UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ - UFPI

CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE – CCS

DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E FARMACOLOGIA

DISCIPLINA: BIOQUÍMICA PARA FARMÁCIA

PROFESSORA: MARIA DAS GRAÇAS CASTELO BRANCO SOARES

RELATÓRIO DA PRÁTICA DE BIOQUÍMICA

REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO DOS LIPÍDIOS

AILSON SILVA LIMA 10S19410

GEÍSA CAROLINA 10S12180

MARCELO PEREIRA 10S20817

MARCELO DUTRA 09S14361

MIGUEL EUSÉBIO 10S20841

TERESINA,

ABRIL DE 2011

RESUMO

Nos experimentos desenvolvidos, as características dos lipídios, foram postas em

evidência a partir de reações de caracterização desses compostos. Foi realizada reação de

saponificação (hidrólise alcalina) para produção de sal de ácidos graxos típicos (Sabão) que

pode ser originado também por redissolução dos ácidos graxos. Esses sais foram separados

por meio de ácido clorídrico concentrado e por injeção de sal (NaCl). Os sabões comuns são

solúveis em água, mas em dada parte pode-se formá-lo com caráter insolúvel em água por

reação não alcalina com certos sais. Levando em conta a propriedade característica dos

lipídios de serem insolúveis em solventes polares pode-se demonstrar sua solubilidade em

solvente apolar como éter e pouca solubilidade em álcool.

INTRODUÇÃO

Os lipídios biológicos constituem um grupo de compostos que, apesar de quimicamente

diferentes entre si, exibem, como característica definidora e comum insolubilidade em água.

As funções biológicas dos lipídios são tão diversas quanto a sua química. Em muitos

organismos, gorduras e óleos são as principais formas de armazenamento de energia.

Fosfolipídios e esteróis são os principais elementos estruturais de membranas biológicas.

Outros lipídios, mesmo quando presentes em quantidades relativamente pequenas, têm papéis

cruciais como co-fatores enzimáticos, transportadores de elétrons, pigmentos que absorvem

radiações luminosas, âncoras hidrofóbicas, agentes emulsificantes, hormônios e mensageiros

intracelulares. (LEHNINGER, 2006).

As gorduras e óleos usados quase universalmente como formas de armazenamento de

energia nos organismos vivos são dos derivados de ácidos graxos. Ácidos graxos são ácidos

carboxílicos com cadeias carbônicas de comprimento entre 4 e 36 carbonos. Em alguns a

cadeia é totalmente saturada e não-ramificada; em outros, a cadeia contém uma ou mais

ligações. Alguns poucos possuem anéis de três carbonos, grupos metila ou hidroxila como

ramificação. (LEHNINGER, 2006).

As propriedades físicas e químicas dos ácidos graxos e dos compostos que os contêm

são principalmente determinadas pelo comprimento e pelo grau de insaturação da cadeia de

hidrocarboneto. A cadeia hidrocarbônica não-polar é responsável pela pequena solubilidade

em água, mas os ácidos graxos são solúveis em solventes apolares como o éter.

(LEHNINGER, 2006).

Os ácidos graxos existentes em óleos ou gorduras podem reagir com uma base forte

(mais comuns de Sódio (Na) ou Potássio (K)) com aquecimento e como produto dessa reação

conhecida como saponificação gera um sabão que é um sal de ácido carboxílico e por possuir

uma longa cadeia carbônica em sua estrutura molecular, ele é capaz de se solubilizar tanto em

meios polares quanto em meios apolares. (LEHNINGER, 2006).

Os lipídios mais simples, construídos a partir de ácidos graxos, são os triacilgliceróis,

também chamados triglicerídeos, gorduras ou gorduras neutras. São compostos de três ácidos

graxos, cada um em ligação éster com o mesmo glicerol. Como as hidroxilas polares do

glicerol e os carboxilatos polares dos ácidos graxos estão unidos em ligações éster, os

triacilgliceróis são moléculas hidrofóbicas, não-polares, essencialmente insolúveis em água.

(LEHNINGER, 2006).

O presente trabalho tem por objetivo demonstrar as reações de caracterização de lipídios

através da hidrólise alcalina de triacilgliceróis com formação do sabão, formação de sabão

“insolúvel”, separação desses sabões e solubilidade dos ácidos graxos em determinados

solventes.

METODOLOGIA

Na primeira etapa da prática de reações de caracterização de lipídios foi realiza a

hidrólise alcalina de triacilgliceróis. Colocou-se em um tubo de ensaio de grosso calibre

(Tubo A), 10g de manteiga, 10ml de solução alcoólica de hidróxido de potássio

5% ,aquecendo esses reagentes em banho-maria 100°C durante 30 minutos.

Na segunda etapa fez-se a separação de ácidos graxos. Adicionou-se ao tubo da reação

A, 1 ml de ácido clorídrico concentrado, gota a gota, sob agitação. Colocou-se novamente em

banho-maria até separação de uma camada oleosa na superfície do líquido. Posteriormente os

tubos foram esfriados em água corrente e a seguir em banho de gelo.

A terceira etapa foi marcada pelo teste de solubilidade dos ácidos graxos, obtidos na

segunda etapa, em tais solventes: éter, álcool etílico e água destilada. Nessa experiência foi

retirada uma alíquota de ácidos graxos, obtidos na etapa anterior e foi distribuída a três tubos

de ensaio (A, B, C), em seguida adicionou-se a cada um desses tubos, 1 ml de éter, 1 ml de

água destilada, 1 ml de álcool etílico, respectivamente.

Na quarta etapa foi verificada a formação de “sabões” por redissoluçao de ácidos

graxos. Adicionou-se ao tubo da segunda experiência, 10 ml de água destilada e 6 ml de

solução de KOH 0,5 N e foi colocado em banho-maria 100°C durante 5 minutos.

Na quinta etapa da prática foi realizada a separação de “sabões” por salinificação.

Colocou-se numa proveta 3 ml da soluções de “sabões” obitidos na etapa

anterior.Acrescentou-se água destilada até 20 ml e adicionou-se cloreto de sódio em espécie

agitando com o bastão.

Finalmente na quinta etapa foi verificada a formação de “sabões” insolúveis. Preparou-

se dois tubos de ensaio, (A, B) contendo, respectivamente, 2 ml da solução de “sabão” obtido

na quarta etapa da prática + 3 gotas da solução de cloreto de cálcio 5% e 2 ml da solução de

“sabão” obtido na quarta etapa + 3 gotas de solução de acetato de chumbo 5%.

DISCUSSÃO

Hidrólise alcalina dos triacilglicerois

“Quando a hidrólise é realizada em meio fortemente alcalino, haverá liberação de

glicerol e os respectivos sais de ácidos graxos. Os sais metálicos dos ácidos graxos, em

contraste com os ácidos graxos livres, são solúveis em água e são chamados se “sabões”. O

processo de hidrólise alcalina é chamado de saponificação” (CHAVES FILHO, 1989). Esta

parte inicial do experimento consistiu em adicionar a um tubo de ensaio de grosso calibre

(Tubo A), 10g de manteiga, 10 ml de solução alcoólica de hidróxido de potássio (KOH) 5%.

A reação foi realizada à quente. A hidrólise dos triacilglicerois foi evidenciada a partir da

observação da solubilidade de uma alíquota da mistura formada em água.

Separação dos ácidos graxos

A separação dos ácidos graxos a partir de uma reação de dupla-troca entre o ácido

clorídrico e um carboxilato formando um sal inorgânico e o ácido graxo. Esta reação foi

executada utilizando a solução obtida na experiência anterior. Foi adicionado ao tubo A 1 ml

de ácido clorídrico concentrado, gota a gota, sob agitação e colocado em banho-maria a

100°C. Após o resfriamento do tubo A observou-se que a solução apresentava duas fases, uma

sólida flutuante e uma líquida. A fase sólida era formada por ácidos graxos.

Solubilidade dos solventes

Segundo Chaves Filho (1989), ácidos graxos são ácidos presentes em quase todos os

tipos de lipídios. De um modo geral são monocaboxílicos e de número par de átomos de

carbono. Possuem uma cadeia hidrocarbonada (apolar, hidrofóbica) e um grupo carboxílico

(polar hidrofílico). A solubilidade destes ácidos orgânicos em solventes polares depende do

tamanho da cadeia hidrocarbonada. Diante disso os ácidos graxos obtidos no experimento

anterior fora distribuídos em três tubos contendo solventes diferentes. No tubo A que continha

1 ml de éter os ácidos graxos solubilizaram completamente, pois o éter é apolar; No tubo B

que continha 1ml de água destilada os ácidos graxos não dissolveram, pois este solvente é

polar; No tubo C que continha 1 ml de álcool os ácidos graxos solveram completamente.

Formação de “sabões” por redissolução dos ácidos graxos

Nesta etapa foi adicionado ao tubo da segunda experiência, 10 ml de água destilada e 6

ml de hidróxido de potássio(KOH) 0,5 N. Após retirar-se o tubo do banho-maria e agitá-lo,

observou-se a presença de espuma na superfície da solução, fato que evidencia a ocorrência

da reação.

Separação dos sabões por salificação

Esta etapa da prática consistiu em saturar a solução de sabões do experimento acima

utilizando eletrófilos fortes (NaCl), para separar os sabões da solução. Procedeu-se

inicialmente adicionando 20 ml de água destilada e cloreto de sódio (NaCl) em espécie e

agitando com o bastão até saturação. Observou-se após agitação a presença de corpo de

fundo, pois o sal adicionado ultrapassou o coeficiente de solubilidade da água. Já os sabões

formavam um faze bem definida na superfície da solução.

Formação de sabões insolúveis

A formação de carboxilatos insolúveis ocorre a partir de reações de dupla-troca entre

sabões e sais como cloreto de cálcio (CaCl2) e acetato de chumbo(CH3COO)2Pb. Neste

experimento foram utilizados dois tubos (A, B), cada um contendo 2 ml de solução de

“sabão” obtida no experimento quatro.

Tubo A: 2R-COOK + CaCl (R-COO)2Ca + 2KCl

Tubo B: 2R-COOK + (CH3COO)2Pb (R-COO)2Pb + 2CH3COOK

RESULTADOS

TABELA 1.0: HIDRÓLISE ALCALINA DOS TRIACILGLICERÓIS. TERESINA, 2010.

SOLUÇÃO TEMPO FORMAÇÃO DO SABÃO

MANTEIGA + SOLUÇÃO

ALCOÓLICA DE

HIRÓXIDO DE POTÁSSIO

30 MIN SIM

FONTE: LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA-UFPI, ALUNOS DE FARMÁCIA, 2010.1

TABELA 2.0: SEPARAÇÃO DOS ÁCIDOS GRAXOS. TERESINA, 2010.

TUBO SOLUÇÃO OBSERVOU-SE

DA REAÇÃO 1.0 SABÃO + ÁCIDO CLORÍDRICO

CONCENTRADO

UMA CAMADA

SÓLIDA E UMA

OLEOSA

FONTE: LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA-UFPI, ALUNOS DE FARMÁCIA, 2010.1

TABELA 3.0 : SOLUBILIDADE DOS SOLVENTES. TERESINA, 2010.

TUBO SOLUÇÃO SOLUBILIDADE

A ÁC. GRAXOS + ÉTER SOLÚVEL

FONTE: LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA-UFPI, ALUNOS DE FARMÁCIA, 2010.1

TABELA 3.0 : SOLUBILIDADE DOS SOLVENTES. TERESINA, 2010.

B ÁC. GRAXOS + ÁGUA

DESTILADA

INSOLÚVEL

C ÁC. GRAXOS + ÁLCOOL

ETÍLICO

POUCO SOLÚVEL

FONTE: LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA-UFPI, ALUNOS DE FARMÁCIA, 2010.1

TABELA 4.0: FORMAÇÃO DE “SABÕES” POR REDISSOLUÇÃO DOS ÁCIDOS

GRAXOS. TERESINA, 2010.

SOLUÇÃO TEMPO OBSERVOU-SE

TUBO DA REAÇÃO 2.0 +

ÁGUA DESTILADA +

KOH

5 MIN FORMAÇÃO DE UM

SÓLIDO

FONTE: LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA-UFPI, ALUNOS DE FARMÁCIA, 2010.1

TABELA 5.0: SEPARAÇÃO DOS “SABÕES” POR SALIFICAÇÃO. TERESINA, 2010.

SOLUÇÃO OBSERVOU-SE

DA REAÇÃO 4.0 + ÁGUA

DESTILADA + CLORETO

DE SÓDIO

PRECIPITAÇÃO DE NaCl

FONTE: LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA-UFPI, ALUNOS DE FARMÁCIA, 2010.1

TABELA 6.0: FORMAÇÃO DE SABÕES INSOLÚVEIS. TERESINA, 2010.

TUBO SOLUÇÃO OBSERVOU-SE

A REAÇÃO 4.0 + CaCl2 UM PRECIPITADO

FONTE: LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA-UFPI, ALUNOS DE FARMÁCIA, 2010.1

TABELA 6.0: FORMAÇÃO DE SABÕES INSOLÚVEIS. TERESINA, 2010

B REAÇÃO 4.0 + ACETATO

DE CHUMBO

UM PRECIPITADO

FONTE: LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA-UFPI, ALUNOS DE FARMÁCIA, 2010.1

CONCLUSÃO

Através da prática de reações de caracterização dos lipídios podemos identificar as

propriedades físicas (como solubilidade) e químicas (reatividades e separações) características

desses compostos. Com a hidrólise alcalina dos triacilgliceróis ocorreu formação de sabão

(saponificação) que pode ser separado por ácido clorídrico concentrado ou por salificação.

Esses ácidos graxos após a separação podem retornar a formar sabão através da redissolução

com outra base. Ainda também ocorreu formação de um sabão “insolúvel” através de reação

não alcalina.

REFERÊNCIAS

CHAVES FILHO, Manoel. Apostila de bioquímica. Teresina: UFPI, 89. p. 36-60.

NELSON, David L.; COX, Michael M. Princípios de bioquímica. 4ª ed. São Paulo: Sarvier,

2006.p. 236.