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EVENTOS CO e PÓS TRADUCIONAIS
EVENTOS CO e PÓS TRADUCIONAIS
• Enovelamento natural e assistido (Chaperonas e HSPs)
•Ubiquitinação e degradação via proteassomo de proteínas não enoveladas
•Endereçamento (peptídeo sinal e glicosilação)
•Digestão de pró-proteínas
•Hidroxilação
•Fosforilação
O Paradoxo de Levinthal (1968)
• Uma proteína não pode experimentar todas as possíveis conformações
entre o estado desenovelado e o estado nativo.
• Imagine uma proteína com 150 aa que experimentam apenas as 3
conformações previstas no plote de Ramachandran. Cada conformação se
interconverteria na outra em picoseg (10-12s). Essa proteína, então, possuiria
3150 possíveis conformações (= 1068). Para experimentar todas essas
conformações seriam necessários
1068 x 10-12 seg = 1056 seg = 1048 anos !!!
• O enovelamento demora de 0.1 a 1000 seg in vivo e in vitro.
• O enovelamento é, portanto, dirigido passando por rotas cinéticas e
intermediários bem definidos escapando de conformações irrelevantes.
Gráfico de Ramachandran
Os três mecanismos clássicos de enovelamento
A. Fersht and V. Daggett, 2002, Cell
Enovelamento co-Traducional
Opções de Enovelamento
Chaperoninas (HSP60): Caixa de Enovelamento
HSP70ligação à áreas hidrofóbicas
Caminhos de Enovelamento
Degradação de Proteínas não EnoveladasUbiquitinação
Created by Roger B. Dodd
Degradação de Proteínas não EnolveladasProteassomo
Endereçamento e Peptídeo Sinal (eucariotos)
Via secretora
•CIT → RE H2N-Met-Met-Ser-Phe-Val-Ser-Leu-Leu-Leu-Val-Gly-Ile-Leu-Phe-Trp-
Ala-Thr-Glu-Ala-Glu-Gln-Leu-Thr-Lys-Cys-Glu-Val-Phe-Gln-Protein
•Golgi → RE Protein -Lys-Asp-Glu-Leu-COOH
Via Celular
•CIT → Nucleo H2N-(...)-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-Protein
•CIT → MIT H2N-Met-Leu-Ser-Leu-Arg-Gln-Ser-Ile-Arg-Phe-Phe-Lys-Pro-Ala-Thr-
Arg-Thr-Leu-Cys-Ser-Ser-Arg-Tyr-Leu-Leu-Protein
•CIT → Perox Protein -Ser-Lys-Leu-COOH
•CIT → Perox H2N-(...)-Arg-Leu-X5-His-Leu-Protein
Endereçamento de Proteínas (eucariotos)Via secretória – Retículo endoplasmático
As proteínas da via secretória
possuem uma sequência
sinal (peptídeo sinal) que
direciona os ribossomos que
as estão sintetizando para a
membrana do retículo
endoplasmático
Endereçamento de proteínas
sintetizadas em ribossomos
aderidos ao retículo
endoplasmático
Endereçamento de ProteínasVia secretória –> Retículo endoplasmático
Endereçamento de ProteínasVia secretória : Proteínas de Membrana
Proteína unipasso
Endereçamento de ProteínasVia secretória : Proteínas de Membrana
Proteína multipasso
Endereçamento de Proteínas (eucariotos)Via secretória : 1ª destino : Proteínas do RE
Toda as proteínas residentes no
reticulo endoplasmático
possuem na região C-terminal uma
sequência sinal extra denominada KDEL(LYS-ASP-GLU-LEU).
Endereçamento de Proteínas (eucariotos)Via secretória : outros destinos
- reencaminhadas para o retículo endoplasmático (sinal extra KDEL)- retidas no Complexo de Golgi (sinal extra desconhecido)- enviadas para os lisossomos (Sinal extra = manose-6-fosfato)- encaminhadas para vesículas de secreção (sinal extra desconhecido)- encaminhadas para membrana plasmática ou meio extracelular (SEM SINAL extra)
No Complexo de Golgi, as proteínas podem ser:
Endereçamento de Proteínas (eucariotos)Via secretória : Glicosilação no RE
- Após Golgi => Enviadas para os lisossomos (Sinal extra = manose-6-fosfato)
Endereçamento de Proteínas (eucariotos)Via celular – Citosol e organelas
Núcleo Peroxissomo
Cloroplasto
Mitocôndria
Ribossomos livresno citoplasma
Proteínacitosólicamadura
Proteínas citosólicas não possuem nenhum tipo de sinal de endereçamento
Endereçamento de Proteínas em Eucariotos
Complexo de Golgi
Retículo endoplasmático
Membrana citoplasmáticoSuperfície celular
(secretada) LisossomosNúcleo Peroxissomo
Cloroplasto
Mitocôndria
Proteínacitosólicamadura
VIA SECRETORA
1) Ribossomos aderidos ao RE
2) Ribossomoslivres
Endereçamento de Proteínas em Procariotos
Poteínas da membrana e espaço intermembranar são sintetizadas em ribossomos aderidos à membrana
- Citoplasma: sem sinal
- Membrana plasmática ou espaço intermembranar: com sinal
Ativação Proteolítica de ProteínasDigestão da Insulina
Hidroxilação de ProteínasExemplo do Colágeno
Fosforilação de Proteínas
Enzimas responsáveis pela adição de um grupamento fosfato em radicais Ser, Thr e
Tyr de proteínas.
Proteína Proteína
PO4
-3
PO4
-3
Kinases
Fosfatases
ATP
Fosforilação de ProteínasExemplo das Lipases