OBJETIVOS

• Descrever base estrutural dos anticorpos

• Demostrar como ocorre sua produção

• Compreender suas funções

• Aplicação prática

IMUNIDADE HUMORAL-ANTICORPOS-

CARACTERÍSTICAS:

- Glicoproteínas solúveis produzidas por linfócitos B e células

plasmáticas após a estimulação com uma macromolécula (antígeno).

- Têm a capacidade de se ligar ao antígeno, pertencem a um grupo de

grandes polipeptídeos chamados imunoglobulinas (separação

eletroforética).

- Molécula com uma forma semelhante à letra Y.

- Interação Ag – Ac se dá através de forças não covalentes (ligações de

hidrogênio, atração eletrostática e força de van der Waals).

Glicoproteinas

Immune serum

Ag adsorbed serum

1 2

+

albumina

globulinas

Mobilidade

Am

oun

t of

pro

tein

ANTICORPOS - COMPOSIÇÃO

• Ac são compostos de polipeptïdeos com regiões:

• REGIÃO VARIÁVEL ( Fab)

• REGIÃO CONSTANTE ( Fc)

• CADEIAS PESADAS

• CADEIAS LEVES

- Conteúdo de carboidrato: 2 – 12%

- Ligações dissulfeto

- Domínios (numerados de acordo com a cadeia).

2 leves (L): 23 kDa

2 pesadas (H): 50 – 80 kDa

ESTRUTURA:

- Massa 150 – 200 kDa

- 4 cadeias polipeptídicas

- 2 tipos alternativos de cadeia leve:

- 5 tipos alternativos de cadeia pesada:

- Cada cadeia tem segmentos relativamente estáveis ou constantes (C), que controlam as funções efetoras da molécula.

- Há também uma zona na qual a sequência de aminoácidos varia

enormemente: regiões variáveis (V).

Tratamentos enzimáticos

podem clivar a molécula de

imunoglobulina:

Papaína: 3 fragmentos (2 Fab,

1Fc).

Pepsina: 2 fragmentos Fab.

ESTRUTURA:

A imunoglobulina pode ainda ser dividida em duas porções:

Fab: onde ocorre a ligação com

o Ag.

Fc: cristalizável.

VARIABILIDADE E HIPERVARIABILIDADE NOS ANTICORPOS

Algumas áreas da molécula de imunoglobulina possuem as mesmas seqüências de aminoácidos, ou seqüências similares, em outras há um pico

de variação na escolha dos aa.

- As regiões de variabilidade (3 em cada cadeia leve e pesada) são denominadas: regiões hipervariáveis ou determinantes de complementaridade (CDRs).

SÍTIO LIGAÇÃO Ag

• FORMADO REGIÕES HIPERVARIÁVEIS

• HIPERVARÁVEL - CDR

( regiões determinantes de complementaridade)

CLASSES IMUNOGLOBULINASIGA- IGG- IGM- IGD- IGE

SÍTIO LIGAÇÃO Ag

• VARIAM NA FORMA

• VARIAM PROPRIEDADES FÍSICAS• baseados em forças não covalentes• NEM TODOS OS CDR FAZEM CONTATO COM

Ag

EPÍTOPOS• LINEARES E CONFORMACIONAIS

EXEMPLO PRÁTICO

• ANTICORPOS MONOCLONAIS

GERAÇÃO DIVERSIDADE DAS IG NAS CÉLULAS

• COMO É POSSIVEL UM NÚMERO TÃO GRANDE DE ANTICORPOS SEJA CODIFICADO PELOS NOSSOS GENES?

IGMPropriedades:• primeiro Ac produzido• pentâmero• resposta primária (baixa afinidade)• região constante reage complemento• Sintetizada à partir do 5 meses de vida fetal• Não neutraliza vírus ou toxinas• * Níveis elevados de IgM normalmente indicam uma

infecção recente ou uma exposição recente do Ag

IGG

Propriedades– Mais abundante (10g/l);

– 3 domínios constantes na cadeia H;

– Monômero: 4 subclasses;

– Principal Ig dos espaços extravasculares

– Transferência placentária –

– Fixa Complemento

– Opsonina

– Neutraliza toxinas

– Neutraliza vírus

IGA• Propriedades

– 2ª mais abundante no soro (monomerica)– Ocorre como monômero e como dímero (2 mol. unidas por

um peptídeo)– Principal Ig secretada para superfícies externas (mucosas)

• Lágrimas, saliva, suco gástrico e secreções pulmonares– Não fixa Complemento– Neutraliza vírus– Bactericida contra Gram-negativas, na presença de lisozima

• Propriedades– Monômero longo com 4 domínios CH– Baixa concentração no soro

• Liga via porção Fc em basófilos e mastócitos (Não requer a presença do antígeno para se ligar)

– Indivíduos saudáveis, os níveis de IgE são baixos (mg/l)– Reações alérgicas - Níveis aumentam na resposta a parasitas ou

pacientes com hipersensibilidade do tipo I;– Interação mastócito / IgE / Ag, causa a ativação do mastócito com

efeitos vasculares potentes localizados.– Infecções parasitárias (Helmintos)

• Ligação via Fc aos eosinófilos– Não fixa Complemento

IGE

• Propriedades:– Concentrações séricas baixas– Vida curta– Menos caracterizada das imunoglobulinas do

ponto de vista funcional– Sensível à proteólise– Está na superfície do LB– Não liga Complemento

IgD

1. Na defesa do hospedeiro:marcação de organismos infecciosos;

recrutamento, no hospedeiro de mecanismos efetores de destruição;

neutralização de toxinas;

remoção de antígenos estranhos da circulação;

2. Na medicina clínica:

níveis de Ac específicos antipatógeno usados no

diagnóstico/monitoramento de uma doença;

conjunto de Ac administrados passivamente para a

terapia/proteção do hospedeiro;

3. Em laboratórios científicos: diagnóstico e pesquisa.

Funções Anticorpos

• NEUTRALIZANTE: se liga ao patógeno e impede de interagir com membrana celular

• OPSONIZACÃO: revestimento patógeno por proteínas sistema imune

• ATIVAÇÃO COMPLEMENTO

NeutralizaçãoNeutralização

NeutralizaçãoNeutralização

NeutralizaçãoNeutralização

OpsonizaçãoOpsonização

OpsonizaçãoOpsonização

OpsonizaçãoOpsonização

Ativação do Sistema Ativação do Sistema ComplementoComplemento

EXPRESSÃO DAS IMUNOGLOBULINAS;

- Na superfície da célula B;

-Resposta primária e secundária;

-GENES DAS IMUNOGLOBULINAS;

- Genes de cadeias leves;

- Genes das cadeias pesadas;

- Geração da diversidade da imunoglobulina.