la energía desprendida. Básicamente es igual que en procariotas.

Page 89: Tema 11  bases de la genética molecular

TERMINACIÓN

El ARNm que se sintetiza es más largo de lo necesario.Hay señal de corte (AAUAA).Se corta 20 nucleótidos después de dicha señal. El ARN se separa del ADN y de la ARN pol.

89

Page 90: Tema 11  bases de la genética molecular

Procesos postrascripcionales

Adición del casquete CAP

Adición de cola de poli-A

Splicing

Traslado

Acoplamiento

Degradación

Page 91: Tema 11  bases de la genética molecular

Adición del casquete CAPEl CAP es un ribonucleótido modificado de guanina que se añade al extremo 5' de la cadena del ARNm transcrito mediante un enlace fosfodiéster. Es necesario para el proceso normal de traducción del ARN, para mantener su estabilidad y el acceso apropiado del ribosoma.

CAP

Page 92: Tema 11  bases de la genética molecular

Adición de cola poli-A

Secuencia larga de nucleótidos de Adenina (100-200) al extremo 3. Su misión es proteger y facilitar el viaje al citoplasma.

Page 93: Tema 11  bases de la genética molecular

SplicingEn eucariotas el ADN tiene en cada gen intrones y exones:

Los intrones no se traducen a proteína.Los exones sí se traducen.

Ambos se transcriben y aparecen transcritos en el ARNm.Antes de la traducción, es necesario eliminar los intrones que no se van a traducir.

Page 94: Tema 11  bases de la genética molecular

SplicingLa ARN Ligasa pega los trozos (exones) tras la retirada de los intrones

Es el proceso de corte y empalme de ARN. Este proceso es muy común en eucariotas, pudiéndose dar en cualquier tipo de ARN aunque es más común en el ARNm.

Page 95: Tema 11  bases de la genética molecular

AutosplicingCorte y empalme en el que el propio intrón actúa como catalizador en su eliminación, por lo que no se requiere de proteínas enzimáticas. Cuando un fragmento de ARN tiene actividad catalítica se le denomina ribozima.

Page 96: Tema 11  bases de la genética molecular

Splicing Alternativo

Proceso que permite obtener, a partir de un transcrito primario de mARN o pre-ARNm, distintas moléculas de mARN maduras, para la síntesis de diferentes proteínas.

NO

Page 97: Tema 11  bases de la genética molecular

01/05/2023 08:14 p. m.

(+1)

(-25)

Transcripción eucariotas

Page 98: Tema 11  bases de la genética molecular

Transcripción: Diferencias procariotas

eucariotas

Page 99: Tema 11  bases de la genética molecular

ARNm primario o ARNhn (heterogéneo nuclear)

Transcripción procariotas vs eucariotas

Page 100: Tema 11  bases de la genética molecular

La transcripción y la traducción sonprocesos simultáneos.

La transcripción y la traducción noson procesos simultáneos

Transcripción procariotas vs eucariotas

Procariotas Eucariotas

El ARNm es policistrónico: tiene información para más de una proteína y transcribe más de un gen

El ARNm es monocistrónico: tiene información solo para una proteína y solo transcribe un gen

Page 102: Tema 11  bases de la genética molecular

Traducción

Page 103: Tema 11  bases de la genética molecular

TraducciónLa traducción es la transferencia de información de un lenguaje (ácido nucleíco) a otro (proteína).El proceso de traducción sucede en el Citoplasma de la célula una vez que el ARNm sale del núcleo finalizada la transcripción.Se produce en 3 etapas: Iniciación, elongación y terminación.

Page 104: Tema 11  bases de la genética molecular

TraducciónIntervienen dos tipos de enzimas fundamentales:

aminoacil-ARNt-sintetasas: unen los aminoácidos con el correspondiente ARNt. Hay 20 distintas, una para cada aminoácido y su ARNt. peptidil transferasa: es una ribozima aminoacil transferasa que se encarga de la formación de enlaces peptídicos entre aminoácidos adyacentes. Es parte del ARN de los ribosomas.

Page 105: Tema 11  bases de la genética molecular

Código genético

Es el utilizado por los ribosomas para descifrar el ARNm y transformar su lenguaje (nucleótidos) en lenguaje de proteínas (aminoácidos) La combinación formada por un triplete de tres bases (codón) del ARNm dice qué aminoácido se tiene que incorporar a la cadena polipeptídica en crecimiento.

Page 106: Tema 11  bases de la genética molecular

Existe un triplete o codón de inicio de síntesis que determina Metionina (AUG) y tres tripletes o codones de final de síntesis: UAA, UAG, UGA.Se dice que el código es degenerado porque hay más de un triplete para la mayoría de aminoácidos y hay tripletes sin sentido (los de final de síntesis)

Código genético

Page 107: Tema 11  bases de la genética molecular

UNIVERSALCompartido por todos los organismos conocidos incluso los virus.El código ha tenido un solo origen evolutivo.Existen excepciones en las mitocondrias y algunos protozoos.

A excepción de la metionina y el triptófano, cada aminoácido está codificado por más de un codón.Esto es una ventaja ante las mutaciones.

DEGENERADO

Cada codón solo codifica a un aminoácido.

SIN IMPERFECCIÓNLos tripletes se disponen de manera lineal y continua, sin espacios entre ellos y sin compartir bases nitrogenadas

CARECE DE SOLAPAMIENTO

Posibilidad de solapamientoMet Gli Tre His Ala Fen Ala

Met Leu Leu Pro

SolapamientoCodones de iniciación

Código genético

Page 108: Tema 11  bases de la genética molecular

1ª Base2ª Base3ª Base

UCCUCAUCGUCUSer

Ventaja frente a mutaciones

Page 109: Tema 11  bases de la genética molecular

LA SÍNTESIS DE PROTEÍNAS

ARN MENSAJEROAMINOÁCIDOSENZIMAS Y ENERGÍA

SUBUNIDAD PEQUEÑA

SUBUNIDAD GRANDE

SITIO A

SITIO P

AMINOÁCIDO

POLIPÉPTIDO

Don

de s

e si

túa

el

Tienen dos

lugares

Formados por

RIBOSOMAS

Donde se unen los

Donde se une el

Donde se une el EXTREMO 3’

Tiene dos

zonas

ARN DE TRANSFERENCIA

Por donde se une al

ANTICODÓN

AMINOACIL-ARNt -SINTETASA

Como la

necesita

Traducción: necesidades

Page 110: Tema 11  bases de la genética molecular

ARN transferenteEl ARNt tiene cuatro brazos, tres de ellos con un bucle que se enrolla en hélice:

Brazo D por donde se une a la enzima peptidil transferasa del ribosoma. Esta enzima cataliza el enlace peptídico entre los aminoácidos que llegan.Brazo TYC por el que se une al ribosoma.

Page 111: Tema 11  bases de la genética molecular

Brazo anticodón donde se encuentra el triplete complementario del codón del ARNm. De este triplete depende el aminoácido que va a transportar el ARNt.Brazo aceptor: es el que carece de bucle y donde están los extremos 3’ y 5’ del ARN. En su extremo 3’, que es el más largo, hay un triplete CCA a donde se unirá el aminoácido determinado por el anticodón.

ARN transferente

Page 112: Tema 11  bases de la genética molecular

Unión al ribosoma

Unión al codon complementario del ARNm en el ribosoma

NOTA.- EXISTEN TANTOS ARNt como aminoácidos, uno para cada uno, en total 20 clases de ARNt

ARN transferenteSitio de unión

del aminoácido

Anticodón Unión a la peptidil-

transferasa en el

ribosoma

Unión del aminoácido

Triplete de unión: siempre CCA

Brazo D Brazo TYC

Brazo D

Brazo TYC

Anticodón

Estructura terciaria del ARNt

Page 113: Tema 11  bases de la genética molecular

ARN de transferencia activado: cargado con el aminoácido correspondiente

ARN transferente

Page 114: Tema 11  bases de la genética molecular

RibosomasUnión del ARNt con la cadena polipeptídica en formación

Unión del ARNt que llega con el nuevo aminoácido

E

Sitio que ocupa el ARNt que está a punto de irse

Sitio E

Page 115: Tema 11  bases de la genética molecular

Traducción

Activación de aminoácidos. Iniciación. Elongación. Terminación

Page 116: Tema 11  bases de la genética molecular

Activación de los aminoácidos

Consiste en la formación de aminoacil-ARNt (aminoácido unido al ARNt).Se requiere

una enzima Aminoacil-ARNt-sintetasaATP que desprende P-Pi y deja un AMP unido al aminoácido aprovechando la energía desprendida.La energía liberada del ATP al liberar los P-Pi, es la utilizada en la síntesis del aminoacil-ARNt

Page 117: Tema 11  bases de la genética molecular

El aminoácido se une al brazo aceptor del ARNt, a un triplete que siempre es CCA.La enzima Aminoacil-ARNt-sintetasa es específica de cada aminoácido.El aminoácido queda unido al AMP formando el acido aminoaciladenílico y sólo lo libera al unirse al ARNt.Hay 20 ARNt distintos, uno para cada aminoácido.

Activación de los aminoácidos

Page 118: Tema 11  bases de la genética molecular

+ +

+

Aminoacil ARNt -sintetasa

Aminoácido Ácido aminoaciladenílico

ARNtx

Aminoácil -ARNtx

Existen al menos 20 aminoacil-ARNt-sintetasas, una para cada aminoácido. Son enzimas muy específicas

La unión se realiza en el extremo 3’ del ARNt

Activación de aminoácidos

Page 119: Tema 11  bases de la genética molecular

aa

aa

Aminoacil ARNt

sintetasa

ATP

Ácido aminoaciladenílico

aa AMP

PPi

AMPExisten al menos 20 aminoacil-ARNt-sintetasas, una para cada aminoácido. Son enzimas muy específicas

Activación de aminoácidos

Page 120: Tema 11  bases de la genética molecular

IniciaciónComienza cuando la subunidad menor del ribosoma se une al ARNm.Luego el primer ARNt se empareja con el primer codón (AUG) del ARNm llevando siempre el aminoácido correspondiente (metionina).Esta unión se hace en el sitio P del ribosoma.Ahora la subunidad ribosómica mayor se une a la menor, y el ARNm queda encerrado por ambas

Page 121: Tema 11  bases de la genética molecular

ARNt iniciador

Subunidad menor

3’

5’

UA C

5’

3’A

U G

5’3’

E A

Metionina

5’3’

GTPGDP

Iniciación de la síntesis

Iniciación

Page 122: Tema 11  bases de la genética molecular

ElongaciónLlega un segundo ARNt con el aminoácido correspondiente al anticodón complementario del siguiente codón y se sitúa en el sitio A del ribosoma.Se establece el enlace peptídico entre la metionina y este segundo aminoácido.Dicho enlace es catalizado por la peptidil transferasa que es una de las enzimas (ribocimas) que constituyen el ribosoma.

Page 123: Tema 11  bases de la genética molecular

ElongaciónUna vez unidos los aminoácidos, el primer ARNt se suelta de la metionina, quedando el nuevo ARNt con el dipéptido en el sitio AEl ribosoma avanza un codón (translocación ribosomal y el ARNt con el dipéptido pasa al sitio P.El ARNt primero queda en el sitio E, de donde se irá posteriormente.El sitio A queda libre a la espera de otro aminoacil-ARNt

Page 124: Tema 11  bases de la genética molecular

Todo esto requiere energía que cede un GTP.Llega otro ARNt con su aminoácido al sitio A.Se establece el segundo enlace peptídico.De nuevo avanza el ribosoma un codónEl ARNt anterior se va.Y así sucesivamente hasta el final

Elongación

Page 125: Tema 11  bases de la genética molecular

Anticodón

Complementariedad entre

codón y anticodón

GTPGDP

5’3’ 3’

5’ 5’ 5’3’

3’GTPGDP

Enlace peptídico

El aminoácido se traslada al

otro ARNtARNt

AminoácidoSe libera el

ARNt que ha cedido el

aminoácido

Elongación

Page 126: Tema 11  bases de la genética molecular

TerminaciónAl finalizar la secuencia, el ribosoma se encuentra con codones de terminación para los que no hay ARNt (UAA, UAG, UGA).Cuando se llega a estos codones, la traducción se detiene.La cadena polipeptídica (proteína) se desprende.Las subunidades ribosomales y el ARNm se separan.

Page 127: Tema 11  bases de la genética molecular

El codón de finalización puede

ser UAA, UAG o UGA

Último ARNt

Factor de liberació

n

Polipéptido libre

Separación del ARNm y las

subunidades ribosómicas

3’

5’

3’

5’

Terminación

Page 128: Tema 11  bases de la genética molecular

Microfotografía electrónica (MET, falso color) de un

polirribosoma.

Si el ARN a traducir es lo suficientemente largo puede ser leído por más de un ribosoma a la vez, formando un polirribosoma o polisoma.

Ribosoma

Proteína en formación

Poliribosomas o polisomas

Page 130: Tema 11  bases de la genética molecular

Plegamiento de las proteínas.

Las proteínas según se van sintetizando, se van plegando para adquirir las estructuras tridimensionales propias de cada una de ellas.

Estructura primaria.Estructura secundaria.Estructura terciaria.Estructura cuaternaria.

Page 131: Tema 11  bases de la genética molecular

Estructuras Proteicas

Page 132: Tema 11  bases de la genética molecular

Preparación de la proteína.Después de la traducción hay proteínas enzimáticas que ya son activas.Otras necesitan eliminar algunos aminoácidos (generalmente se libera la metionina o aminoácido iniciador)Algunas tienen que unirse a cofactores o coenzimas.

Page 133: Tema 11  bases de la genética molecular

Anaya

Page 134: Tema 11  bases de la genética molecular

AnayaEn el siguiente PowerPoint ya que pertenece al mismo tema.

Page 135: Tema 11  bases de la genética molecular

PAU Cantabria

Page 136: Tema 11  bases de la genética molecular

PAUCon un esquema /dibujo describe el mecanismo mediante el cual las células eucarióticas obtienen un ARN mensajero maduro a partir de ADN. Representa los elementos que intervienen en proceso, así como las funciones de cada uno de ellos en el mismo. Define el concepto de promotor e indica su papel en dicho proceso.Desarrolla un texto de no más de diez líneas en el que se relacionen de manera coherente, dentro de un fenómeno biológico, los siguientes conceptos: polimerasa de ADN, cebador, semiconservativa, fase S del ciclo celular.

Page 137: Tema 11  bases de la genética molecular

Desarrolla un texto de no más de diez líneas en el que se relacionen de manera coherente, los siguientes conceptos: transcripción, polimerasa de ARN, ADN molde, proteína, traducción del mensajero.Desarrolla un texto de no más de diez líneas en el que se relacionen de manera coherente, dentro de un fenómeno biológico, los siguientes conceptos: maduración ARN, intrones, ribosomas, código genético.

PAU

Page 138: Tema 11  bases de la genética molecular

Describe, ayudándote de un dibujo, el mecanismo de la transcripción de un gen eucariótico, indicando los principales elementos moleculares que intervienen en el mismo. ¿Cómo tiene lugar la maduración del producto obtenido para generar el ARNm? ¿En qué lugar de la célula tiene lugar la transcripción?Describe, mediante un dibujo claro, el mecanismo de replicación del material genético indicando en cada etapa los elementos moleculares más importantes así como la posición naturaleza y función del cebador y los carbonos terminales de cada cadena (3’ ó 5’)

PAU

Page 139: Tema 11  bases de la genética molecular

Identifique el proceso biológico (localizado en el citoplasma)

que aparece en la figura e identifique su finalidad, así como dos elementos que componen la

estructura representada.Desarrolla un texto de no más de 10 lineas en el que se relacionen, de manera coherente, los siguientes conceptos: promotor, ARN-polimerasa, maduración del mensajero, gen.

PAU

Page 140: Tema 11  bases de la genética molecular

FIN