1. Definio do meio de culturaO material nutriente preparado no laboratrio para o crescimento de microrganismos denominado meio de cultura (Case, et all, 2005).Cultura uma populao de microrganismos cultivados em um meio de cultura. Meios de cultura so substncias utilizadas para fornecer nutrientes para o crescimento e multiplicao de microrganismos (Chan, et all, 1997). 2. Elementos qumicos e componentes do meio de culturaPara crescer, todos os organismos necessitam de uma variedade de elementos qumicos como nutrientes. Estes elementos so necessrios tanto para sntese como para as funes normais dos compostos celulares. Eles existem na natureza em uma grande variedade de compostos, que so inorgnicos ou orgnicos (Chan, et all, 1997).Os elementos qumicos principais para o crescimento das clulas incluem Carbono, Nitrognio, Hidrognio, Oxignio, Enxofre e Fosforo (Chan, et all, 1997).2.1 CarbonoO carbono um dos elementos qumicos mais importantes necessrios para o crescimento microbiano. Todos os organismos requerem o carbono em alguma forma. O carbono forma o esqueleto das trs maiores classes de nutrientes orgnicos: carbohidratos, lipdios e protenas. Tais compostos fornecem energia para o crescimento da clula que servem como unidade bsica do material celular.Aqueles microrganismos que utilizam compostos orgnicos como sua principal fonte de carbono so chamados heterotrficos. Os heterotrficos obtm tais molculas orgnicas absorvendo-as a partir do meio, ou ingerindo organismos autotrficos ou outros heterotrficos.2.2 Nitrognio Todos os organismos tambm necessitam do nitrognio em alguma forma. O elemento uma parte essencial dos aminocidos que juntos formam as protenas. As bactrias so particularmente versteis na utilizao do nitrognio.3.3 Hidrognio, Oxignio, Enxofre e FsforoO hidrognio e o oxignio fazem parte de muitos compostos orgnicos. O enxofre necessrio para a biossntese dos aminocidos cistena, cistina e metionina. O fosforo essencial para a sntese de cidos nucleicos e adenosina trifosfato (ATP), um composto que extremamente importante para o armazenamento e a transferncia de energia.Outros nutrientes essenciais so o oxignio, hidrognio, nitrognio, enxofre, magnsio, fosforo, considerados macronutrientes, isto , nutrientes que so exigidos em quantidades relativamente elevadas e que desempenham papis fundamentais na estrutura e metabolismo da clula. Os micronutrientes ou elementos mnimos, exigidos em menores quantidades mas funcionalmente muito importantes incluem o mangans, cobalto, cobre, molibdnio e zinco (Ferreira & Sousa, 1998).3. Classificao Nutricional dos MooOs organismos que utilizam compostos qumicos para obter energia so chamados quimiotrficos; aqueles que dependem primariamente da energia radiante (luz) so denominados fototrficos. Pela combinao desses termos com aqueles relacionados s principais fontes de carbono, os seguintes grupos emergem: Quimioautotficos aqueles organismos que utilizam substncias qumicas (inorgnicas) como fontes de energia e dixido de carbono como principal fonte de carbono. Quimioheterotrficos aqueles que utilizam substncias qumicas (orgnicas) como fontes de energia e os compostos orgnicos como fonte principal do carbono. Fotoautotroficos aqueles que utilizam a luz como fonte de energia e dioxido de carbono como principal fonte carbono; Fotoheterotrficos aqueles que utilizam a lluz como fonte de energia e comopostos orgnicos como principal fonte de carbono.

4. Classificao de Meios de culturaOs meios de cultura podem ser classificados quanto ao estado fsico, composio qumica e objectivos funcionais.4.1 Quanto ao estado fsico podem ser lquido, solido e semi-solido.4.1.1 Lquido - sem agentes solidificantes, apresentando-se como um caldo, utilizados para ativao das culturas, repiques de microrganismos, provas bioqumicas, dentre outros.4.1.2 Slido - quando contm agentes solidificantes, principalmente gar (cerca de 1 a 2,0 %).4.1.3 Semi-Slido - quando a quantidade de gar e ou gelatina de 0,075 a 0,5 %, dando uma consistncia intermediria, de modo a permitir o crescimento de microrganismos em tenses variadas de oxignio ou a verificao da motilidade e tambm para conservao de culturas.4.2 Quanto a composio qumica podem ser quimicamente definidos e quimicamente complexos4.2.1 Quimicamente definidos quando a sua composio qumica conhecida. Para o crescimento de um microrganismo quimiolitoautrfico, meio definido deve conter ies amnio ou nitrato. Para um quimiorganoheterotrfico, um meio definido deve conter carbono orgnico que servir como fonte de carbono e energia.4.2.2 Quimicamente complexos quando a sua composio qumica exacta no se conhece. So feitos com nutrientes, tais como extracto de levedura, extracto de carne, extractos de plantas, peptona (protenas parcialmente hidrolisadas por protases), leite, extracto de solo, etc. todos estes preparados so substncias qumicas complexas, contendo acares, aminocidos, vitaminas e sais. So usados em rotina laboratorial, permitindo o crescimento de uma gama de microrganismos, incluindo aqueles cujos factores de crescimento no so perfeitamente conhecidos.4.3 Quanto aos objetivos funcionais pode ser meios de pr-enriquecimento, enriquecimento, diferenciais, seletivos, meios de triagem, identificao, dosagem, contagem e estocagem ou manuteno.4.3.1 Meios de pr-enriquecimento -so aqueles que permitem a dessensibilizao de microrganismos injuriados, i.e., para amostras que sofreram algum tipo de tratamento (trmico ou qumico). Ex. gua peptonada, caldo lactosado (isolamento de salmonelas de leite em p).4.3.2 Meios de Enriquecimento -quando proporcionam nutrientes adequados ao crescimento de microrganismos presentes usualmente em baixos nmeros ou de crescimento lento, bem como microrganismos exigentes e fastidiosos. Esses meios tm a propriedade de estimular o crescimento de determinados microrganismos, mas existem alguns que tambm podem inibir o crescimento de outros. Ex. Caldo Tetrationato e Selenito-Cistina para cultivo de Salmonelas (lquidos), Caldo Tioglicolato paraClostridium perfringens.4.3.3 Diferenciais- quando contm substncias que permitem estabelecer diferenas entre microrganismos muito parecidos, tais como meio de Teague ou Eosina Azul de Metileno (diferencial para coliformes), gar MacConkey para a diferenciao de enterobactrias, gar sangue, agar Baird-Parker para isolamento e diferenciao de cocos Gram positivos (slidos).4.3.4 Seletivos- os que contm substncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de microrganismos, permitindo o crescimento de outros. Exemplo: meios com telurito de potssio (para isolamento deCorynebacterium diphtheriae), gar Salmonella-Shigella (SS) e gar MacConkey, meios com sais biliares e verde brilhante para isolamento seletivo deSalmonella, meios com 7,5% de cloreto de sdio, meio Baird-Parker, para isolamento deStaphylococcus aureus, meios com antibiticos para isolamento de diversos microrganismos (TSC, SFP, , meio de Blaser, meio de Skirrow, etc.). A maioria deles tambm diferencial, permitindo diferenciar as colnias (slidos) dos microrganismos.4.3.5 Meios de triagem- meios que avaliam determinadas atividades metablicas permitindo caracterizao e identificao perfunctria ou presuntiva de muitos microrganismos (gar trplice acar e ferro, meio Instituto Adolfo Lutz, uria, etc.)4.3.6 Identificao- prestam-se para a realizao de provas bioqumicas e verificao de funes fisiolgicas de organismos submetidos a identificao (meios Oxidao/Fermentao, gar Citrato, Caldo nitrato, meio semi-slido, caldo triptofano, meio de Sulfito Indol Motilidade, etc.4.3.7 Dosagem- empregados nas determinaes de vitaminas, antibiticos e aminocidos;4.3.8 Contagem- empregados para a determinao quantitativa da populao microbiana (Agar de Contagem em Placas, TSC, Agar Batata Dextrose, gar Baird-Parker, etc.)4.3.9 Estocagem ou manuteno- utilizados para conservao de microrganismos no laboratrio, i.e. garantem a viabilidade de microrganismos (gar Sabouraud, Meios com leite, gar suco de tomate, gar sangue, gar Simples, meio semisslido, etc.) 4.3.10 Simples aqueles que permitem o crescimento bacteriano, sem satisfazer, contudo nenhuma exigncia em especial.5. Tipos de meios de culturaOs tipos de meios de cultura usados para o cultivo de microrganismos so:Agar Nutriente: Manitol salt Agar:Agar sangue:Agar batata:Agar McConkey:

6.

7. Importncia dos meios de cultura

O crescimento dos microrganismos nos diferentes meios de cultura utilizados fornece as primeiras informaes para a sua identificao. E importante conhecer o potencial de crescimento de cada meio de cultura e adequar ao perfil bacteriano esperado pra cada matria. Alguns procedimentos so essenciais na hora de preparao de cada meio de cultura para a obteno de melhores resultados e evitar contaminaes, como nos diferentes casos: quando distribuir o meio antes de autoclavar, os tubos no precisam estar esterilizados; quando distribuir o meio apos a autoclavacao, os tubos, fracos, placas, pipetas e vidrarias ou materiais auxiliares obrigatoriamente devem ser estreis e os meios devem ser autoclavados com as tampas semi-abertas, para que a esterilizao seja por igual em todo o contedo dos tubos- tampas fechadas no permitem a entrada de vapor.