Luciana HonoratoMédica veterinária, PhD., Biotérios setoriais ccb - UFSC

Classificação genética

Heterogênicos = outbred

Acasalamento Aleatório

Não-Consanguíneos

99% de heterozigose entre

genes alelos

Fonte de origem dos

consanguíneos

Isogênicos = Inbred

Acasalamento entre irmãos por

20 ou + gerações

Consanguíneos

98,6% de alelos idênticos

Fonte de origem dos

transgênicos,KO,mutantes..

Características de heterogênicos (outbred stock)

Perfil genético não conhecido

Acasalamento randômico

Alta performance reprodutiva

Alto vigor

Variabilidade fenotípica

• Cuidadoso esquema de acasalamento:

– Pelo menos 25 pares de casais para não ter repetir parentes

– Esse esquema geralmente produz animais mais vigorosos do que isogênicos.

• Heterogênicos tem ninhadas maiores e peso corporal maior do que isogênicos:

– Por exemplo: Ninhada de ICR é 11.5 enquanto BALB/c é de 6 e machos de 12 semanas do ICR pesam média de 42 g enquanto BALB/c é de 24 g.

FONTE: Jorge M Sztein DVM PhD ASSISTED Reproduction and Cryopreservation Consultant

CD 1 é o swiss com marca registrada. O CF-1 é originária do swiss.

Condições genéticas controladas permitem:

• Reduzir o número de animais utilizados diminuindo as variações dentro/entre grupos

• Garantir a manutenção de colônias de produção fechadas...

• Uniformidade fenotípica: variação nos experimentos não se deve a fatores genéticos e sim ambientais ou metodológicos;

• Estabilidade genética: comparação de resultados experimentais ao longo do tempo e entre laboratórios

Isogênicos• Acasalamento entre irmãos: mínimo 20

gerações

• Gera 98,6% de alelos idênticos

• Intenção é produzir a mínima variação genética

Vantagens:Uniformidade genéticaUniformidade fenotípicaBem caracterizadoMonitoramento genético simplificadoEsquema de acasalamento simples

O B6N já tem todo o genoma sequenciado, por isso está sendo mais usado do que o B6J

Desvantagens:Mais caroDepressão InbreedingReduz vigor híbrido

(Berndtson, 1991)

Variabilidade biológica

C57BL/6N vs. C57BL/6J

• Há poucas diferenças (<2) entre Jackson C57BL/6J e Harlan, Taconic e Charles River C57BL/6N.

• O J tem a deleção do gene nicotinamide nucleotide transhydrogenase(NNT). Essa deleção tem implicação no controle homeostase da glicose prejudicada, reduzida secreção de insulina e alterações metabólicas.

• Haverá diferenças sutis devido às diferenças genéticas não detectadas, fatores ambientais, práticas de criação, etc.

Descrever nos artigos as procedências e sub-linhagens

• C57BL/6:

– ocorre com frequência micro/anoftalmia, hidrocefalia, dermatite ulcerativa, mal-oclusãodentária, septo vaginal.

– C57BL/6J fêmeas frequentemente perdem a 1ª cria.

É fácil detectar contaminação

genética?

Indicativos de contaminação genética- isogênicos tem ninhadas menores e peso corporal menor:

• C57BL6 e Balb/c: 6 crias; Peso (26g)

Contaminação genética ocorre com alta frequência!!

RECOMENDAÇÃO: as linhagens de

mesma cor (pelo menos) devem ser

criadas em salas diferentes

Camundongos

• Efeito Whiteen: sincronização do ciclo estral de camundongos fêmeas alojadas em grupos

• Efeito Lee-Boot: provoca anestroem fêmeas mantidas na ausência do odor de feromônios de machos.

• Efeito Bruce: impedir a implantação dos embriões, quando a fêmea é colocada em presença de outro macho, logo após a cópula

Ratos

Presente Presente, mas menos intenso

Presente Presente, mas menos intenso

Presente Ausente

Efeitos causados pelos feromônios :

Dados reprodutivos

Parâmetro Camundongos Ratos

Gestação 19-21 dias 21 a 23 dias

Desmame 21-28 dias 21-23 dias

Primeiro Cio (poliéstricos)

28 a 40 dias 35 a 45 dias

Idade de acasalamento 55 a 65 dias 65 a 75 dias

Período do ciclo 4 a 5 dias (período fértil inicia ao entardecer , dura 8 a 11hs)

4 a 5 dias (período fértil inicia ao entardecer , dura 8 a 11hs)

Período implantação 4 a 5 dias 5 a 6 dias

Cio pós-parto fértil fértil

Ciclo estral

Desenvolvimento dos folículos

ovarianos

Ovulação-Femea é

receptiva aomacho , dura

8-11 horas

Formação do corpo lúteo

Eliminaçãodos oocitos; começo do

desenvolvimento de

foliculos paraa nova

ovulação

“Plug” ou tampão vaginal

• A observação do plug indica quehouve cópula.

• Plugs consistem proteínascoaguladas do fluido seminal do macho

• Ele não garante a prenhez

• O plug pode desaparecer antes de ser visto.

Determinação da prenhez

Observação visual Mamas visíveis Palpação