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Fundamentos Básicos da Necropsia e daFundamentos Básicos da Necropsia e da

Colheita de Material para HistopatologiaColheita de Material para Histopatologia

Universidade Federal de GoiásEscola de Veter inár ia

Departamento de Medicina Veter inár ia

Setor de Patologia AnimalSetor de Patologia AnimalTelefaxTelefax: 62: 62--3521.15973521.1597

EE--mail: mail: patologia@vet.ufg.brpatologia@vet.ufg.br

Técnica de Necropsia

Necropsia

� Revela e/ ou confirma

- diagnóstico das doenças

- erros de interpretação dos sinais e da terapêutica

“ Procedimento obrigatório para médicos veterinários que consideram sua profissão uma ciência séria”

� Subsídio para conhecer a patogenia dos processos mórbidos

� A necropsia é a arte de fazer com que o cadáver “revele” o curso

dos padecimentos que o levaram a morte.

Técnica de Necropsia

Conceito:

É oconjunto de procedimentos mecânicos que objetiva expor, demaneira ordenada, as diversas partes doorganismo

� As Técnicas de Necropsia são variadas. � O importante é utilizar sempre a mesma.

Colheita e Remessa de MaterialObjetivo:

Auxiliar no diagnóstico de enfermidades:

• Bacterianas

• Virais

• Parasitárias

• Intoxicações químicas

• Plantas tóxicas

• Deficiências minerais e vitamínicas

• Análises bioquímicas

• Anatomohistopatológicos

Colheita - Exame Bacteriológico

Punção de Líquido Pericárdico Punção Líquido e Fibrina Pleural

Colheita e Remessa de Material

Colheita - Exame Bacteriológico

Punção de Líquido Pericárdico Punção Líquido e Fibrina Pleural

Colheita e Remessa de Material

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Colheita -Exame Bacteriológico

Amostra de tecidos e órgãos

Colheita e Remessa de MaterialRelatório da Necropsia

� Importância

� Registrar dados que possam ser esquecidos

� Fonte de consulta

� Aspecto legal ( documento)

� Remeter o relatório, junto com o material para exames

� Conceito

Descrição detalhada da alterações observadas na necropsia, cuja

linguagem e conteúdo, devem ser claros para o entendimento de

quem não participou da mesma.

Obs.: Descrever apenas as alterações macroscópicas observadas !

Relatório da Necropsia

� Componentes

• Cabeçalho• Histórico do caso

- Dados obtidos pela anamnese

� Achados de necropsia

• Exame externo• Exame interno• Descrição por sistemas • Mencionar apenas as alterações observadas• Descrição responsável, ou seja, não ceder as pressões do proprietário ou responsável pelo animal e/ou propriedade.

� Emitir um Diagnóstico Presuntivo ou Definitivo, se possível !� Citar os materiais remetidos para exame complementares.

Colheita de Material para Histopatologia

� Instruções gerais para remessa de material ao Laboratório:

– Vir acompanhado de informações referentes ao animal:

• Endereço do proprietário

• Descrição do animal

• História clínica/Suspeita clínica

• Relatório de necropsia – lesões macroscópicas

• Exame solicitado

• Conservador usado

Estas informações deverão vir:

� fora da caixa, em saco plástico e lacrada.

Colheita de Material para Histopatologia

Instruções gerais:

� Material embalado de forma a não oferecer perigo à quem o

transporta

� Ser expedidopelomeiomaisrápido:

-Preferencialmente nos diasúteisda semana

� Ser colhidode animais:- fase agônica- final da doença- mortos recentemente

� O material deverá ser enviado em solução fixadora de formola 10% ou seja:

– 10ml de formolcomercial( formalina37% )

– 90ml de água

– Fixação em 24 horas

– Amostras enviadas à temperatura ambiente

� Nunca congele tecido que se destinar a exame histopatológico:

– Este procedimento inviabiliza o processamento do material

� O simples resfriamentodo material também pode:– determinar a autólise do tecido/tempo entre acolheita ea chegadaao laboratório.

Colheita de Material para Histopatologia

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1 - Frascos de formol encontradono comércio

2 – Frasco de plástico com soluçãode formol a 10%

9 partes de água e1 parte de formol

3 – Frasco com solução de formol a 10% e amostras

MATERIAL PRONTO PARA ENVIO PARA EXAME HISTOPATOLÓGICO

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ÁGUA: 9 partes

FORMOL: 1 parte

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Colheita e Remessa de Material

Exame Histopatológico: Finalidade da fixação

• Etapa essencial para obter-se uma boa preparação histológica

• Definição: Fixadores são substâncias químicas que mantêm a integridade dos

tecidos após a morte, sem que ocorra alteração da estrutura celular.

� Fixadores

� Permitir o estudo celular como em vida

� Evitar alterações na estrutura química celular

� Endurecimento de tecidos moles para processamento técnico

� Fixar proteínas e inativar enzimas proteolíticas responsáveis pela

autólise.

Fixadores mais utilizados rotineiramente

1. Formol a 10%

2. Formol a 10% tamponado com pH 7

Formol comercial................ .. ... .. . 100 ml

Água destilada................ .. .. ... .. ..900 ml

Fosfato sódico monobásico.............. .. 4 g

Fosfato sódico dibásico.............. ... .. ..6 g

– Fixação em 12 a 24 horas. Usado para todos os tipos de tecidos

• Solução de Bouin ( indicado para sistema genital e pele )

Ácido pícrico........... .. ... .. ... .. .. ... .. .. ... 75 ml

Formol............... .. .. ... .. .. ... .. .. ... .. ... ..25 ml

Ácido acético glacial................ ... .. .. ... .. .5 g

� Fixação em 6 a 12 horas

Fixadores mais utilizados rotineiramente

� Solução de Dubosc-Brasil

Solução estoque:

Alcool a 80%...........................................150 ml

Formol...................................................60 ml

Ácido pícrico.............................................5 g

Solução de uso:

Solução estoque.........................................28 ml

Ácido acético glacial.....................................2 ml

� Fixação em 2 a 3 horas. Utilizado para biópsias

Finalidade da Solução Fixadora

I. Permitir o estudo celular

II. Evitar alterações na estrutura química celular

III. Inativar enzimas proteolíticas: bloqueio dos fenômenos de

autólise/putrefação

IV. Facilita a manipulação por deixar o material mais firme

Colheita de material para exame histopatológico

� O tecido deve sercortado emfatias

� O fragmento deveconter:

- áreas limítrofesentre onormal e a árealesada

� Imergir imediatamente o fragmentoemsoluçãode formol a 10%

� O frasco deve ser sempre de “bocalarga,”preferencialmente de plástico

� A quantidade defixadordeve ser 10a 20vezes ovolume dofragmento

� O fixador deve cobrirtotalmente o fragmento

- facilitar a fixação pelo formol

� Lacrar o frascocomfita crepe,esparadrapo

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2 a 4 cm

3 a 4 cm

Tamanho do fragmento Cuidados no acondicionamento do material

� Amostras de tecido pouco densos como:

– Pulmão– Medula óssea– Cérebro

Podem flutuar quando colocados no fixador

� Deve-se então colocar uma camada de algodão ou papel sobre os mesmospara que ocorra uma fixação uniforme dos mesmos

� Para colheita de material do sistema genital e lesões de pele, recomenda-se:solução de Bouin como conservante

Algodão

TAMPA

1 parte de fragmentos

10 a 20 partes de formol

Algodão

Disposição de deFixador x tecidos Acondicionamento do material

Fragmento de Pulmão

Cuidados no acondicionamento do material

� Manipulação dos órgãos e instrumentos utilizados

�Manipulação mínima dos órgãos

�Os órgãos não devem ser comprimidos ou dobrados

�Superfícies mucosas não devem ser manipuladas

�Evitar o uso de pinças ou tesouras que danifiquem a estrutura do

tecido

Envio correto

1 – Frasco de plástico com fragmentos de tamanho corretos

e proporção de formol adequado

2 – Fragmentos de diversos órgãos de tamanho correto

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Peso da caixa : 0,800 kg

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Envio corretoO que deve ser evitado:

1. Animais ou vísceras em autólise

2. Amostras congeladas

3. Falta de histórico

4. Amostragem não representativa

Animais em fase de resolução

5. Material fixado e enviado incorretamente

Colheita de Material : frasco boca larga e volume adequado de fixador

Colheita de Material e Fixação Corretas Colheita de Material e Fixação Incorretas

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Fixação InadequadaNódulos Tumorais Colhidos de Forma Inadequada

Colheita de Material –Rim Colheita de Material –Rim com cisto

Colheita de Material: baço

Recorte e processamento do fragmento no laboratório de histopatologia

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Recorte e processamento do fragmento no laboratório de histopatologia

Colheita e Remessa de Sistema Nervoso

Abertura do Crânio

Colheita de MaterialCérebro

Realizar cortes seriados após fixação em formol

Colheita de MaterialCérebro

Realizar cortes seriados após fixação em formol

Colheita de MaterialCérebro

Fo n te: Dr.An ilto n Vasco ncelo s /UFMG(20 04 )

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Separação Tronco Encefálico

Colheita para Diagnóstico de Raiva ( imunofluorência)

Verme do cerebelo , Medula, Tálamo, Parte rostral do cérebro

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Restante para Histopatologia

Nota:Animal com mais de 24 meses

Enviar para Encefalopatia Espongiforme Bovina

(EEB)

Enviar para Raiva

Encefalopatia Espongiforme Bovina Realizar quatro cortes seriados para melhor fixação do material

Tálamo

Colículo rostral

Colículo caudal epedúnculo cerebelar

Óbex

Medula

Tronco Encefálico

Material a ser remetido para laboratório:• EEB : formol (histopatológico e IHQ)

– Tronco (óbex, pedúnculos, colículos caudais e rostrais);

– Cérebro;

– Cerebelo;

• Raiva: refrigerado

�Medula;

�Tálamo;

�Verme do cerebelo

�Cérebro (parte rostral)

Remessa de Material

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Remessa de Material

NUNCA ESQUECER:

Rotulagem :� Conter informações resumidas mas suficientes para aidentificação do material, tais como órgãos contidos no frasco.

� Acompanhar Laudo de Necropsia do caso

Acondicionar corretamente para evitar:

� Quebra de vidros. � Usar jornal ou papel toalha para preencher os espaços vazios da caixa

acondicionadora do frasco.

� Extravasamento de conteúdo. � Certificar-se que o frasco está com a tampa bem lacrada.

Remessa de Material

NUNCA ESQUECER:

� Identificação da propriedade e do proprietário

� Endereço completo para contato. � Informar: Telefones de contato e E-mail caso haja.

� Histórico clínico completo e detalhado

� Número de animais existentes na propriedade

� Número de animais doentes .......... .. .

� Descrição das alterações macroscópicas observadas durante anecropsia ( laudo de necropsia)

Endereço para remessa de material Histopatológico

Universidade Federal de Goiás

Escola de Veterinária

Departamento de Medicina Veterinária

Setor de Patologia Animal

Aos cuidados do: Laboratório de Histopatologia

Caixa Postal 131 – Campus SamambaiaCEP: 74001-970 – Goiânia – Goiás

Telefax: 62- 3521.1597 ou Fone: 62-3521-1580E-mail: patologia@vet.ufg.br

Obrigado a todos !Obrigado a todos !

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