Primeira aula

Apresentao da Disciplina

Caractersticas do sangue

Coleta de sangue

Extenso sangunea e colorao

Hemograma

Profa Elvira Shinohara

Caractersticas do sangue

Tecido lquido e renovvel Plasma Clulas sanguneas Eritrcitos Leuccitos Plaquetas

Tipos de leuccitos Neutrfilos Eosinfilos Basfilos Linfcitos Moncitos

Funo do sangue

Transporte (O2, CO2, nutrientes, metablitos, etc)

Defesa (fagocitose)

Homeostase (temperatura, controle eletroltico, etc)

Dis

cip

lina

de

Fis

iolo

gia

do

Sis

tem

a H

em

ato

potico,

inte

gra

l 2

01

2

Clulas sanguneas

Eritrcitos ou Hemcias ou Glbulos vermelhos

Leuccitos

Neutrfilos

Eosinofilos

Basfilos

Linfocitos

Moncitos

Plaquetas

Granulcitos

Agranulcitos

Como visualizamos estas clulas?

Extenso sangunea

Colorao da extenso sangunea

Clulas sanguneas

Clulas sanguneas

Eosinfilo Neutrfilo Segmentado Linfcito

Plaquetas

Hemcias

Clulas sanguneas

Moncito Linfcito

Plaquetas Hemcias

Clulas sanguneas

Basfilos

Fonte: Hoffbrand & Pettit, 1991

Clulas sanguneas

Clulas sanguneas

Volume sanguneo nas mulheres

Volume de sangue nas mulheres 61,9 mL/kg

Exemplo:

Mulher de 55 kg (peso corpreo)

Logo:

Volume de sangue 3.404 mL

O volume total de eritrcitos corresponde a 24,8 ml/kg de peso, ou 1.362 mL

(usou o Ht=40% para este clculo)

Volume sanguneo nos homens

Volume de sangue nos homens = 62,4 mL/kg

Exemplo:

Homem de 75 kg (peso corpreo)

Logo:

Volume de sangue 4.680 mL

O volume total de eritrcitos corresponde a 28,1 ml/kg de peso, ou 2.106 mL

(usou o Ht=45% para este clculo)

Coleta do sangue

Locais de coleta de sangue

Puno venosa

Tubos vacuo para coleta

A cor da tampa indica qual anticoagulante est sendo utilizado

Cor roxa = EDTA

Cor cinza = fluoreto de sdio

Cor azul = citrato de sdio

Cor verde = heparina

Cor vermelha/marrom = sem anticoagulante

Anticoagulantes utilizados em hematologia

EDTA

K3EDTA e K2EDTA so os anticoagulantes mais adequados para a rotina hematolgica (hemograma)

EDTA quela o clcio do sangue

utilizado na seguinte proporo: 10 L de anticoagulante/1mL de sangue.

Vantagens:

no altera a morfologia das clulas (desde que a proporo anticoagulante/sangue seja mantida)

no dilui o sangue e impede a agregao plaquetria

Anticoagulantes utilizados em hematologia

CITRATO DE SDIO

o anticoagulante de escolha para os testes de coagulao e prova de agregao plaquetria.

O citrato de sdio reage com o clcio formando um composto insolvel.

utilizado na seguinte proporo:

1 mL de anticoagulante/ 9 mL de sangue.

ou

0,5 mL de anticoagulante/ 4,5 mL de sangue

Desvantagem: altera a morfologia das clulas e dilui o sangue (uma parte de anticoagulante para 9 partes de sangue).

Anticoagulantes utilizados em hematologia

HEPARINA

A heparina age pela formao de um complexo com a antitrombina III plasmtica, que inibe a trombina e outros estgios dos fatores de coagulao

Vantagens

no altera a morfologia das clulas e no dilui o sangue

Desvantagem: o preo do anticoagulante maior do que o EDTA

EXTENSO SANGUNEA anlise da morfologia essencial para o diagnstico

Plasma

Clulas sanguneas

Clulas sanguneas

Extenso Sangunea

COLORAO SANGUNEA

Corantes do Tipo Romanovsky

So misturas que contem eosina e azul de metileno dissolvidos em metanol

Na soluo envelhecida (aps dias do preparo do corante), o azul de metileno se oxida em gradaes diferentes, originando os azures de metileno

Colorao do tipo Romanowsky

O corante de Romanowsky (neutros) uma soluo alcolica de um complexo de eosinato de azul e azures de metileno

A diferena entre os vrios corantes derivados do corante primitivo de Romanowsky acha-se na proporo que se emprega de azul-de-metileno e de eosina, ou no mtodo de tratamento do azul-de-metileno, antes de sua combinao com a eosina

Princpio da colorao

Os componentes Azures em sua forma de dmeros ligam-se a molculas aninicas, exemplo os grupos fosfato do DNA

Os grupamentos cidos dos cidos nucleicos e protenas do ncleo celular e do citoplasma tem afinidade pelo corante bsico Azul- de -Metileno

Princpio da colorao

A eosina na forma de monmero se liga aos stios catinicos das protenas

A presena de grupamentos bsicos na molcula de Hb resulta na afinidade por corantes cidos, corando-se pela eosina

Principio da colorao

CORANTE CLULA

Azul de Metileno cora Ncleo (DNA)

(bsico) (cido)

Eosina cora Hb

(cido) (bsico)

Nomenclatura usual

Colorao Ortocromtica: a clula cora-se com a mesma cor do corante

Colorao Metacromtica: a clula toma uma cor diferente daquela do corante

Nomenclatura usual

Estruturas celulares que se coram em pelo Azul de Metileno so chamadas de basfilas (corando-se de azul)

Estruturas celulares que se coram pela Eosina so chamadas de acidfilas (corando-se em rosa)

Tipos de corantes de Romanovsky

May-Grunwald ou Jenner,

Giemsa

Leishman

Wright

(Podem ser encontrados, no comrcio, na forma de reagentes ou em solues j preparadas pelo fornecedor)

Clulas sanguneas

Contagem relativa dos leuccitos realizada atravs da anlise morfolgica dos leuccitos, contando no

mnimo 100 leuccitos, diferenciando clula a clula.

Campo muito grosso Campo adequado Campo muito fino

Contagem relativa dos leuccitos realizada atravs da anlise morfolgica dos leuccitos, contando no

mnimo 100 leuccitos, diferenciando clula a clula.

Campo muito

grosso Campo adequado Campo muito fino

Campos de leitura na extenso sangunea

Corpo da extenso sangunea

Regio grossa da extenso (cabea)

No deve ser feito contagem das clulas

nesta regio da extenso sangunea

Regio da cauda (muito fina)

No deve ser feito contagem das clulas nesta regio da extenso sangunea

Campos que NO devem ser analisados na extenso sangunea

Regio muito fina Cauda da extenso

Regio muito grossa

Cabea da extenso sangunea

Contagem relativa dos leuccitos

realizada atravs da anlise morfolgica dos leuccitos, contando no mnimo 100 leuccitos, diferenciando clula a clula.

A

A

B

A Cerca de 25 clulas

B- Cerca de 50 clulas

Contagem relativa dos leuccitos

As clulas no tem distribuio uniforme na extenso sangunea

Cabea Corpo Cauda

Os linfcitos predominam no meio da extenso

Neutrfilos e moncitos predominam nas margens e na cauda

Problemas na colorao Presena de precipitados do corante na extenso sangunea

corada

Uso de lminas sujas com gordura

Secagem durante o perodo de colorao

Lavagem inadequada ao trmino da colorao

Filtrao inadequada dos corantes (vai aparecer os precipitados de corante)

Precipitados de corante

Colorao inapropriada

HEMOGRAMA

Plasma

clulas

HEMOGRAMA

Exame hematolgico mais solicitado

Consiste na anlise qualitativa e quantitativa das

clulas sanguneas

Fornece parmetros para controle e auxlio no

diagnstico das anemias, de vrios processos

infecciosos e de alteraes no nmero das plaquetas

Hemograma

Eritrograma (avalia srie vermelha)

Leucograma (avalia srie branca)

Contagem de plaquetas

Exemplo de um laudo de hemograma

eritrograma

leucograma

Contagem de plaquetas

Bibliografia recomendada

. Dacie & Lewis. Practical Haematology. 8a Edition. Churchill Livingstone.

Stiene-Martin EA, Lotspeich-Steininger, Koepke JA Clinical Hematology- Principles, Procedures, Correlations. Editora Lippincott, 2edio, 1998.

Lorenzi TF, DAmico E, Daniel MM, Silveira PAA, Buccheri V Manual de Hematologia Propedutica e Clnica. Editora Medsi 3 edio, 2003.