Princípios Básicos da Oximetria de Alta Resolução
Paulo Silveira
Roberta Martins
Orientadora: Alexandra Latini
UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINADEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICAMétodos Analíticos em Bioquímica
Prof. Alcir Dafré
Respiração Mitocondrial
Substratos para Respiração Mitocondrial
Transporte de Substratos
Inibidores para Respiração Mitocondrial
Oxímetro
Oxygraph-2k(Oroborus Instruments)
Aula PráticaAmostra: Concentrado de Mitocôndrias de Fígado de Ratos
Técnica:
Reagentes
10µl de piruvato + 10 µl de malato 2mM
25 µl ADP 0,25M4 µl Rotenona 1mM
20 µl Succinato25 µl ADP 0,25M
5 µl Cianeto
Reagentes Consumo de Oxigênio (Marks Statistics)
10µl de piruvato + 10 µl de malato 2mM
25 µl ADP 0,25M 4 µl Rotenona 1mM
20 µl Succinato 25 µl ADP 0,25M 5 µl Citocromo C
Resultados Aula Prática
Estágio III: Quantidade de Oxigênio consumido na presença de substratos e ADP.
Estágio IV: Quantidade de Oxigênio consumido após a exaustão dos substratos e ADP.
Controle Respiratório (RCR):
RCR ADP/Pir+Mal = RCR ADP/Succinato=
Resultados Aula Prática
