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ESCOLA DE ENGENHARIA DE LORENA - USP CURSO ENGENHARIA BIOQUÍMICA DISCIPLINA MICROBIOLOGIA - 2015 AULA 1 - PROTEOBACTÉRIA Profa. Dra. Bernadete de Medeiros

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ESCOLA DE ENGENHARIA DE LORENA - USP

CURSO ENGENHARIA BIOQUÍMICA

DISCIPLINA MICROBIOLOGIA - 2015

AULA 1 - PROTEOBACTÉRIA

Profa. Dra. Bernadete de

Medeiros

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RELAÇÃO EVOLUCIONARIA ENTRE OS

ORGANISMOS

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TEORIA ENDOSSIMBIÓTICA - Lynn Margulis

Bactérias simbiontes Agrobacterium e Rhizobium

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NA CELULA A MITOCONDRIA É UMA ORGANELA

AUTONOMA PORQUE POSSUI DNA E RIBOSSOMO

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Nas bactérias a membrana citoplasmática é o

locus do transporte de elétrons e síntese de ATP

Bacillus megaterium e Nitrococcus

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COLORAÇÃO DE GRAM.

MÉTODO IDEALIZADO POR

HANS CHRISTIAN GRAM

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COLORAÇÃO DE GRAM

• 1884→O MÉDICO DINAMARQUÊS HANS CRISTIAN

GRAM ELABOROU UM MÉTODO DE COLORAÇÃO DE

CELULAS BACTERIANAS.

• DEFINIU A CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIAS EM DOIS

GRANDES GRUPOS DE ACORDO COM A CAPACIDADE

DA PAREDE CELULAR DA BACTERIA RETER UM DOS

CORANTES.

• AS BACTÉRIAS FORAM CLASSIFICADAS EM GRAM

POSITIVAS OU GRAM NEGATIVAS.

• ATUALMENTE É O MÉTODO MAIS UTILIZADO NA

BACTERIOLOGIA

• ATENÇÃO: AS MICOBACTÉRIAS NÃO SE CORAM PELO

MÉTODO DE GRAM.

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COLORAÇÃO DE GRAM

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BACTERIAS GRAM POSITIVAS OU

GRAM NEGATIVAS

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PAREDES CELULAR DE BACTÉRIAS GRAM

POSITIVA E GRAM NEGATIVA

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BIODIVERSIDADE DOS

MICRORGANISMOS NO

PLANETA TERRA

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• Aproximadamente 5x1030 bactérias

aeróbias ou anaeróbias estão na Terra. A

sua origem data de 3,8 bilhões de anos.

• As bactérias podem viver em diferentes

ecossistemas da Terra como o solo, nos

oceanos, nas profundezas de rochas, no

gelo do Ártico, na água fervente dos

glêiseres,como as fontes hidrotermais

submarinas, na pele e mucosas do corpo

humano.

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• A quantidade de bactérias aeróbias por

centímetro quadrado de pele humana é de 10

mil células. A relação entre número de células

bacterianas e do corpo humano é de dez para

um.

• O número de bactérias em uma colher de chá

de solo de jardim é cerca de 1 trilhão, com

aproximadamente 10 mil espécies diferentes.

• Atualmente, somente 0,1% dos microrganismos

do planeta tem sido classificados.

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ESTROMATÓLITOS SÃO MASSAS MICROBIANAS

FOSSILIZADAS FORMADAS POR CAMADAS DE

PROCARIOTOS FILAMENTOSOS FORMANDO UM

SEDIMENTO COMPACTO.

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CÂMARA DE ANAROBIOSE PARA CULTIVO

DE BACTÉRIAS ANAERÓBIAS.

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FOTOSSÍNTESE

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FOTOSSÍNTESE • Cornelius Van Niel postulou que a fotossíntese das

plantas e das bactérias são processos semelhantes. O que difere é o doador de hidrogênio para a assimilação redutora do dióxido de carbono:

• EQUAÇÃO GERAL DA FOTOSSÍNTESE

• 2 H2D + CO2 ----- (CH2O) + H2O + 2D

luz carboidrato

• fóton espectro da luz visível (400-700 nm)

• H2D simboliza o doador de hidrogênio que pode ser: sulfeto de hidrogênio, lactato ou água.

• D = a fórmula oxidada do doador de hidrogênio

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FOTOSSÍNTESE NÃO-OXIGÊNICA

• não produz oxigênio molecular na conversão da energia luminosa em energia química.

• A fotossíntese começou nas bactérias anaeróbicas estritas que habitavam a terra há 3,0 bilhões de anos.

2 LACTATO + CO2 ----- (CH2O) + H2O + 2 PIRUVATO

luz carboidrato

• Bactérias verde não sulfurosas, como Rhodospirillum e Rhodopseudomonas o doador de hidrogênio é uma molécula orgânica: o ácido lático ou etanol.

2 H2S + CO2 ----- (CH2O) + H2O + 2S

luz carboidrato produção de enxofre

origem das minas de enxofre

H2S = Sulfeto de hidrogênio é um gás venenoso e mal cheiroso.

• Bactérias fototróficas verdes sulfurosas

• Fotossíntese na ausência do oxigênio (anaeróbios estritos)

• Gêneros: Chlorobium e Chromatium

• As bactérias podem excretar o S ou reter no citoplasma como enxofre basal. São classificadas como bactérias sulfurosas

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FONTE HIDROTERMAL RICA EM ENXOFRE NO

PARQUE NACIONAL DE YELLOWSTONE

• FONTE TERMAL RICA EM

ENXOFRE CONTENDO UMA

DENSA POPULAÇÃO DE

Sulfolobus. A ACIDEZ DO

SISTEMA É DEVIDO A

OXIDAÇÃO DE H2S E S0 A

H2SO4

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MINA DE ENXOFRE EM UBERABA - MG

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FOTOSSÍNTESE COM PRODUÇÃO DE OXIGÊNIO

• H2O + CO2 ----- (CH2O) + O2

• luz carboidrato

• plantas superiores, algas e cianobactérias que contém clorofila a

• Fotólise da água.(quebra da molécula da água pela luz)

12H2O + 6CO2 C6H12O6 + 6O2 + 6H2O + energia

( G0 = + 686 Kcal.mol )

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TAXONOMIA É A ARTE DE

CLASSIFICAR

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RNA ribossomal

• A árvore filogenética da vida é definida a

partir da comparação entre a sequência

dos nucleotídeos do RNA ribossomal.

• BACTÉRIA e ARCHAEA são compostos

por células procarióticas enquanto que

EUKARYA são eucariotos

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TÉCNICAS UTILIZADAS PARA

ANÁLISE DO RNA ribossomal

FRAÇÃO 16S

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TÉCNICAS APLICADAS PARA OBTENÇÃO DE

HOMOGENEIZADO CELULAR E SEPARAÇÃO POR

CENTRIFUGAÇÃO DAS ORGANELAS

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Composição dos Ribossomos

das células procarioto

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RNA DA MENOR SUBUNIDADE DO

RIBOSSOMO PROCARIOTO ( rRNA 16S )

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DOMÍNIO Archaea

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• Estas cores são devidas à existência de

biofilmes de bactérias hipertermófílas. A

área em azul contém água a 980C e as

regiões que vão do verde ao laranja são

onde crescem as bactérias.

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PROSPECÇÃO DA ARCHAEA

• MICROBIÓLOGOS COLETANDO AMOSTRAS PARA

ISOLAR ARCHAEA

• AMOSTRAS DA FONTE HIDROTERMAL NO PARQUE

YELLOWSTONE E DO GELO DO MAR ANTÁRTICO.

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PRESENÇA DE ARCHAEA OU EXTREMOPHILES

EM DIFERENTES AMBIENTES

• HALÓFILOS DE SALINAS • HIPERTERMÓFILOS ISOLADOS DE SALINAS E DOS

RESÍDUOS ORIGINADOS DA EVAPORAÇÃO DAS

FONTES TERMAIS.

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ARVORE FILOGENÉTICA DAS

PRINCIPAIS LINHAGENS DE BACTÉRIA

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PROTEOBACTERIA

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CARACTERÍSTICAS DAS PROTEOBACTÉRIAS

• Com base na sequência dos genes dos RNAr

fração 16s, as Proteobactérias estão divididas em

cinco classes; alpha, beta, gamma, delta e épsilon

Proteobactérias.

• São de interesse nas áreas de saúde,

biotecnologia e agrícola.

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FILOGENIA DAS PROTEOBACTÉRIAS

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Características das Proteobactéria 1

• É o maior Phylum do domínio Bactéria com 384

gêneros e 1 300 espécies.

• Todas as bactérias são GRAM-NEGATIVAS.

• Quanto aos mecanismos de obtenção de

energia são quimiolitotróficos, fototróficos e

quimiorganotróficos.

• Quanto a fisiologia são anaeróbio, microaerófilo

e anaeróbio facultativo.

• As células apresentam morfologia de cocos,

bacilo, espirilo e bactérias apendiculadas.

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Arranjos das células com a forma de cocos e bacilos

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Opções metabólicas para obtenção de energia

das proteobactérias.

Mecanismos quimiolitotróficos, fototróficos e

quimiorganotróficos

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PROCARIOTOS

QUIMIOLITOTRÓFICOS.

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MANUAL DE BERGEY DE

SISTEMÁTICA DE BACTÉRIA

PROPORCIONA

INFORMAÇÕES PARA

IDENTIFICAR E CLASSIFICAR

AS BACTÉRIAS

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Bergey´s Manual of Systematic Bacteriology

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Manual de Bergey e os Procariotos

• O Manual de Bergey descreve as principais

propriedades taxionômicas dos procariotos

BACTERIA E ARCHAEA

• Com informações quanto a sequência do RNA

ribossomal e da taxonomia clássica.

• O conjunto das duas publicações oferecem aos

microbiologistas os fundamentos, os detalhes

da taxonomia e da filogenia microbianas.

• As duas publicações são referências para

taxonomistas na caracterização de novas

linhagens de procariótos isolados.

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Relação filogenética das α-proteobacteria.

Com destaque a Agrobacterium

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β-proteobacteria Nitrosomonas eThiobacillus

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Reação quimiolitotróficas de algumas β-

proteobacteria: Nitrosomonas e Thiobacillus

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Proteobacteria e Corrosão microbiana

As bactérias do gênero Thiobacillus oxida o enxofre a sulfato e como

consequência há produção de ácido sulfúrico, que funciona como agente

corrosivo.

Algumas bactérias metabolizam sulfetos solúveis quando a concentração

de H2S é inferior a 200 ppm. Essas bactérias convertem sulfatos (SO42-) para

sulfetos (S2-) e sulfetos para enxofre (S) (GENTIL, 2007).

As principais espécies envolvidas no processo de oxidação do enxofre

são Thiobacillus ferrooxidans, Thiobacillus thioparus, Thiobacillus thiooxidans, e

Thiobacillus concretivorus.

São bactérias aeróbias e autotróficas e obtém energia da oxidação de

compostos inorgânicos:

2 S + 3 O2 + 2 H2O 2 H2SO4

No caso de utilizar o gás sulfídrico ou ácido sulfídrico, tem-se:

2 H2S + 2 O2 H2S2O3 + H2O

5 H2S2O3 + 4 O2 + H2O 6 H2SO4 + 4 S

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Biolixiviação de ouro

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Lixiviação de minério com baixo concentração de ouro

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LIXIVIAÇÃO BACTERIANA DE MINERAIS

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γ- proteobácteria

Chromatium, Eschericia, Xantomonas,

Pseudomonas

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Sistema membranoso de γ-proteobacteria

fototrófico Ectothiorhodospira

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γ- proteobacteria

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Carcterísticas de alguns generos do

grupo γ-proteobacteria

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γ- proteobácteria: gênero Pseudomonas

pigmento: pyocyanea

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γ- proteobacteria: Chromatium

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γ- proteobácteria: Chromatium

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γ- proteobacteria: Chromatium