Em Abril de 1953, James Watson e Francis Crick propuseram “uma estrutura para o ADN” com características novas que, na sua opinião, possuíam “um considerável interesse biológico”. Num pequeno artigo que ocupava apenas uma página da Nature, anunciaram assim à comunidade científica uma das descobertas mais importantes da História da Medicina.

Nuno Correia 09/10

Sendo verdade que ninguém pôs em causa a autoria desta descoberta, a partilha do Prémio Nobel com um terceiro cientista, Maurice Wilkins, constitui só por si razão para aguçar curiosidades em relação àquilo que realmente se passou.

Nuno Correia 09/10

... não só é importante glorificar quem ganhou o “ouro”, como é também imperioso conhecer os nomes daqueles que estiveram perto de o ganhar e que merecem, por isso, um lugar no pódio...

Nuno Correia 09/10

Nuno Correia 09/10

O fluxo da informação genética faz-se do DNA para o RNA (transcrição)

e do mRNA para as proteínas (tradução)

Excepções!!!!

Information cannot flow out of proteins. DNA and RNA

are informationally equivalent, but the form of

information in proteins is quite different. Information can

be translated from the nucleic acid form to the protein

form. However, we do not know (and cannot conceive

??) the reverse process.

Crick, F., in Nature, 227:561-563 (1970)

Em 1961, MarshallNirenberg e os seus colaboradores, tendoem conta o "DogmaCentral", bem como ahipótese de o códigogenético assentar em tripletos, levaram a cabo uma série de experiências no sentido de decifrar o código genético.

Nuno Correia 09/10

Nobel de Fisiologia/Medicina de 1968

Nuno Correia 09/10

Como são constituídos os tripletos de RNA utilizados por estes investigadores?

Em cada um dos casos, cada tripleto é constituído apenas porum tipo de nucleótido. No primeiro caso, ostripletos são constituídospor 3 uracilos.

Nos restantes dois casos, por 3 adeninas e por 3 citosinas, respectivamente.

Nuno Correia 09/10

Como são formados os péptidos sintetizados a partir de RNA poli-U, poli-A e poli-C, respectivamente?

Os péptidos sintetizados a partir de mRNA poli-U são formados, exclusivamente, por um tipo de aminoácidos -fenilalanina.

Por sua vez, quando o mRNA é poli-A, o polipéptido é formadoapenas por aminoácidos lisina. E no caso de o mRNA ser poli-C, o péptido apresenta somente aminoácidos prolina.

Nuno Correia 09/10

Quais os codões que intervêm na experiência de Khorana?

Nuno Correia 09/10

Escreva a sequência denucleótidos da cadeiade DNA que serviu demolde a esses codões.

Foi possivel relacionar os codões com os aminoácidos que vão constituir a cadeia polipeptídica.

Nuno Correia 09/10

Extracção de DNA daBanana e do Kiwi

Discussão de Relatórios

Nuno Correia 09/10

O DNA é uma biomolécula existente em todos os

seres vivos (também em alguns vírus), que codifica a

informação necessária à constituição dos organismos.

Nas células eucarióticas de plantas, fungos e animais,

o DNA encontra-se no núcleo.

A extracção e análise de DNA é uma técnica

laboratorial muito utilizada na investigação científica e

em diversos estudos taxonómicos e forenses (testes

de paternidade e identificação de indivíduos).

A extracção de DNA de frutos consiste na destruição

dos tecidos e na separação dos fragmentos celulares

por filtração.

A extracção de DNA completa-se adicionando etanol

frio, que provoca a sua precipitação.

Nuno Correia 09/10

O sal proporciona um ambiente favorável para o processo de extração pois contribui com iões positivos (NA+) que neutralizam a carga negativa do DNA

Nuno Correia 09/10

Maceração

Nuno Correia 09/10

As enzimas presentes no detergente desestruturam as moléculas de lipídios presentes nas membranas celulares

Nuno Correia 09/10

O DNA é insolúvel em álcool e deste modo se separa da solução. O DNA tem também menor densidade que os outros constituintes celulares, por isso surge na superfície da solução

Nuno Correia 09/10

A estrutura de duplahélice só pode servisualizada de modo indirecto e através de aparelhos sofisticados.

O que é observado são milhares de fitas de DNA juntas

Nuno Correia 09/10

as regras de Chargaff; o diâmetro constante do DNA; o facto de no DNA, molécula viscosa, a viscosidade

diminuir quando é sujeita a aquecimento, sabendo que este mesmo método destrói ligações por pontes de hidrogénio;

o facto de a uma maior quantidade de guanina, numa molécula de DNA, corresponder uma maior quantidade de energia necessária para separar as duas cadeias.

Estabeleça uma relação entre a posição ocupada pelas bases azotadas na molécula de DNA e o seucarácter hidrofóbico.

Nuno Correia 09/10

Apresente uma justificação para:

As regras estabelecidas porChargaff são justificadas pela composição do DNA em cadeia dupla.

Verifica-se que existe complementaridade de bases; isto é, se numa cadeia, estiveruma determinada base, nacadeia oposta estará a base complementar.

Justifica-se assim que o número de A = T e o número de C = G; logo, o número de bases púricas será igual ao de bases pirimídicas.

Nuno Correia 09/10

O DNA mantém um diâmetro constante, dado que uma base deduplo anel (púrica) emparelha sempre com uma base de anel simples (pirimídica). Só desta forma se conseguemanter um diâmetro igual em toda a extensãoda molécula.

Nuno Correia 09/10

Quando sujeito a aquecimento, o DNA perde viscosidade, dadoque o aquecimento destrói as ligações por pontes de hidrogénio, presentes na moléculade DNA e que sãoresponsáveis pelaligação entre as duascadeias que o constituem.

Nuno Correia 09/10

Para separar as cadeias, épreciso gastar energia paradestruir ligações por pontes de hidrogénio.

Considerando que o par adenina-timina se encontra unido por duas ligações e o par guanina-citosina por três ligações, énatural que, quanto maior for a percentagem de guaninas, maior será onúmero de ligações aromper.

Nuno Correia 09/10

As bases azotadas têmnatureza hidrofóbica, peloque tendem a isolar-se de meios aquosos, como o conteúdo celular em que oDNA se integra. Por estarazão, ocupam uma posiçãoprotegida na molécula - ointerior da mesma.

Nuno Correia 09/10

Soluções de DNA, em pH = 7,0 e temperatura ambiente, são altamente viscosas; A altas temperaturas ou pH extremos o DNA sofre desnaturação, isto porque

ocorre ruptura das pontes de hidrogénio entre os pares de bases. Esta desnaturação faz com que diminua a viscosidade da solução de DNA;

Durante a desnaturação nenhuma ligação covalente é desfeita, ficando portanto as duas fitas de DNA separadas;

Quando o pH e a temperatura voltam ao normal, as duas fitas de DNA espontaneamente enrolam-se formando novamente o DNA dupla fita.

Nuno Correia 09/10

Nuno Correia 09/10

... Watson e Crick eram ambiciosos e inteligentes. Anteciparam-se para não serem ultrapassados. A estrutura do ADN que propuseram possuía potencialidades cuja extensão eles próprios não podiam suspeitar na altura, e provocou uma revolução na biologia molecular e na genética...

Nuno Correia 09/10