Instituto Federal Goiano câmpus Urutaí.

Curso de Agronomia

Disciplina de Fitopatologia

Caracterização Molecular e sorológica

do Vírus da mancha amarela do íris, uma nova

e distinta espécie de Tospovirus.

Apresentador: Jefferson Lucas de A. Silva

CORTÊS, I., LIVIERATOS, I. C., DERKS, A., PETERS, D., AND KORMELINK, R. 1998. Molecular and serological characterization of iris yellow spot virus, a new and distinct tospovirus species.Phytopathology 88:1276-1282.1

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Introdução

iris yellow spot virus (IYSV)

Família Bunyaviridae

gênero Tospovirus.

tomato spotted wilt virus (TSWV), tomato chlorotic spot

virus (TCSV), groundnut ringspot virus (GRSV), impatiens

necrotic spot virus (INSV), watermelon silver mottle virus

(WSMV), peanut bud necrosis virus (PBNV).

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Objetivo

Aqui, descrevemos este novo tospovírus isolado do Íris hollandica cultivado na

Holanda, para o qual o nome da mancha amarela do Íris (IYSV), os dados

apresentados neste trabalho demonstram que este vírus é um tospovírus

distinto e novo, pertencente a nenhum dos sorogrupos descritos.

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Materiais e Métodos IYSV isolado a partir de I. hollandica.

Inoculado em Nicotiana benthamiana .

Tospovírus isolados: TSWV BR-01, TCSV BR-03, GRSV SA-05, INSV NL-07, e WSMV

Tospo-a.

Tampão de sulfato de sódio 0,01 M, pH 7,0, contendo sulfito de sódio a 0,1%.

N. benthamiana, N. glutinosa, N. rustica, N. clevelandii, Gomphrena globosa,

Chenopodium quinoa, Chenopodium amaranticolor, Emilia sonchifolia, Cucurbita

sativus, Vigna unguiculata, Phaseolus vulgaris, Pisum sativum, Datura stramonium,

Lycopersicum esculentum, Petunia hybrida, e Impatiens spp.

Thrips tabaci.

Frankliniella occidentalis.

Coelhos foram utilizados para a produção de soro anti-soros para o IYSV.

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Resultados e Discussão

Fig. 4. Análise de RNA nucleocapsideo purificada do vírus da mancha amarela do íris em um desnaturante 1% de gel

de agarose. Como controle, tomato spotted wilt virus (TSWV) nucleocápside RNA foi incluído. As dimensões dos

segmentos de RNA de TSWV está indicado no lado direito do gel em quilobases.7

Resultados e Discussão

Fig. 5. Clonagem estratégia para o vírus da mancha amarela do íris S RNA. As setas indicam os iniciadores utilizados

para a síntese de cDNA e de reação em cadeia da polimerase (PCR). Os clones derivados de PCR são indicados com

um P e os clones de cDNA com uma C. Os clones foram sequenciados maiores ou por subclonagem ou por

sequenciação directa com iniciadores. Os subclones são designados com o nome de clone original e a designação da

enzima utilizada para a digestão ou iniciador utilizado.8

Resultados e Discussão

Fig. 7. Expressão do vírus da mancha amarela do íris (IYSV) nucleoproteína em Escherichia coli. Produção de proteína de N em E. coli foi induzida com isopropil-b- D-thiogalactopyranoside (IPTG) e o extrato de proteína total foi resolvido em um dodecil sulfato de sódio a 15% em gel de poliacrilamida antes de transferir para um polivinilideno- (PVDF) da membrana. O Western blot foi analisado com 1 ug de um soro policlonal anti-N IYSV por ml. Purificada nucleocapsid IYSV materiais e PET-transformado-11T BL-21 células foram incluídos como controles. Marcadores de tamanho baixo peso molecular (Amersham Pharmacia Biotech, Uppsala, Suécia) são indicados à esquerda.9

Fig. 8. Árvore filogenética mostrando a relação do vírus da mancha amarela do íris para as outras espécies dentro do género representativos Tospovirus, com base na sequência de aminoácidos da proteína N. A árvore foi construída usando Engavetamento (gap pena criação = 12; lacuna extensão pena = 4) do pacote GCG.

Resultados e Discussão

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Conclusões

Neste artigo, apresentamos esses dados, bem como alguns

dados biológicos, de um novo tospovírus isolado a partir de

culturas de íris na Holanda. Dados sobre transmissão por

tripes, sorologia, gama de hospedeiros, e as sequências de

RNA S demonstram inequivocamente que representa um

novo tospovírus para que o nome vírus da mancha amarela do

íris (IYSV) é proposto. Isto traz o total de 11 distintas

espécies dentro do género Tospovírus.

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OBRIGADO

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