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Aspectos químicos e analíticos

Gabriela Duarte DiasLuryê Soria

Rafaela RodriguesSamara Dias

Nutrição Matutino 2013

Universidade de São PauloBromatologia básica – FBA-201

Agenda• Introdução

• Propriedades físico-químicas das vitaminas

hidrossolúveis

• Principais métodos de análises das

vitaminas hidrossolúveis

• Conclusão

• Considerações Finais

• Referências

Introdução

Ácido ascórbico Vitamina C

Poderoso agente redutor o qual é oxidado muito rapidamente

TiaminaVitamina B1

• Propriedades físico-químicas

RiboflavinaVitamina B2

• Propriedades físico-químicas

NiacinaVitamina B3

Ácido nicotínico Nicotinamida

• Propriedades físico-químicas

O triptofano é metabolizado a niacina

PiridoxinaVitamina B6

CianocobalaminaVitamina B12

Grupo de estruturas complexas

• Propriedades físico-químicas

Biotina• Propriedades físicas e químicas:

Ácido Pantotênico

• Propriedades físicas e químicas:

Ácido Fólico

• Propriedades físicas e químicas:

Método Fluorimétrico

• Descrição do método: Técnica utilizada na

determinação qualitativa ou quantitativa

de substâncias nas quais ocorre o fenômeno

da fluorescência

Vitaminas analisadas pelo método

Vitamina C

Tiamina (Vitamina B1)

Riboflavina (Vitamina B2)

Método Microbiológico• Princípio: uso da vitamina como micronutriente essencial

para microrganismos cultivados• De acordo com o crescimento da cultura de bactérias,

determina-se a quantidade de vitamina da amostra• Pode ser usado para todas as vitaminas do complexo B

• Algumas das espécies utilizadas são: Enterococcus faecalis, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus casei

Método CLAE• Descrição do método: técnica utilizada

para a separação dos componentes de uma mistura, através da distribuição dos componentes entre uma fase estacionária e uma fase móvel, pela afinidade das substâncias com cada fase.

Vitaminas analisadas pelo método

Vitamina C

Tiamina (Vitamina B1)

Riboflavina (Vitamina B2)

Niacina (Vitamina B3)

Piridoxina (Vitamina B6)

Ácido Fólico

Ácido Pantotênico

Biotina

Método CLAE

Cromatografia Normal

Cromatografia de Fase Reversa

Fase Estacionária Polar Apolar

Fase Móvel Apolar Polar

Compostos com maior tempo de retenção

Polares Apolares

Método Espectrofotométrico• Descrição do método: Método analítico que se baseia na

interação da matéria com a energia radiante• A absorbância é proporcional à concentração da espécie

química absorvente

Vitamina analisada pelo método

Vitamina C

• O método CLAE é o mais utilizado para a análise de vitaminas hidrossolúveis apesar de seu alto custo

• Existem métodos mais baratos que também são eficazes (ex: Microbiológico)

Conclusão

Considerações Finais

Referências• GREENFIELD. H., SOUTHGATE, D.A.T. Food composition data:

Production, management and use. 2ed. Food and Agriculture Organization of United Nations (FAO), Rome, 2003. Cap 7: Review of methods of analysis (p. 127-147 )

• PENTEADO, M.V.C. Vitaminas: aspectos nutricionais, bioquímicos, clínicos e analíticos. Barueri: Manole, 2003

• SANTOS, Diego Ives de Vilas Boas; GIL, Eric de Souza. FLUORIMETRIA NA ANÁLISE FARMACÊUTICA: UMA REVISÃO. Revista Eletrônica de Farmácia, Goiânia, n. , p.01-16, 02 mar. 2010

Obrigada !

Método Fluorimétrico

Vitaminas Particularidades

Ácido Ascórbico Vitamina C

• Utilizado na ausência de ácido eritórbico• Oxidação: ácido ascórbico + ácido dehidroascórbico + o-

fenilenodiamina = derivado fluorescente• Mede as duas formas ativas do ácido ascórbico

Tiamina Vitamina B1

• Oxidação a tiocromo em meio alcalino, pois a tiamina não é naturalmente fluorescente

Riboflavina Vitamina B2

• Apresenta fluorescência, portanto não há necessidade de derivatização

Método Microbiológico

Vitaminas Particularidades

TiaminaVitamina B1

• Procedimento de extração de modo que a tiamina seja obtida na forma livre• Lactobacilus fermentum

RiboflavinaVitamina B2

• Lactobacilus casei• Enterococcus faecalis• Ensaio turbidimétrico

NiacinaVitamina B3

• Lactobacilus plantarum• Não consegue diferenciar entre ácido nicotínico e nicotinamida

PiridoxinaVitamina B6

• Saccharomyces carlsbergensis• É necessário que as vitaminas estejam na forma livre

CianocobalaminaVitamina B12

• Lactobacillus leichmanii• Tamponamento• Leitura da absorbância de luz UV

Biotina• Lactobacillus plantarum• “Quantificação” através da turbidimetria ou da titulação

Ácido Pantotênico• Extração prévia com éter para retirar os ácidos graxos• Lactobacillus plantarum

Ácido FólicoVitamina B9

• Uso de ácido ascórbico• Lactobacillus rhamnosis

Método CLAE

Vitaminas Particularidades

TiaminaVitamina B1

• Preferível detecção em fluorescência

RiboflavinaVitamina B2

• Purificação do extrato antes da injeção do cromatógrafo

NiacinaVitamina B3

• Não há particularidades

Vitamina B6• Resultados mais confiáveis e mais sensíveis do que o

microbiológico

CobalaminaVitamina B12

• Não há particularidades

Biotina• Extração preliminar com ácido seguido por tratamento com

papaína