princípios básicos da oximetria de alta resolução
DESCRIPTION
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA Métodos Analíticos em Bioquímica Prof. Alcir Dafré. Princípios Básicos da Oximetria de Alta Resolução. Paulo Silveira Roberta Martins Orientadora: Alexandra Latini. Respiração Mitocondrial. - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
Princípios Básicos da Oximetria de Alta Resolução
Paulo Silveira
Roberta Martins
Orientadora: Alexandra Latini
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINADEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICAMétodos Analíticos em Bioquímica
Prof. Alcir Dafré
Respiração Mitocondrial
Substratos para Respiração Mitocondrial
Transporte de Substratos
Inibidores para Respiração Mitocondrial
Oxímetro
Oxygraph-2k(Oroborus Instruments)
Aula PráticaAmostra: Concentrado de Mitocôndrias de Fígado de Ratos
Técnica:
Reagentes
10µl de piruvato + 10 µl de malato 2mM
25 µl ADP 0,25M4 µl Rotenona 1mM
20 µl Succinato25 µl ADP 0,25M
5 µl Cianeto
Reagentes Consumo de Oxigênio (Marks Statistics)
10µl de piruvato + 10 µl de malato 2mM
25 µl ADP 0,25M 4 µl Rotenona 1mM
20 µl Succinato 25 µl ADP 0,25M 5 µl Citocromo C
Resultados Aula Prática
Estágio III: Quantidade de Oxigênio consumido na presença de substratos e ADP.
Estágio IV: Quantidade de Oxigênio consumido após a exaustão dos substratos e ADP.
Controle Respiratório (RCR):
RCR ADP/Pir+Mal = RCR ADP/Succinato=
Resultados Aula Prática