Atividades Práticas de Biologia – prof Arlindo Costa

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ROTEIRO DE AULA PRÁTICA

DIFERENÇAS ENTRE CÉLULAS ANIMAIS E VEGETAIS Prática - Observação da mucosa bucal. Raspar a mucosa bucal com o auxílio de uma espátula de madeira. Com o material colhido fazer um esfregaço fino e transparente sobre uma lâmina seca. Deixar a lâmina secar movimentando-a no ar. Corar o material com azul de metileno ou orceína acética durante 5 minutos. Cobrir com lamínula e observar ao microscópio com objetivas de 10x e 40x. Esquematizar o material observado. Prática - Observação da epiderme de pimentão (Capsicum annuum). Faça um corte fino, pequeno e transparente na casca do pimentão. Deposite sobre a lâmina e adicione uma gota de cloreto de zinco iodado. Cubra com lamínula (retirar excesso de corante com papel filtro se necessário) e observe ao microscópio com objetivas de 10x e 40x. Na objetiva de 40x fechar levemente o diafragma. Faça outro corte, corando-o com hidróxido de amônia. Aguarde alguns segundos, cubra com lamínula (retirar excesso de corante com papel filtro se necessário) e observe ao microscópio como anteriormente. Esquematize as observações.

ESTUDO DE CÉLULAS VEGETAIS Prática - Células da epiderme inferior de Setcreasea purpurea. Retirar um pedaço da epiderme inferior da folha de Setcreasea e colocar em uma lâmina contendo uma gota de água destilada. Cobrir com lamínula. Retirar o excesso de água se necessário. Observar ao microscópio com objetivas de 10x e 40x. Retirar a lâmina do microscópio e pingar uma gota de cloreto de zinco iodado ao lado da lamínula. Sem retirar a lamínula e com o auxílio de papel filtro, faça o cloreto de zinco substituir a água debaixo da lamínula. Aguarde alguns minutos e observe novamente ao microscópio. Esquematize as observações. Prática - Epiderme do catáfilo de Allium cepa (cebola) Destacar um pedaço da epiderme do catáfilo da cebola e colocar em uma lâmina contendo uma gota de cloreto de zinco iodado. Não deixar o catáfilo enrugado, esticando-o se necessário. Cobrir com lamínula (retirar excesso de corante com papel filtro se necessário) e observar ao microscópio com objetivas de 10x e 40x. Esquematize as observações. Prática - Folha de Anacharis sp (Elódea) Destacar um folíolo de Anacharis e colocar em uma lâmina contendo água. Cobrir com lamínula e observar em objetiva de 10x e 40x. Esquematize as observações. Relatório: Entregar ao final da aula. Observar todas as lâminas nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Desenhar com a objetiva de 40x, identificando as estruturas celulares observadas.

OBSERVAÇÃO DE ORGANISMOS PROCARIONTES: Prática - Bactéria da coalhada (iogurte - Bacilo lacteo). Sob uma lâmina coletar uma pequena porção de coalhada. Pingar uma gota de água e dissolver bem. Fazer um esfregaço, tomando-se o cuidado de identificar o lado da lâmina no qual encontra-se o esfregaço. Secar bem a lâmina, podendo utilizar chapa aquecida. Pingar 3-4 gotas da mistura álcool-clorofórmio. Secar o preparado movimentando a lâmina no ar. Em seguida, pingar 2 gotas de azul de metileno, espalhando-o pela lâmina. Aguardar 5 minutos, lavando com água destilada. Limpar o excesso de água e levar ao microscópio para observação em objetiva de 10x e 40x. Fechar um pouco o diafragma após a localização do material. Represente o material observado. Prática - Bactérias do vinagre (Acetobacter aceti). Sob uma lâmina coletar pequena porção da madre do vinagre azedado (película formada na superfície) Faz-se um esfregaço, secando-o lentamente em chama ou placa aquecida. Pingar 2-3 gotas de azul de metileno, fazendo-o correr pela lâmina. Aguardar 10 minutos, e lavar a lâmina em água corrente. Adicionar glicerina e cobrir com lamínula. Observar em objetiva de 10x e 40x.

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Prática - Reconhecimento de bactéria e algas azuis. Prepare as culturas A e B com antecedência de 3 a 4 dias. No frasco A coloque cerca de 10 grão de pimenta do reino e 100ml de água filtrada. Fechar o frasco, deixando-o em local pouco iluminado. No frasco B coloque grama com raiz, bem picada, forrando o fundo do frasco. Acrescente 100 ml de água filtrada. Deixar o frasco aberto em local areja do e iluminado. Coloque uma gota de cada cultura, tomando-se o cuidado de não misturar os conta-gotas, em lâminas (diferentes) limpas, cobrindo-as com lamínula. Observe ao microscópio em objetiva de 10x e 40x. Faça esquemas do que encontrar.

OBSERVAÇÃO DE ORGANISMOS EUCARIONTES: Prática - Células de levedo. Tome uma porção de fermento de pão, dissolvendo-o em água morna. Junte açúcar, deixando descansar por 15 a 20 minutos. Pingue uma gota da suspensão sobre uma lâmina, cubra com lamínula e observe ao microscópio. Em seguida, fixe o material passando a lâmina sobre uma chama. Corar 5 minutos com violeta genciana. Lavar rapidamente em água corrente, cobrir com lamínula e observar ao microscópio com as objetivas de 10x e 40x. Esquematize as observações. Prática - Identificação de vários tipos de protistas. Com antecedência de 6 a 7 dias prepare as culturas A e B. Coloque alface picada em uma frasco (A) e grama picada em outro (B). Acrescente a ambos alguns grãos de arroz cru e 100 ml de água filtrada. Deixe os frascos em local arejado e iluminado, sem exposição direta ao sol. Depois de alguns dias cobrir os frascos com papel filtro ou algodão. Coloque uma gota da cultura (A ou B - colha a película que se forma na superfície ou o sedimento do fundo) em uma lâmina, cubra com lamínula e observe ao microscópio com objetivas de 10x e 40x. Esquematize as observações. Relatório: Entregar ao final da aula. Observar todas as lâminas nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Desenhar com a objetiva de 40x, identificando as estruturas celulares observadas. Roteiro de aula prática

IDENTIFICAÇÃO DE COMPONENTES QUÍMICOS CELULARES · Extração de DNA Material: cebola grande - 250 gramas; Sal de cozinha - 3gramas; Detergente neutro - 10ml; Álcool etílico 95% gelado; Papel filtro, tubos de ensaio, funil banho-maria a 60oC Metodologia: Picar a cebola em pedaços pequenos. Bater no liqüidificador e reservar 25g Preparar 100ml da solução de extração: 3g de sal, 10ml de detergente. Completar com água destilada até 100ml. Junte a cebola com a solução de extração em um frasco e deixar em banho-maria a 60o C durante 15 minutos. Em seguida, resfrie colocando o recipiente em gelo. Coe a mistura em papel filtro e recolha o filtrado em um tubo de ensaio. Despeje, delicadamente, o etanol 95% no tubo de ensaio. O DNA sobe para o etanol, no qual é insolúvel, ficando preservado e visível Roteiro de aula prática

IDENTIFICAÇÃO DE COMPONENTES QUÍMICOS CELULARES · Carboidratos: O amido é um polissacarídeo cuja unidade monossacarídica é a glicose. Apresenta-se sob duas formas: amilose, que consiste de longas cadeias não ramificadas e que na presença de iodo, dão coloração roxo-azulada, e amilopectina, que contém cadeias altamente ramificadas e dão coloração marrom-avermelhada. Ambas estão presentes em proporções variáveis nos tecidos vegetais de reserva. 01 - Teste de coloração do amido - Tuberculus tuberosae (batata inglesa) Cortar, com a gilete, um pedaço muito fino e pequeno do interior da batata e colocar sobre uma lâmina. Corar o material com Lugol por 5 minutos. Cobrir com lamínula. Observar. 02 - Euforbia splendens (coroa de Cristo) Pingar sobre a lâmina uma gota de látex da coroa de Cristo dissolvido em água. Pingar uma gota de Lugol. Cobrir com lamínula. Observar.

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· Lipídios Os lipídio se classificam em simples e compostos. Entre os compostos podem ser diferenciados os lipídios figurados, que são visíveis em forma de gotas refringentes e os mascarados, que são demonstrados por análises químicas. 03 - Citrus sp (laranja e limão) Fazer um corte tangencial bem fino na casca da laranja ou limão de maneira que possa passar a luz que nele incidir. Colocar sobre um vidro de relógio e pingar algumas gotas de Sudan IV e corar por sete minutos. Retirar o corte com um pincel e colocá-lo sobre uma lâmina. Cobrir com lamínula. Observar. · Proteínas Reação de biureto: o sulfato de cobre (CuSO4) em meio alcalino reage com compostos contendo duas ou mais ligações peptídicas, resultando um complexo de coloração violeta. A intensidade da cor é proporcional ao número de ligações peptídicas existentes. 04 - Leite e clara de ovo Pipetar 0,5ml de: 1)solução de clara de ovo diluída em água; 2)leite; 3)água e 4)gelatina. Colocar em tubos de ensaios separados. Adicionar 05 gotas de CuSO4 a 1% e 05 gotas de NaOH 2,5N. Observar se ocorrem alterações de cores e explicar. Reação Xantoproteica: o ácido nítrico (HNO3) reage com os anéis benzênicos dos aminoácidos triptofano, tirosina e fenilalanina, formando nitro compostos amarelos em meio alcalino. Realizar em conjunto com a prática 06. 05 - Leite e clara de ovo Pipetar 0,5ml de: 1) solução de clara de ovo diluída em água; 2)leite; 3)água e 4)gelatina. Colocar em tubos de ensaios separados. Adicionar 05 gotas de HNO3 concentrado e 05 gotas de NaOH 20%. Observar se ocorrem alterações de cores e explicar. OBS.: Evitar respirar os odores (gases) liberados pelo HNO3. Manuseie-o com cuidado!! Realizar em conjunto com a prática 06. · Identificação de pH Para determinar o pH de soluções usamos indicadores e uma tabela de pH. Os valores da escala (0-14) referem-se as proporções de H+ e de OH- presentes na solução. 06 - Molhar as fitas de papel tornassol nas soluções químicas separadas e misturadas utilizadas nas práticas anteriores (04 e 05). Observar a coloração das fitas e explicar. Relatório: Entregar ao final da aula. Observar todas as lâminas nas objetivas de 4x, 10x e 40x. Desenhar com a objetiva de 40x, identificando as estruturas celulares observadas. Identificar os amiloplastos e a morfologia dos grãos de amido. Identificar as bolsas de óleo ou depósitos de lipídios e verificar se a concentração de lipídios é a mesma em todas a sua extensão.