Avaliação das aulas TP

Microbiologia 2012-2013

Questões -TC

1. Quais as moléculas salivares identificadas como responsáveis pela adesão de streptococci à saliva?

Prps, aglutininas e alfa amilase.No caso da alfa amilase parece estar ligada à actividade catalitica da enzima

Questões -TC

2 – Quais as espécies de streptococci que têm estruturas de adesão? Que estruturas são essas?

S. pyogenes, S.agalactiae e S.pneumoniae.Sobretudo pili filamentosos com subunidades ligadas convalentemente à superfície da célula.

Questões -TC

3 – Qual a importância dos pili na formação do biofilme nesta espécie? Que dados o demonstram?É essencial na figura 1 os poços sem com o mutante sem saliva não tinham filme.Os poços com mutante e saliva tinham um filme defeituoso tal como os poços com saliva e bactéria normalSó nos poços com wt e saliva houve biofilme eficaz.

Questões -TC

4 – Das proteínas estudadas quais tinham maior capacidade de se ligar às proteinas salivares?

liga-se a todas mas mais a pilC e pilB. A pilA não liga muito eficientemente.Figura 3b

Questões -TC

5 – Quais os controlos usados na experiência anterior?

Foram usadas a FNBP e a BSA. Estas proteínas não ligaram à saliva.

Questões -TC

6 – Que técnica foi usada para estudar a estrutura dos pili?

criaram-se anticorpos contra as recombinantes pilA, pilB e pilC. Estes anticorpos foram testados contra os pili das bactérias nativas e mutantes.Nas culturas bacterianas os pili foram libertados para a solução pondo as bacterias em contacto com mutalisina

Questões -TC

7 – Quais os resultados?Estão na figura 4 B. e mostram que pilA é o maior constituinte dos pili de S.sanguinis.Na figura 4 C vê-se a localização do pilA

Questões -TC

8 – Qual é especificamente a molécula salivar à qual se liga pilC?Liga-se especificamente à alfa amilase um proteína de 50 kD na saliva. Figura 5

Questões TA

1. A ligação Às moléculas dos pili pilB e pilC é a única que existe? Como se sabe?

Figura 6. A.

Questões TA

2 – Na literatura aparece descrita a ligação da alfa amilase a proteínas bacterianas dependentes da sua atividade catalítica. Este estudo confirma isso? Como sabe?

Não confirma pois mesmo com a alfa amilase desnaturada se dá a ligação. Fig 7

Questões TA

3 – Qual é especificamente a zona de pil C à qual se liga a alfa amilase? Como se sabe?Analisou-se a ligação a 3 fragmentos de pilC e verificou-se que havia mais ligação à zona do terminal C. Figura 7

Questões TA

4– A zona de pilC com mais afinidade para a amilase alfa partilha sequencia com outra proteína. Qual?Que importância tem isto? Foi testado?Collagen binding protein B domain. Há domínios de ligação conservados.

Questões TA

5–Qual a importância, no geral da adesão a moléculas da saliva?Permite a colonização inicial e persistência no biofilme oral.

Questões TA

6 – Que proteínas ligadoras da saliva são encontradas noutros streptococci?SsP5 da SspA/B de S.gordoniiPac/AgI/II/Spac de Strep mutansFim A de S.parasanguinisAbpA e AbpB de Strep. gordoni

Questões TA

7 – O que se sabe sobre a sequência de aminoácidos destas outras proteínas ligadoras de amilase?Isso é importante? Porquê?Nalguns casos não se sabe a sequência. Se se soubesse poderia procurar-se no genoma de novas espécies sequenciadas por exemplo em projectos como o do HMP.

Questões TA

8 – Quais as conclusões principais do estudo?Que há estruturas de adesão à saliva em Strep sanguinis.Que essas estruturas estão nos piliQue são 3 proteínas diferentes A,B,eCQue não são as únicas responsáveis pelo biofilmeQue têm preponderâncias e funções diferentes no processo de adesão.

Questões TB

1 –Quais as moléculas salivares identificadas como responsáveis pela adesão de streptococci à saliva? A que estruturas se ligam?

Prps, aglutininas e alfa amilase.S. pyogenes, S.agalactiae e S.pneumoniae.Sobretudo pili filamentosos com subunidades ligadas convalentemente à superfície da célula.

Questões TB

2 – Faça a análise das figuras 1 e 2. O que demostram?

Questões TB

3 – Explique a figura 3 B.

Questões TB

4 – O que mostra a figura 4?

Questões TB

5 – Que resultados são apresentados na figura 5?

Questões TB

6 – Que conclusões se tiram da figura 6?

Questões TB

7 – O que mostra a figura 7?

Questões TB

8 – Que proteínas ligadoras da saliva são encontradas noutros streptococci?SsP5 da SspA/B de S.gordoniiPac/AgI/II/Spac de Strep mutansFim A de S.parasanguinisAbpA e AbpB de Strep. gordoni

Questões TB

9 – O que se sabe sobre a sequência de aminoácidos destas outras proteínas ligadoras de amilase?Isso é importante? Porquê?Nalguns casos não se sabe a sequência. Se se soubesse poderia procurar-se no genoma de novas espécies sequenciadas por exemplo em projectos como o do HMP.

Questões TB

10 – Quais as conclusões principais do estudo?Que há estruturas de adesão à saliva em Strep sanguinis.Que essas estruturas estão nos piliQue são 3 proteínas diferentes A,B,eCQue não são as únicas responsáveis pelo biofilmeQue têm preponderâncias e funções diferentes no processo de adesão.