universidade federal do rio grande do norte centro de biociências programa de … ·...
TRANSCRIPT
Universidade Federal do Rio Grande do Norte
Centro de Biociências
Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas
PPGCB
FELLIPE ALBANO MELO DO NASCIMENTO
Padronização e implementação do uso de armadilhas de
oviposição nas ações de monitoramento do mosquito Aedes
aegypti (Diptera: Culicidae) no município de Natal, RN.
Natal-RN
2017
1
FELLIPE ALBANO MELO DO NASCIMENTO
PADRONIZAÇÃO E IMPLEMENTAÇÃO DO USO DE
ARMADILHAS DE OVIPOSIÇÃO NAS AÇÕES DE
MONITORAMENTO DO MOSQUITO AEDES AEGYPTI (DIPTERA:
CULICIDAE) NO MUNICÍPIO DE NATAL, RN.
Dissertação apresentada ao Programa de
Pós-Graduação em Ciência Biológicas,
curso de Mestrado, da Universidade
Federal do Rio Grande do Norte como
requisito para a obtenção do grau de
mestre em ciências biológicas.
Orientadora: Profa. Dra. Renata Antonaci
Gama.
Natal-RN
2017
2
Nascimento, Fellipe Albano Melo do.
Padronização e implementação do uso de armadilhas de oviposição
nas ações de monitoramento do mosquito Aedes aegypti (Diptera:
Culicidae) no município de Natal, RN / Fellipe Albano Melo do Nascimento. - Natal, 2017.
59 f.: il.
Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal do Rio Grande do
Norte. Centro de Biociências. Programa de Pós-Graduação em Ciências
Biológicas. Orientadora: Profa. Dra. Renata Antonaci Gama.
1. Aedes aegypti - Dissertação. 2. Ovitrampa - Dissertação. 3.
Infusão - Dissertação. 4. Natal - Dissertação. I. Gama, Renata Antonaci. II. Universidade Federal do Rio Grande do Norte. III.
Título.
RN/UF/BSE-CB CDU 614.4
3
DEDICATÓRIA
Dedico a elas, as mulheres da minha vida, que foram meu alicerce, minha motivação,
minha inspiração. Que ouviram os meus temores, que compartilharam das minhas
alegrias, que sofreram junto comigo cada decepção, e que recebem da mesma forma
esse título de mestres da vida.
Amo vocês!
4
AGRADECIMENTOS:
Primeiramente a Deus que com sua infinita bondade e graça me permitiu
mais uma conquista.
A minha grande orientadora, Renata Antonaci, que mais que uma mestra
se tornou uma amiga, que abriu as portas do seu laboratório para mim, ainda quando
aluno de graduação, e depositou toda a sua confiança durante esses 5 anos.
Aos meus colegas e por que não amigos de laboratório, que durante todo
esse período, ou em um período mais curto compartilharam do conhecimento, das
gargalhadas, das angustias, dos lanches nas reuniões de laboratório. São eles:
Alessandra Campus, Paula Tissot, Renato Freire, Taina Baía, Marjore Lorena,
Jucélia Medeiros, Jéssica Jales, Raíssa Cortês, Larissa Gabriela e Camila Leite.
Não poderia esquecer da minha família, em especial a minhas duas
guerreiras, Maria Isma (Vó) e Ziandra Albano (Mãe) que sempre fizeram o possível
e o impossível para que meus sonhos fossem realizados.
A minha princesa (Lorena Raquel) que nos momentos mais angustiantes
desse trajeto foi meu porto-seguro, minha conselheira, minha motivação.
Por fim, mas não menos importante, aos professores Bruno Bellini
(banca examinadora da qualificação), Josélio Araújo e ao Wanderli Tadei por
aceitarem participar desse momento tão impar em minha vida.
A todos meus sinceros agradecimentos.
5
“E sabemos que todas as coisas contribuem juntamente para o bem daqueles
que amam a Deus, daqueles que são chamados segundo o seu propósito”.
(Romanos 8:28)
6
RESUMO
A ovitrampa, ou armadilha de oviposição, é uma das ferramentas
preconizadas pelo Ministério da Saúde como complemento aos métodos de
vigilância do Aedes aegypti. Essa armadilha visa à coleta de ovos de A. aegypti
E sua eficiência pode ser potencializada pelo acréscimo de infusões orgânicas.
O objetivo do presente estudo foi de padronizar a aplicação dessa metodologia
de monitoramento para o município de Natal-RN nas ações de monitoramento
do A. aegypti. Para isso foram realizados testes de padronização do raio de
instalação das ovitrampas, onde foram testados os raios de 150 e 300 metros
em dois bairros de Natal (Tirol e Quintas). Também foram realizados testes de
atratividade de infusões de capim, folhas de caju, feno e água (controle) em
laboratório e campo. Em laboratório os testes foram feitos com 100 fêmeas de
A. aegypti (10 em cada gaiola) com duração de 3 dias. No Campo foram
utilizadas 36 ovitrampas, distribuídas na UFRN, onde foram monitoradas durante
10 dias havendo a contagem dos ovos e troca das palhetas, diariamente. Como
resultado do melhor raio, foi visto que não houve diferença significativa entre as
distâncias para nenhum índice pesquisado (IDO, IPO, IMO). Quanto os testes
com as infusões, em laboratório a quantidade de ovos na infusão de caju foi
maior do que todos os outros tratamentos, em campo o feno foi o melhor
tratamento, mas não demonstrou diferença estatística com a água, somente com
as demais, e não foi observada diferença entre os dias de postura. Diante disso,
sugere-se o uso da armadilha a cada 300m contendo apenas água em seu
interior.
Palavras-Chave: infusão; ovitrampa; Aedes aegypti; Natal.
7
ABSTRACT
The ovitrap, or oviposition trap, is one of the tools recommended by the Ministry
of Health as a complement to the methods of surveillance of Aedes aegypti. This
trap is for the collection of eggs of A. aegypti. The efficiency of this trap can be
enhanced by the addition of organic infusions. The objective of the present study
was to standardize the application of this monitoring methodology for the city of
Natal-RN in the monitoring actions of A. aegypti. For this, tests were performed
to standardize the installation radius of the ovitraps, where distances of 150 and
300 meters were tested in two districts of Natal (Tirol and Quintas), these
distances were alternated weekly for 2 months (July and August). Infusion
attractiveness tests were performed in laboratory and field. The infusions tested
were: grass, young leaves of cashew, hay and water, as control. In the laboratory
the tests were done with 100 females of A. aegypti (10 in each cage), with
duration of 3 days. The field was used 36 ovitraps, distributed in the UFRN, where
they were monitored for 10 days, counting the eggs and changing the straws
daily. As a result of the best radius, it was seen that there was no significant
difference between the distances for any index searched (IDO, IPO, IMO). About
the infusion tests, in the laboratory the amount of eggs in the cashew infusion
was higher than all other treatments. In the field, the hay was the best treatment,
but did not show statistical difference with water, only with the others, and no
difference was observed between the days of laying.
Keywords: infusion; Ovitrap; Aedes aegypti; Natal.Standardization.
8
Sumário
1. Introdução......................................................................................................10
1.1. Família Culicidae........................................................................................10
1.2. Aspectos gerais do Aedes aegypti..............................................................13
1.3. Epidemiologia.............................................................................................14
1.3.1. Dengue....................................................................................................14
1.3.2. Zika..........................................................................................................16
1.3.3. Chikungunya............................................................................................19
1.4. Vigilância epidemiológica e monitoramento................................................21
1.5. Ovitrampa...................................................................................................23
2. Justificativa....................................................................................................25
3. Objetivos.......................................................................................................28
3.1. Geral...........................................................................................................28
3.2. Específicos.................................................................................................29
4. Metodologia...................................................................................................29
4.1. Área de estudo...........................................................................................30
4.2. Padronização do raio de instalação das armadilhas..................................32
4.3. Preparo das infusões..................................................................................34
4.4. Criação e manutenção da colônia em laboratório......................................36
4.5. Ensaios em laboratório...............................................................................37
4.6. Ensaios em campo.....................................................................................38
5. Análise estatística.........................................................................................39
6. Resultados....................................................................................................39
7. Discussões....................................................................................................44
8. Conclusão .....................................................................................................50
9. Referências bibliográficas..............................................................................51
9
Lista de Imagens
Figura 1- Larva de culicídeo..............................................................................11
Figura 2- Formas adultas...................................................................................11
Figura 3- Fêmeas de Aedes aegypti..................................................................13
Figura 4-Ovitrampa............................................................................................23
Figura 5-Mapa da vulnerabilidade dos bairros de Natal....................................31
Figura 6- Mapeamento das ovitrampas no bairro das Quintas.........................33
Figura 7- Mapeamento das ovitrampas no bairro de Tirol.................................33
Figura 8-Infusões armazenadas em garrafas Pet. ...........................................36
Figura 9-Gaiolas de acrílico teladas utilizadas durante os testes......................37
Figura 10- Ensaios em laboratório.....................................................................37
Figura 11- Ensaios em campo ......................................................................... 38
Figura 12- Palhetas utilizadas como superfície de oviposição..........................38
Figura 13- Gráfico de Médias de ovos para cada distância avaliada................40
Figura 14- Gráfico do IPO do bairro das Quintas..............................................40
Figura 15- Gráfico do IDO do bairro das Quintas..............................................40
Figura 16- Gráfico do IPO do bairro de Tirol.....................................................41
Figura 17- Gráfico do IDO do bairro de Tirol.....................................................41
Figura 18- Mapa de grau de infestação por bairro............................................48
10
1. INTRODUÇÃO
1.1- Família Culicidae
A Família Culicidae, pertencente a ordem Diptera, é o mais abundante
e diversos grupo, considerado um grupo cosmopolita, porém, ao mesmo tempo
que são mais diversos, o conhecimento sobre esse grupo é um tanto limitado em
ambientes de florestas tropicais (HARBACH & HOWARD, 2007). Atualmente são
formalmente conhecidas aproximadamente 3.610 espécies de culicídeos em
todo o mundo e no Brasil há aproximadamente 470 espécies registradas
(GUEDES, 2012).
Essa grande diversidade no território brasileiro, é possível graças ao
Brasil ser um dos países com maior diversidade de ecossistemas do planeta,
que é reflexo de sua ampla extensão latitudinal, características climatológicas e
a posição geográfica gerando megadiversidade entre muitos grupos de animais
e vegetais (LOYOLA et al. 2007).
Os culicídeos são insetos de corpo delgados, de pernas longas e com
um aparelho bocal do tipo picador-sugador, além disso, apresentam grande
parte do corpo coberto por escamas. Suas formas imaturas, as larvas, são
aquáticas e distinguem-se de outros insetos pela ausência de apêndices
locomotores, apresentando uma cabeça, tórax e abdômen, e um par de
aberturas respiratórias (subfamília Anophelinae) ou um sifão alongado
(subfamília Culicinae) localizados próximo da extremidade do abdômen
(HARBACH & KITCHING, 1998; REINERT et al, 2004, 2006) (Figura 1).
11
Atualmente, essa Família subdivide-se em duas subfamílias:
Anophelinae e Culicinae. Distinguem-se quanto à posição que ficam ao pousar
(Figura 2), uma vez que os mosquitos pertencentes a subfamília Anophelinae
pousam com o corpo e a probóscide em linha reta, quase em ângulo reto com o
substrato, enquanto que os pertencentes a subfamília Culicinae pousam quase
paralelamente ao substrato. Além disso, possuem diferenças quanto a
morfologia dos palpos, sendo observado fêmeas de palpos longos e machos com
o último seguimento dos palpos clavado em Anophelinae, enquanto que em
Culicinae é observada a presença de palpos curtos nas fêmeas e os machos
com o último segmento dos palpos não clavado (CONSOLI & OLIVEIRA, 1994).
Essas duas subfamílias possuem várias espécies de relevância
médica, uma vez que as fêmeas desses grupos são hematófagas, podendo ser,
Figura 1- A- Culicinae; B- Anophelinae; S= sifão; Barras de escala 5 0,1 mm.
Fo
nte
: C
ON
SO
LI &
OLIV
EIR
A,
1994
Figura 2- Fêmeas adultas das subfamílias Culicinae e Anophelinae.
Fo
nte
: w
ikib
ooks.o
rg
12
no caso de algumas espécies, antropofílicas (FORATTINI, 2002). Esses dípteros
são considerados fitófagos, machos e fêmeas, porém, as fêmeas apresentam
um hábito hematófago essencial para a fecundidade e maturação dos ovos, onde
a quantidade de sangue ingerido é um fator determinante no número de ovos
que terão sucesso (CLEMENTS,1963; BRIEGEL, 1985).
O primeiro indício da importância médica desses artrópodes surge a
partir do final do século XIX, quando várias doenças tiveram seus ciclos
esclarecidos, período que ocorre a descoberta, por Patrik Mason, do papel dos
mosquitos na transmissão de Wuchereria bancrofti, marcando o ponto de partida
da Entomologia Médica, desde então foram esclarecidos os vetores de doenças
como malária, peste, doença do sono, entre outras (MARCONDES, 2009).
1.2- Aspectos gerais do Aedes aegypti
O gênero Aedes é considerado um gênero cosmopolita com
aproximadamente 931 espécies descritas (WILKERSON et al, 2015). O Aedes
aegypti, umas das espécies que mais se destacam nesse grupo devido sua
importância médica e epidemiológica, sendo vetor dos vírus Dengue, Zika e
Chikungunya. Apresenta características morfológicas bem peculiares. Sua forma
adulta caracteriza-se por exibir uma coloração escura ou praticamente negra,
podendo variar em suas tonalidades desde um marrom claro. Em seu escudo,
localizado na região dorsal convexa no tórax, destacam-se escamas prateadas
disposta em linhas longitudinais que forma um desenho que é comparado à uma
“lira”- instrumento musical (FORATTINI, 2002) (Figura 3).
13
É uma espécie exótica oriunda do continente africano, chegou ao
continente americano por meio das grandes navegações, onde, em seus
ambientes primários, desenvolveu um significante grau de sinantropia (GOMES,
1998). Acredita-se que o A. aegypti evoluiu tornando-se antropofílico no
continente africano, originando à subespécie A. aegypti aegypti, sendo
encontrados até hoje os descendentes dessa linhagem tanto na África ocidental,
quanto no resto do mundo (CRAWFORD et al, 2017).
Como a maioria das espécies sinantrópicas, a dispersão dessa
espécie aconteceu de forma muito rápida levando, atualmente, a uma extensa
distribuição geográfica. Além disso, é possível destacar o crescimento
desordenado dos centros urbanos como um fator crucial para essa acentuada
distribuição (TEXEIRA et al, 1999).
Vale ressaltar que a distribuição e abundância dessa espécie são
diretamente influenciadas pelo clima, por exemplo, em regiões que apresentam
baixa umidade, geralmente verifica-se uma redução significativa da oviposição
das fêmeas desse vetor (CANYON et al, 1999). Além disso, são observados
padrões sazonais na atividade de oviposição de populações de A. aegypti,
Figura 3- Fêmea de Aedes aegypti;
word
lesste
ch.c
om
14
quando relacionados a condições ambientais, em regiões subtropicais,
intensificando ainda mais sua expansão (VEZZANI et al, 2004).
1.3- Epidemiologia
1.3-1. Dengue:
O vírus da dengue foi isolado na década de 1940 por Kimura e Hotta,
que denominaram a cepa de Mochizuki. Um ano depois, Sabin e Schlosinger
isolaram a cepa Havaí, onde, nesse mesmo ano, Sabin isolou outro vírus em
Nova Guiné, percebendo que os vírus tratavam de sorotipos de um mesmo vírus,
classificando as primeiras cepas de sorotipo 1 e a da Nova Guiné de sorotipo 2.
Anos depois, mais especificamente em 1956, os sorotipos 3 e 4 foram isolados
no Sudeste Asiático (Martinez-Torres, 1990). Surpreendentemente em 2013 um
novo sorotipo foi identificado em amostras colhidas em um surto no Estado de
Sarawak, na Malásia por Nikos Vasilakis, o novo sorotipo apresenta uma
sequência genética diferente dos sorotipos já conhecidos (NORMILE, 2013).
Essa doença tem como agente etiológico um vírus da família
Flaviviridae e do gênero Flavivirus (TAUIL, 2001). Atualmente, em todo mundo,
aproximadamente 2,5 bilhões de pessoas vivem em áreas de risco de
transmissão do vírus da dengue, principal arbovirose transmitida pelo A. aegypti.
Com o desenvolvimento das cidades e de vários centros urbanos em regiões
emergentes a incidência de Dengue cresceu 30 vezes nos últimos 30 anos,
devido à expansão geográfica desse vetor, ocasionando o ressurgimento da
Dengue e da Dengue Grave, sendo os seres humanos os principais
responsáveis por essa expansão (OMS, 2016). A dengue não grave foi
15
caracterizada pela presença ou não de sinais de alerta, enquanto que a forma
grave pode apresentar sintomas como síndrome do choque por dengue e a
dengue hemorrágico, podendo evoluir para óbito (CAVALCANTI, 2011).
No Brasil, a primeira epidemia de dengue que se tem registro ocorreu
no estado de Roraima em Boa Vista, nos de 1981 e 1982, onde foram isolados
os sorotipos 1 e 4. Desde então, esse estado sempre apresentou os maiores
índices incidência do país, sendo considerado como um estado hiperendêmico
(GUBLER,1998). Em 1986 foi registrada a primeira epidemia de dengue no
Estado do Rio de Janeiro com a circulação do sorotipo 1 do vírus, que alcançou
em pouco tempo a região Nordeste. A partir desse episódio a doença passa a
ter importância epidemiológica em nosso país (SILVA, 2002).
Em todo o mundo, a doença atinge cerca de 50 milhões de casos
confirmados por ano, chegando a 500.000 hospitalizações e 20.000 mortes. Com
relação a esses números, 95% de todos os casos de dengue grave são
acometidos em crianças menores de 15 anos (OPAS/OMS, 1999). No continente
americano tem-se visto o aumento mais dramático na atividade de dengue das
últimas décadas, principalmente no Brasil, Cuba, Colômbia, Peru, Equador e
Paraguai (DÍAZ-QUIJANO et al,2006)
A reinfestação do território brasileiro pelo vetor A. aegypti é
considerado como desencadeadora da ocorrência de dengue no Brasil, isso
devido a sua acentuada preferência desse culicídeo por recipientes contendo
água relativamente limpa, ou até mesmo ambientes poluídos (CLEMENTS,
1999).
16
Segundo o Ministério da Saúde (2016), até a 32ª Semana
Epidemiológica (SE) foram registrados 1.426.005 casos prováveis de dengue no
Brasil. Nesse mesmo período, a região sudeste foi a que registrou o maior
número de casos, cerca de 59%, totalizando 841.286 casos prováveis com
relação ao total do país. A região com a segunda maior soma de casos foi o
Nordeste, somando 310.161 casos prováveis (21,8% do total nacional), seguido
do Centro-Oeste e Norte, 11,5% e 2,6% respectivamente.
Segundo a Secretária Municipal de saúde (2016), até a 39º semana
epidemiológica de 2016, no município de Natal foram registrados 12.997 casos
notificados de Dengue. A região administrativa leste apresenta a maior
incidência de casos de dengue. Considerando a distribuição espacial, oito
bairros estão com alta incidência de casos de dengue. Seis estão localizados no
distrito sanitário leste e dois no distrito oeste.
1.3-2. Zika:
O Zika vírus (ZIKV) foi descoberto em 1947 em Uganda, na África,
classificado como pertencente ao gênero Flavivírus. O vírus pode causar, em
20% dos humanos adultos, uma infecção leve, que leva a uma febre que varia
de 37,8ºC e 38,5ºC, surgimento de erupção maculopapular, dores de cabeça
retro-ocular, dor nas articulações e na maioria dos casos conjuntivite, que podem
durar de 3 a 7 dias (OEHLER et al., 2014)
A manifestação da doença foi vista pela primeira vez em humanos em
1953 na Nigéria, até então desconhecida pelos profissionais da saúde, quando
a infecção viral foi confirmada em três pessoas (MacNAMARA, 1954). Nesse
17
período não se havia registrado nenhum surto da doença, até um surto em 2007
em várias ilhas no estado de Yap, estados federados da Micronésia,
surpreendendo a todos e resultando em aproximadamente 5.000 infeções em
uma população estimada em 6.700 habitantes (DUFFY, 2009).
O Zika foi registrado pela primeira vez no continente americano em
março de 2015, em um surto da doença no Estado da Bahia, Nordeste do Brasil
(CAMPOS, 2015). Até o final de 2015 já haviam sido notificados casos
autóctones em pelo menos 17 estados do Brasil, segundo o Ministério da Saúde
(2015). Em 2016, até a 37ª semana epidemiológica, foram registrados 200.465
casos prováveis de febre pelo vírus Zika no país (taxa de incidência de 98,1
casos/100 mil hab.), distribuídos em 2.288 municípios, tendo sido confirmados
109.596 (54,8%) casos de acordo com o Ministério da Saúde (2016).
Uma possível relação entre o vírus Zika e a ocorrência de microcefalia
congênita em recém-nascidos foi observada pela primeira vez no Brasil. Dentre
os 35 casos da deformação em recém-nascidos, todas as mães residiam ou
haviam visitado uma área com a circulação do vírus. Em fevereiro de 2016, a
OMS afirmou a um grande aumento na propagação do vírus Zika associado, até
então sem nenhuma explicação, ao surgimento e crescimento de inúmeros
casos de microcefalia congênita e a síndrome de Guillain-Barré (OMS, 2016).
Desde então, tem-se observado uma relação temporal e geográfica entre a
síndrome de Guillain-Barré, Menigoencefalite e mielites e os surtos do vírus no
Pacífico e do continente americano (OEHLER et al, 2014; ROZÉ et al, 2016;
CARTEAUX et al, 2016).
18
Estudos realizados em 2016 comprovam a relação do Vírus Zika e a
ocorrência de microcefalia em recém-nascidos. Neles foi possível observar a
partir de relatos de casos onde a infecção materna foi documentada, que
exposição ao vírus ocorreu entre a 7º e 13º semana de gestação, havendo casos
que ocorreram na 18º semana (BRASIL et al, 2016; MLAKAR et al, 2016).
No ano de 2015, até a 36ª SE foram notificados 8.006 casos suspeitos
de zika vírus, em 2016 no mesmo período foram notificados 5.641, apresentando
um maior número de casos na 11ª SE no Estado do Rio Grande do Norte. Dos
casos notificados, foram confirmados 97 em 2015 e 160 em 2016. Foi observada
uma redução importante no número de notificação de ZIKV nas últimas semanas
epidemiológicas segundo a Secretária Estadual de Saúde (2016).
Até a 32º semana epidemiológica de 2016, foram confirmados
laboratorialmente 3 óbitos por vírus Zika no Brasil: em São Luiz-MA (1 óbito),
Benevides-PA (1 óbito) e em Serrinha-RN (1 óbito), onde as vítimas tinham uma
média de 20 anos de idade. Além disso, foram registrados 196.976 casos
prováveis de febre pelo vírus Zika, distribuídos em 2.277 municípios, onde foram
confirmados 101.851 casos (BRASIL, 2016).
1.3-3. Chikungunya
O vírus Chikungunya (CHIK) é mais um arborvírus transmitido pelo
mosquito A. aegypti, porém, diferente dos vírus da Dengue e Zika, ele pertence
ao gênero Alphavirus (Família Togaviridae), caracterizado por apresentar um
genoma de RNA de cadeia simples e por ser sensível à dessecação e a
19
temperaturas acima de 58º C (KHAN et al, 2002). O vírus CHIK foi isolado pela
primeira vez em 1953 na Tanzânia (LUMSDEN, 1955).
O homem é seu principal reservatório durante os períodos
epidêmicos. Em períodos não epidêmicos foi observado a existência de um ciclo
silvestre no continente africano onde macacos, pássaros e roedores podem ser
reservatórios, havendo também a participação de outros mosquitos na
transmissão. Porém, somente quando o bando apresenta queda na imunidade
que há a ocorrência de surtos em macacos, mas não ocorrem manifestações
clínicas nesses animais (INOUE, 2003).
Desde 2004 é possível observar uma alta disseminação do vírus CHIK
por inúmeros países, onde, provavelmente, a expansão do transporte aéreo tem
contribuído significativamente para o aumento da dispersão viral (NUNES et al,
2014). No continente americano, o primeiro relato de transmissão de CHIK
autóctone foi registrado no final do ano de 2013, sendo observado, a partir de
então, transmissão autóctone em no mínimo 33 países, onde no Haiti foram
registrados durante as 23 primeiras semanas de 2014 um total de 39.343 casos
suspeitos de febre Chikungunya (REPÚBLICA DOMINICANA, 2013; HAITI,
2014)
Como principais sintomas da doença, o paciente costuma
desenvolver febre elevada, artralgias, mialgias, tontura, náuseas, fotofobia por
um período que pode chegar a sete dias, porém, muitos pacientes acabam
desenvolvendo uma forma subaguda da doença, ou até mesmo uma fase crônica
que pode variar de semanas a meses levando a casos de artrite e artropatias
severas (SISSOKO et al, 2009).
20
A doença teve seus primeiros casos autóctones no território brasileiro
em setembro de 2014, em Oiapoque, no estado do Amapá (TEXEIRA et al,
2015). No ano de 2015 foram registrados um total de 38.332 casos prováveis de
febre Chikungunya, distribuídos em 696 municípios, sendo confirmados seis
óbitos causados pelo vírus. Já em 2016, esse número aumentou seis vezes só
nas primeiras 37 semanas epidemiológicas, chegando a um total de 236.287
casos prováveis. Destes possíveis casos, 116.523 foram confirmados da doença
e um total de 120 óbitos, distribuídos em 2.297 municípios, sendo os estados do
Rio Grande do Norte, Pernambuco e Alagoas os que apresentam as maiores
taxas de incidência da doença.
No Estado do Rio Grande do Norte, no ano de 2015, da semana
epidemiológica 01 a 36 foram notificados 4.506 casos de Chikungunya, sendo
confirmados no mesmo período apenas 08 casos. Já em 2016, no mesmo
período foram notificados 25.542, sendo confirmados 7.167 casos (critérios
laboratoriais, clínicos e epidemiológicos), apresentando uma taxa de incidência
de 742,06 casos/100 mil habitantes, de acordo com a secretária Estadual de
Saúde (2016).
1.4- Vigilância epidemiológica e monitoramento
Além do ZIKV, o gênero Flavivírus também comporta os vírus Dengue,
Febre Amarela, Febre do Nilo Ocidental e Febre e Encefalite Equina Oriental
(MLERA et al., 2014).
Desde a década de 60 que a utilização da vigilância tem sido
amplamente abordada, levando a sua afirmação como instrumento eficaz para
ações e monitoramento da saúde pública (WALDMAN, 1998). Com o passar dos
21
anos, muitas definições foram dadas a essa ferramenta e Segundo Gomes
(2002) a vigilância epidemiológica pode ser definida como:
“A contínua observação e avaliação de informações
originadas das características biológicas e ecológicas dos vetores, nos
níveis das interações com hospedeiros humanos e animais reservatórios,
sob a influência de fatores ambientais, que proporcionem o conhecimento
para detecção de qualquer mudança no perfil de transmissão das
doenças. Tem a finalidade de recomendar medidas de prevenção e
controle dos riscos biológicos, mediante a coleta sistematizada de dados
e consolidação no Sistema de Informação da Vigilância Ambiental em
Saúde. ”
A partir de alguns estudos foi possível observar que os programas de
vigilância para artrópodes de importância médica dependem muito da
sensibilidade da metodologia para obter sucesso em sua implantação (BRAGA
et al., 2007). Com isso, entende-se que a escolha de métodos de coletas mais
eficientes pode trazer grandes diferenças nos resultados do monitoramento.
Atualmente no Brasil, a prevenção de arbovirose transmitidas pelo A.
aegypti se dá por meio do monitoramento e controle desse vetor, porém a
metodologia utilizada, busca ativa de imaturos, apresenta baixa eficácia e altos
custos econômicos aos gestores públicos (BARSANTE, 2012). O Levantamento
de Índice Rápido (LIRA), utilizado pelas equipes de monitoramento em todo país,
é realizado por meio da pesquisa larvária.
Porém, essa metodologia apresenta algumas limitações, entre elas:
não permite, na maioria das vezes, diferenciar as áreas quanto à infestação e a
chance de detecção de um domicílio positivo para larvas é significativamente
22
menor, uma vez que se trata de uma metodologia ativa que irá depender da
percepção do agente na busca do foco (BRAGA et al., 2000).
O LIRA consiste na vistoria de depósitos de água e outros recipientes
presentes nas residências e demais imóveis, como cemitérios, terrenos baldios,
ferros-velhos, entre outros, para a realização dos índices de infestação predial
(IIP) e de Breteau (IB), onde leva em conta apenas o número de imóveis positivos
e o outro os o número de imóveis e a quantidade de criadouros respectivamente.
A busca ativa de larvas é importante para a verificação dos impactos das
estratégias de controle da doença, direcionadas à eliminação das larvas dos
vetores, porém, essa metodologia não é eficaz para estimar o risco de
transmissão, embora seja o principal método usado com esse objetivo, sendo
realizados um total de 5 ciclos anuais do LIRA (NELSON, 1995).
Por outro lado, a utilização de outra metodologia de monitoramento
está demonstrando eficácia e já vem sendo usada em algumas cidades do País.
Armadilhas de oviposição estão sendo utilizadas como forma de monitoramento
sendo possível observar sua superioridade com relação ao método mais antigo
de monitoramento (SCHIFFINO De OLIVEIRA & MUSIS, 2014)
Com base nesses estudos, o Programa Nacional de Controle da
Dengue (PNCD) incorporou o uso de ovitrampas como uma possível
metodologia de monitoramento. Além disso, as ovitrampas possibilitam também
a coleta de grandes quantidades de ovos para criação de colônias em laboratório
para representatividade dos vetores de uma determinada localidade, com a
finalidade de realização de ensaios biológicos (LIMA, 2003).
1.5- Ovitrampa
23
Em 1966, Fay e Eliason desenvolveram a armadilha de oviposição,
conhecida como ovitrampa (Figura 4), que consiste em um recipiente preto
semelhante a um vasinho de boca larga, uma palheta de madeira com um dos
lados áspero colocado em seu interior e preenchido com água, deixando parte
da palheta para fora da água. Essa armadilha foi resultado de um estudo
realizado no ano de 1965, por Fay e Perry que buscava elucidar o
comportamento de oviposição da fêmea do mosquito.
Muitos estudos fizeram uso dessas armadilhas associadas a infusões
a base de diferentes materiais orgânicos como infusões de carvalho branco
(PONNUSAMY et al 2008), capim elefante (SANT’ANA et al, 2006) e a
frequentemente utilizada a base de feno (MACIEL-DE-FREITAS et al 2008;
CHADEE et al 1993), para melhorar o desempenho da armadilha, tornando-a
mais atrativa ao A. aegypti. Essa atração pode ser determinada pela
concentração de detritos orgânicos, variações na abundância e os tipos de
microrganismos (MURREL & JULIANO, 2008).
Figura 4- Ovitrampa e seus constituintes
Acerv
o p
róprio
NA
SC
IME
NT
O,
2016
24
A armadilha possibilita a determinação da densidade, dispersão
geográfica, frequência, dominância e sazonalidade, mas não é possível por meio
dela, quantificar o número de fêmeas que visitaram a ovitrampa (PASSOS et al.
2003). Além disso, desde o início de sua utilização, essa armadilha vem
demonstrando uma boa relação custo-benefício, ao ser sensível e econômica na
detecção do A. aegypti (BRAGA & VALLE, 2007).
Além de todas as possibilidades trazidas pelas ovitrampas, dados obtidos
com essa metodologia podem ser utilizados para monitoramento dos impactos
oriundos de vários tipos de medidas de controle que envolvam a redução do
vetor com inseticidas. Porém, embora as ovitrampas sejam muito eficazes para
verificação da presença e distribuição de fêmeas do vetor, não devem ser
usadas como ferramenta única para estimativa do risco de dengue (GOMES,
1998), como qualquer método de monitoramento.
A detecção de ovos nas palhetas permite calcular a infestação de um
local através de dois índices: o Índice de Positividade da Ovitrampa (IPO) e o
Índice de Densidade de Ovos (IDO). Ainda de acordo com Gomes (1998), o IPO
indica o percentual de armadilhas positivas, já o IDO está relacionado ao número
médio de ovos por armadilhas. Sendo assim, o IPO indica a distribuição espacial
da infestação, enquanto o IDO demonstra os períodos de maior e menor
reprodução das fêmeas do mosquito.
IPO =𝑁º 𝑑𝑒 𝑎𝑟𝑚𝑎𝑑𝑖𝑙ℎ𝑎𝑠 𝑝𝑜𝑠𝑖𝑡𝑖𝑣𝑎𝑠
𝑁º 𝑑𝑒 𝑎𝑟𝑚𝑎𝑑𝑖𝑙ℎ𝑎𝑠 𝑒𝑥𝑎𝑚𝑖𝑛𝑎𝑑𝑎𝑠𝑥100
𝐼𝐷𝑂 =𝑁º 𝑑𝑒 𝑜𝑣𝑜𝑠
𝑁º 𝑑𝑒 𝑎𝑟𝑚𝑎𝑑𝑖𝑙ℎ𝑎𝑠 𝑝𝑜𝑠𝑖𝑡𝑖𝑣𝑎𝑠
𝐼𝐷𝑂 =𝑁º 𝑑𝑒 𝑜𝑣𝑜𝑠
𝑁º 𝑑𝑒 𝑎𝑟𝑚𝑎𝑑𝑖𝑙ℎ𝑎𝑠 𝑝𝑜𝑠𝑖𝑡𝑖𝑣𝑎𝑠
25
2. JUSTIFICATIVA
É demonstrado em estudo que tanques, tambores, caixas d’água e
potes são possíveis criadouros do A. aegypti, onde é observada a preferência
por depósitos de alvenaria e de plástico (MARTINS et al, 2010). Porém, segundo
Forattini e Brito (2003) muitos desses reservatórios, mesmo contendo água limpa
e com o livre acesso pelas fêmeas do A. aegypti, não apresentam formas
imaturas desses mosquitos, gerando a hipótese da existência de algum fator de
atração contido em outros recipientes.
Essa variedade comportamental expressa pelas fêmeas nos
criadouros pode estar relacionada a fatores exógenos especialmente a chuva, a
temperatura, umidade relativa do ar, velocidade do vento (BENTLEY & DAY,
1989). A procura por esses criadouros para a oviposição envolvem respostas
olfativas, táteis e visuais, onde alguns trabalhos demonstram a preferência das
fêmeas de A. aegypti por substratos mais escuros (GOMES et al, 2006).
Em um estudo sobre a dispersão do A. aegypti (soltura e recaptura)
realizados no Brasil foi possível notar que as fêmeas podem se distanciar até
800 m do ponto de liberação em busca de sítios de oviposição (HONÓRIO et al,
2003). Por outro lado, a maioria dos estudos realizados demonstram uma
dispersão média de aproximadamente 100 m de distância (GETIS et al., 2003;
ORDONEZ-GOZALES, 2001).
Em um estudo realizado por Arduino e Ávila (2015), foi visto que
alguns aspectos físico-químicos presentes na água dos criadouros podem
determinar a preferência para oviposição e desenvolvimento dos imaturos.
26
Destacam-se entre esses fatores o volume da água, composição iônica, pH,
temperatura. Além disso, foi visto que o A. aegypti está se desenvolvendo em
água com certo grau de poluição, como em ralos, barcos e outros locais
contendo resíduos de várias substâncias como óleo, ferrugem, como também
sal, reforçando a caracterização da espécie como osmoconformista.
Entretanto, é importante salientar que essa escolha do criadouro é um
fator crítico para o ciclo-evolutivo desse mosquito, pois as suas formas imaturas
são incapazes de se deslocarem quando as condições do criadouro forem
desfavoráveis aos seus desenvolvimentos (SPENCER et al. 2002).
Segundo o que foi observado por Abreu et al (2015) as fêmeas do A.
aegypti demonstram dois padrões distintos de oviposição quanto à proporção de
ovos. De acordo com o estudo, algumas fêmeas botam cerca de 40% dos ovos
em um só local e espalha o restante em outros locais de reprodução, por outro
lado, outro grupo de fêmeas põem menos de 40% dos ovos em seu local favorito
e apresentam uma dispersão mais ampla do restante dos ovos em outros
criadouros. A presença ou ausência de larvas interespecíficas e
heteroespecíficas também se demonstraram como fatores relevantes e
determinantes na escolha do local de postura pelas fêmeas de A. aegypti
(GONZALEZ et al, 2015).
O mapeamento de áreas de risco em determinados territórios é a
grande finalidade dos programas que monitoram os fatores de risco biológico
que envolvem vetores de doenças. Com isso, aplica-se a vigilância entomológica
nas ações de controle, sendo elas biológicas, químicas, ou físicas, como também
nas relações com a vigilância epidemiológica quando relacionadas a disposição
27
dessas doenças e aos impactos resultantes dessas ações, de acordo com a
Fundação Nacional de Saúde (2002).
Atualmente, nos programas de controle de dengue no Brasil, a
vigilância entomológica é realizada, na maioria dos estados e municípios, por
meio da busca ativa e coleta de larvas, e a posterior aferição da densidade do A.
aegypti em áreas urbanas, conforme a proposta de Connor e Monroe em 1923.
Por outro lado, foi percebido a maior sensibilidade das ovitrampas, em
relação à pesquisa larvária, para o monitoramento do vetor (MARQUES et al,
1993). A partir de alguns estudos verificou-se também, ainda, que as ovitrampas
constituem uma metodologia muito eficaz para o estudo da dispersão do vetor
(HONÓRIO, 2003).
Para a utilização da metodologia de oviposição o Ministério da Saúde
(2009) preconiza que a instalação de uma ovitrampa deve acontecer a cada nove
quarteirões ou uma a cada 225 imóveis. Porém, decorrente da variabilidade das
dimensões e densidade de imóveis nos quarteirões, a distribuição das
armadilhas em um bairro por essa metodologia acaba não sendo homogênea,
podendo resultar em amostragens distintas de acordo com a localidade a ser
estudada. Com isso, há a necessidade de uma nova padronização para sua
utilização.
Como essas metodologias tratam da vigilância entomológica, é
necessário um olhar para a biologia e ecologia do vetor. Diante disso, observa-
se que entre os animais que melhor desempenham o sentido do olfato, os insetos
são mais bem-sucedidos quando se trata de empregar os odores para realização
de atividades, sendo fundamentais para a percepção de presas, seleção de
28
hospedeiros, defesa, escolha de parceiros, atividades sociais, escolha de
criadouros, entre outros comportamentos (VILELA & LÚCIA, 2001).
Muitos estudos de comportamento de oviposição de fêmeas de A.
aegypti utilizaram infusões para alcançar um melhor desempenho das
armadilhas de oviposição, sendo a infusão a base de feno a mais comum entre
as utilizadas (CHADEE et al 1993; MACIEL-DE-FREITAS et al 2008). Por meio
dessas informações o presente trabalho buscou a padronização dessa
metodologia para uma aplicação no município de Natal-RN, com base em
experiências anteriores demonstradas em outras cidades do país.
3. OBJETIVOS
3.1. Geral
Estabelecer um padrão mais eficiente de utilização da armadilha de
oviposição para o uso nas ações de monitoramento do mosquito Aedes
aegypti, no município de Natal-RN.
3.2. Específicos
3.2.1. Avaliar diferentes distâncias de instalação entre as ovitrampas no
monitoramento do A. aegypti;
3.2.2.Testar a eficiência de atração de diferentes tipos de infusões a
base de materiais orgânicos para fêmeas do mosquito;
4. METODOLOGIA
29
4.1. Área de estudo:
Atualmente, o município de Natal é subdivido em quatro Regiões
Administrativas de acordo com a Lei Ordinária Número 3.878/89, e são elas:
Região Administrativa Norte (RAN) composta pelos bairros de Lagoa Azul,
Pajuçara, Potengi, Nossa Senhora da Apresentação, Redinha, Igapó e Salinas;
Região Administrativa Leste (RAL) composto pelos bairros de Santos Reis,
Rocas, Ribeira, Praia do Meio, Cidade Alta, Petropólis, Areia Preta, Mãe Luiza,
Alecrim, Barro Vermelho, Tirol e Lagoa Seca; Região Administrativa Sul (RAS)
composta pelos bairros de Lagoa Nova, Nova Descoberta, Candelária, Capim
Macio, Pitimbu, Neópolis e Ponta Negra; e a Região Administrativa Oeste (RAO)
composta pelos bairros de Quintas, Nordeste, Dix-sept Rosado, Bom Pastor,
Nossa Senhora de Nazaré, Felipe Camarão, Cidade da Esperança, Cidade
Nova, Guarapes e Planalto (Figura 5).
30
Os bairros utilizados no estudo foram Quintas (RAO) e Tirol (RAL),
com altas e baixas vulnerabilidade e incidência de dengue respectivamente.
Quintas está presente na região Oeste da cidade e é caracterizado
por ser um bairro de classe média baixa. É um dos mais tradicionais na periferia
de Natal, e é tido como um ponto estratégico na geografia urbana da capital
potiguar, fazendo a ligação das zonas leste e sul da cidade com a zona norte.
Apresenta numerosas áreas de vilas e está localizado próximo a uma área de
manguezais, sendo muito comum áreas com pouco ou nenhum saneamento
básico, pavimentação asfáltica e coleta de lixo.
Figura 5- Mapa da vulnerabilidade dos casos de Dengue notificados em 2011 em todos os bairros de Natal.
Pre
feitura
do N
ata
l
NA
SC
IME
NT
O,
2016
31
Ao contrário do bairro Quintas, o bairro de Tirol está presente na zona
Leste de Natal, apresentando uma população de classe média e classe média
alta. Possui saneamento básico adequado, pavimentação asfáltica e coleta de
lixo adequada e um dos maiores IDH do município.
4.2. Padronização do raio de instalação das armadilhas
Para a padronização da instalação das ovitrampas, foram realizados
alguns testes. O estudo se iniciou com a avaliação de duas formas de instalações
das ovitrampas baseadas exclusivamente na distância entre elas. Diante disso,
houve a instalação das armadilhas a partir de uma distância pré-determinada
com o auxílio do software Arcgis 9.3, responsável também pela escolha dos
domicílios para as instalações que foi totalmente ao acaso e posteriormente
georreferenciado.
Foram então determinadas as distâncias de 150 e 300 metros entre
as ovitrampas, para os testes.
Figura 6- Mapeamento dos locais onde foram instaladas as
ovitrampas no bairro das Quintas em Natal, RN. Figura 7- Mapeamento dos locais onde foram instaladas as
ovitrampas no bairro de Tirol em Natal, RN.
32
Esses valores foram baseados em experiências de outras capitais
brasileiras como, por exemplo, Belo Horizonte que já utiliza uma metodologia
semelhante a aproximadamente 10 anos. Para evitar a influência dos fatores
intrínsecos (tamanho dos quarteirões, densidade populacional, densidade
vetorial) dos bairros na positividade das armadilhas e consequentemente na
escolha da metodologia de instalação, as duas metodologias foram avaliadas ao
mesmo tempo em cada bairro. Esses bairros foram divididos em duas áreas (de
mesmo tamanho), onde foram instaladas armadilhas com raio de alcance de
150 metros em uma e na outra com o raio de 300 metros (Figuras 6 e 7). A cada
semana essas áreas foram alternadas, e as áreas que apresentavam armadilhas
a cada 150 metros receberam a cada 300m e as que possuíam a cada 300
receberam a cada 150m. Essa metodologia piloto foi realizada durante 2 meses,
possibilitando a escolha da melhor distância de ovitrampas em Natal, uma vez
que essa ferramenta, até então, nunca havia sido utilizada no município como
rotina.
4.3. Preparo das infusões
Além da padronização do distanciamento na instalação das
ovitrampas, foi realizada a padronização da melhor infusão no que diz respeito
à eficiência de atratividade das fêmeas grávidas para a oviposição.
Para o preparo das infusões foram utilizados três tipos de materiais
orgânicos escolhidos com base em estudo anteriores (SANTANA et al,2006;
CHADEE et al 1993; MACIEL-DE-FREITAS et al 2008):
33
a. Capim colonião (Panicum maximum), espécie do gênero Panicum
originário do continente africano, encontrado, geralmente, em
margens florestais, em solos recém desmatados, como também
em pastagens sombreadas (EUCLIDES et al, 2008). As primeiras
sementes do capim colonião chegaram ao Brasil por meio dos
navios negreiros trazidos da África, onde eram utilizados como
camas (JANK et al, 2003). Segundo Souza et al (1996), o
Panincum caracteriza-se por apresentar uma boa produtividade e
alto valor nutritivo.
b. Folhas de caju (Anacardium occidentale), uma espécie de arbusto
que apresenta um tamanho que varia de 6 a 12 metros, com folhas
de coloração verde escura, tronco curto ocasionalmente tortuoso.
Esse espécime vegetal caracteriza-se por exibir propriedades
bactericida, fungicida, vermicida e amebicida, tornando-a uma
planta de ampla importância medicinal, além da importância
econômica oriunda do seu fruto (caju) muito utilizado na culinária,
na produção de xarope e bebidas alcolizada (ARBONNIER, 2002);
c. O feno que é produzido a base de capim colonião, no qual
apresenta, entre suas principais características para produção do
feno, uma alta relação folha:caule e a presença de caules finos,
que, além de terem um alto valor nutritivo, facilita o processo de
desidratação (LIMA & CUNHA, 2008).
34
Para cada infusão foram utilizadas 30 g dos materiais anteriormente
citados. Os materiais foram picados em pequenos pedaços e posteriormente
adicionados em garrafas Pet de 2 litros (Figura 8), completadas com água
mineral. Após esse procedimento, as infusões permaneceram armazenadas por
sete dias para que ocorresse a fermentação do material.
Após o período de uma semana, o material foi coado com o auxílio de
papel filtro e em seguida foram diluídas a 30% em água mineral para uso nos
ensaios (SANTOS, 2010). Essas infusões foram utilizadas tanto nos testes de
campo, quanto nos testes em laboratório.
4.4. Criação e manutenção da colônia em laboratório:
Para os testes em laboratório foi necessária a criação e manutenção
de uma colônia de A. aegypti. Para isso, foram coletados ovos com a utilização
de ovitrampas no Campus central da Universidade Federal do Rio Grande do
Norte (UFRN). Os ovos coletados foram colocados para a eclosão das larvas em
Figura 8-Infusões armazenadas em garrafas
Pet; A- Infusão de Caju; B- Infusão de Feno; C- Infusão de Capim.
B
Acerv
o p
róprio
NA
SC
IME
NT
O,
2016
A B C
35
recipientes plásticos de dimensões 8,5cm x 20cm x 29,5cm aproximadamente,
contendo água mineral, aproximadamente 800 ml.
As larvas foram alimentadas à base de ração de peixe (TetraMin) de
uma a duas vezes por dia. A água foi trocada sempre que aparentava certa
turbidez causada pela fermentação da comida ou pelos processos de ecdise dos
imaturos. Ao se tornarem pupas, as mesmas foram retiradas das bandejas e
inseridas no interior das gaiolas para sua emergência.
A criação foi mantida no insetário do Laboratório de Insetos e Vetores- CB-
UFRN sob condições controladas (± 27ºC, ± 80% UR e 12 h luz/ fotoperíodo).
Os adultos foram mantidos em gaiolas de acrílicos teladas com dimensões de
60x50x50cm e alimentados com solução de sacarose a 10%. Para a obtenção
de postura foram oferecidos repastos sanguíneos em camundongos
anestesiados, previamente aprovados pela Comissão de Ética no Uso de
Animais (CEUA) da Universidade Federal do Rio Grande do Norte pelo protocolo
N.º 023/2013. Para a realização do repasto, as fêmeas foram submetidas a um
período de 24 horas sem se alimentar da solução a base de sacarose a 10%e
posteriormente expostas ao camundongo, isso para garantir a realização do
repasto.
4.5. Ensaios em laboratório
A primeira etapa dos testes com as infusões foi realizada em
laboratório. O desenho experimental consistia na utilização de 10 fêmeas
ingurgitadas três dias após o repasto sanguíneo, a partir da geração F1 da
colônia para cada repetição do teste, num total de 10 repetições, somando
36
100 fêmeas de A. aegypti observadas. Cada gaiola recebia os três
tratamentos a serem testados, além da água como o controle.
As infusões e a água foram colocadas em recipientes plásticos de
100ml não os enchendo por completo, deixando uma superfície não submersa
pelos tratamentos e as forrando com papel filtro. O papel-filtro foi utilizado para
tornar a substrato mais áspero e atraente às fêmeas, além de facilitar a posterior
contagem dos ovos. Esses recipientes foram adicionados as gaiolas de testes
que eram feitas de acrílico com dimensões de 60x50x50 centímetros (Figura 9).
Os tratamentos foram dispostos em um quadrante, estando cada um em uma
das extremidades da gaiola (Figura 10).
Diariamente os papeis-filtro eram retirados para a contagem dos ovos
e adicionado papeis novos para as próximas posturas, além da renovação dos
papeis, a posição dos tratamentos eram alteradas diariamente. A contagem dos
ovos foi realizada por três dias consecutivos com o auxílio de um
Fo
nte
: A
ce
rvo p
róp
rio
NA
SC
IME
NT
O,
20
16
Figura 9- Gaiolas utilizadas na realização dos
ensaios de laboratórios e para a criação da colônia. Figura 10-Realização dos ensaios em laboratório.
37
esteromicroscópio e um contador manual. Após a contagem os ovos eram
colocados em contato com a água para a eclosão das larvas.
4.6. Ensaios em Campo
Os ensaios em campo foram realizados com ovitrampas contendo as
infusões testadas anteriormente em laboratório. Os quatro tratamentos foram
dispostos com a distância de 1 metro um do outro, formando um quadrante
(Fig.11). A partir disso foi possível a observação da preferência das fêmeas.
Entre as repetições foi respeitada uma distância mínima de 20 metros.
Um total de trinta e seis armadilhas, de cada tratamento, foi instalado no campus
da Universidade Federal do Rio Grande do Norte por um período de 10 dias.
Diariamente, as palhetas (Figura 12) eram retiradas e trocadas por
uma nova para que fossem analisadas em laboratório. Após a troca, as palhetas
foram levadas ao laboratório para a contagem dos ovos e 20% das palhetas
foram colocadas em contato com a água para a eclosão das larvas para
confirmação da espécie.
Figura 11-Realização dos ensaios em campo.
Fo
nte
: A
ce
rvo p
róp
rio
NA
SC
IME
NT
O,
2016
Figura 12-Palhetas usadas como substratos de
oviposição.
38
5. ANÁLISE ESTATÍISTICA
Foi realizada avaliação da normalidade dos dados com o auxílio do
teste de Kolmogorov-Smirnov. Para as análises das distâncias de instalações
das ovitrampas foi realizado o teste Mann-Whitney. Para a análise de eficácia
entre as infusões nos ensaios em laboratório foi utilizado teste não-paramétrico
Kruskal-Wallis; e para esse ensaio em campo foi utilizado uma ANOVA. Todas
as análises estatísticas foram realizadas no programa BioEstat 5.0.
6. RESULTADOS
a. Padronização da distância de instalação:
Durante os ensaios de padronização das distâncias das ovitrampas
em campo foram coletados 4.717 ovos, onde 83% das larvas eclodiram e foram
identificadas como A. aegypti. Não foram observadas diferenças significativas
entre as duas distâncias amostradas, indicando que o uso do raio de 300 metros
entre as armadilhas poderia ser usado sem perda da eficácia.
Figura 13- Médias de ovos para cada distância avaliada em ambos os bairros testados (Tiro e Quintas) ± EP
39
O total de ovos coletados no bairro das Quintas foi de 2.548, sendo
maior na distância de 300 metros entre as armadilhas (p<0,05) (Figura 12). Não
foi observada diferença significativa entre todos os índices pesquisados no bairro
Quintas entre as duas distâncias avaliadas (Figura 14 e 15).
O total de ovos coletados no
bairro Tirol foi de 2.169, sendo maior na distância de 150 metros entre as
armadilhas (p<0,05) (Figura 13). Não foi observada diferença significativa entre
Figura 14- Índices de Positividade de ovitrampa. Armadilhas instaladas no bairro das quintas durante as 4 semanas de testes.
Figura 15- Índices de Densidade de Ovos. Armadilhas instaladas no bairro das quintas durante as 4 semanas de testes.
Figura 16- Índices de Positividade de ovitrampa. Armadilhas instaladas no bairro de Tirol durante as 4 semanas de testes.
Figura 17- Índices de Densidade de Ovos. Armadilhas instaladas no bairro das quintas durante as 4 semanas de testes.
40
todos os índices pesquisados no bairro Tirol entre as duas distâncias avaliadas
(Figura 16 e 17).
Apesar da quantidade de ovos ter sido diferente entre as distâncias
quando se analisa cada bairro em separado, os índices calculados para
ovitrampa, Índice de Positividade da Ovitrampas (IPO) e o Índice de Densidade
de Ovos (IDO) não apresentaram diferença significativa entre as distâncias de
150 e 300 metros.
b. Ensaios com infusões:
Nos testes de eficiência das infusões na atração das fêmeas de
A. aegypti, foram observadas diferenças entre os resultados de campo e
laboratório. O total de ovos coletados (ovos presos ao substrato de papel e ovos
livres meio líquido) foi de 13.745 ovos, contabilizando todos os tratamentos,
inclusive o controle. Houve diferença quantitativa entre o número de ovos no
substrato e os que estavam livres na superfície líquida, sendo maior o número
dos fixados no papel (Tabela 1).
A quantidade de ovos na infusão de caju foi maior do que todos os
outros tratamentos, sendo significativa (p<0,05) em relação todos os
tratamentos. Foi observado também que para a infusão de caju e a água a
postura reduz após 3º dia (p<0.05), enquanto as demais não apresentaram
diferença.
41
Foram coletados 19.681 ovos no total em campo (Tabela 2). Em
campo o tratamento que contabilizou o maior número de ovos foi o Feno com
33% do número total de ovos, mas, no entanto, não foi possível observar uma
diferença significativa com o controle, somente com os demais tratamentos, e
não foi observada diferença entre os dias de postura.
Tratamentos
Ovos no papel *
Ovos Livres*
Médias Desvio Padrão
Total
Controle
2.135
490
95.45455
71.31049
2.625
Caju
3.944
3.289
263.0182
158.642
7.233*
Capim
1.005
182
43.16364
48.11013
1.187
Feno
2.460
240
98.18182
117.6073
2.700
Total
9.544
4.201
124.9545
13.745
Tratamentos
Total Médias Desvio Padrão
Porcentagem
Controle
5.438*
15,1
35.31231
0,27
Caju
3.108
8,6
18.67674
0,15
Capim
4.528
12,5
30.00236
0,23
Feno
6.607*
18,3
39.51776
0,33
Total
19.681
13,6
1
Tabela I- Número de ovos contados nos ensaios de laboratório, um total de 10 repetições com
duração de três dias de observações cada* tratamentos que apresenta diferença estatística
significativa quanto ao número de ovos coletados com os demais.
Tabela 2- Número de ovos contados nos ensaios de campo, um total de 36 repetições com duração de
10 dias de observações cada.
42
O controle se demonstrou muito positivo nos ensaios em campo
quanto ao número de ovos, onde se obteve o segundo melhor resultado
apresentando uma diferença significativa com o tratamento que foi considerado
o melhor em laboratório (caju) e como já mencionado, não houve diferença
significativa entre o controle e o melhor tratamento em campo (feno).
7. Discussão:
A instalação das ovitrampas como método de monitoramento do A.
aegypti atende a uma preconização do Ministério da Saúde, que sugere uma
proporção mínima de uma armadilha para cada nove quarteirões, uma para cada
225 imóveis (Ministério da Saúde, 2009).
Essa forma de distribuição pode tornar o monitoramento menos
sensível, uma vez que há diferenças entre as dimensões dos imóveis nas áreas
investigadas, não havendo assim uma distância padrão entre cada ovitrampa
instalada.
Diante disso, foi proposto pelo presente trabalho a padronização de
um raio de alcance das ovitrampas, ou seja, uma distância entre elas que
cobrisse toda a áreas de estudo, mas que não interferisse na eficiência da
armadilha. Então foram testadas as distâncias de 150 e 300 metros.
Como foi observado, os resultados demonstram que essas duas
distâncias não apresentam diferenças significativas entre si, quanto ao número
de ovos coletados pelas armadilhas e a positividade das armadilhas
Em um estudo de dispersão realizado em 2009 na cidade do Rio de
Janeiro, foi observado que dentre 725 fêmeas de A. aegypti devidamente
43
marcadas, soltas e recapturadas, 6,3% dispersaram em média 288,12 m do
ponto de soltura, 50% e 90% das fêmeas voaram até 350 m e 500,2 m
respectivamente (MACIEL-DE-FREITAS & LOURENÇO-DE-OLIVEIRA, 2009).
Esses resultados corroboram com as distâncias utilizadas no presente estudo,
uma vez que ambas as distâncias (150 e 300 m) estão dentro do alcance de voo
do vetor, mas além disso, os raios adotados pelo presente estudo estão dentro
do intervalo médio da distância preconizada pelo Ministério da Saúde (9
quarteirões e 225 imóveis).
Foi observado que entre as duas distâncias analisadas não houve
diferença significativa entre os índices atestados (IPO e IDO). Esse resultado se
assemelha com o resultado observado em um estudo realizado no município de
Macapá, capital do Estado do Amapá, onde também não foi observada diferença
significativa no Índice de Positividade de Ovitrampa entre as regiões estudadas
(MONTEIRO et al, 2014). Isso demonstra que mesmo em situações
socioeconômicas distintas, esse índice se apresenta resultados semelhantes,
isso deve se dar ao fato do IPO avaliar de forma qualitativa a presença do A.
aegypti.
Destacamos que a adoção do maior raio de instalação das ovitrampas
confere a implementação da metodologia uma maior aplicabilidade. Isso se dá
ao fato de ser necessário um número menor de armadilhas facilitando assim o
deslocamento dos materiais e do recurso humano para os locais de instalações.
Além disso, uma menor quantidade de armadilhas permite que haja uma
economia de tempo nas instalações e coletas de dados, como também uma
economia financeira para a gestão dos municípios.
44
Em um estudo publicado recentemente, que visava demonstrar a
preferência das fêmeas de A. aegypti frente a vários tipos de infusões, realizado
somente em laboratório, foi observado um resultado semelhante ao exposto pelo
presente estudo. A infusão a base de folha de caju (A. Occidentale) foi
considerado o melhor tratamento, obtendo o maior número de ovos (SANTOS et
al, 2010). Segundo Navarro et al (2003), a eficiência das infusões orgânicas é
diretamente influenciada pelo processo de crescimento bacteriano e
posteriormente a formação de metabólitos.
Em um estudo realizado em 2008, viu-se que o ácido hexadecanóico
é um bom estimulante da postura em fêmeas de A. aegypti, esse ácido está
presente no óleo produzido pela folha fresca do A. occidentales (PONNUSAMY
et al, 2008).
Foi visto que tanto em laboratório quanto em campo, é possível
observar que o controle (água) se demonstrou muito sensível. Em campo foi
considerado o melhor tratamento, se demonstrando superior a infusão de caju
que apresentou o melhor resultado em laboratório. Além disso, a água e o feno
(melhor tratamento em campo), não apresentaram diferenças significativas entre
si.
Em campo, a infusão a base de folha de caju apresentou um
desempenho inferior ao controle, e a infusão que apresentou a maior quantidade
de ovos foi a infusão a base de feno. Isso já havia sido observado por Reiter et
al (1991), quando percebeu que as fêmeas de A. aegypti eram atraídas para
armadilhas que apresentavam a infusão de feno em seu interior.
Entretanto, o feno não demonstrou diferença significativa com o
controle, mesmo apresentando uma quantidade de ovos superior a este. Esse
45
resultado vem a corrobora com o resultado obtido por Nunes et al (2011), que
observou um total de 5.947 ovos nas armadilhas com presença de feno e 3.804
ovos nas armadilhas que apresentavam somente água, mas mesmo assim não
obteve uma diferença significativa.
É possível que por estar em condições controladas e devido a
restrição a apenas quatro opções de sítios de oviposição, tenha sido possível
uma diferença comportamental em campo e em laboratório. Há de se ressaltar
que em campo a grande variedade de sítios de oviposição permite que o vetor
seja mais seletivo em sua escolha. Isso pode ser influenciado pelo
comportamento, bastante conhecido, em que a fêmea do A. aegypti distribui seus
ovos de um único ciclo gonotrófico em vários criadouros (CORBET & CHADEE,
1993; CHADEE, 2010).
Antemão, é possível dizer que a utilização da ovitrampa contendo
apenas água em seu interior tende a apresentar uma relação de custo-benefício
mais vantajosa, uma vez que, há uma economia de matéria-prima e mão-de-
obra. Outros benefícios são observados para o uso somente da água, com
relação a logística de instalação das armadilhas, dado que, não será necessário
o transporte das infusões para os locais de instalação, como também, a
padronização do uso da água evitaria o mau cheiro exalado pelas armadilhas
contendo infusão, principalmente a de feno.
Em Natal-RN, como na maioria dos Estados do Brasil, anualmente é
realizado o Levantamento de Índice rápido (LIRA), em um total de 5 ciclos
anuais. Essa metodologia se dá por meio da pesquisa larvária e um dos seus
pontos positivos é a identificação dos criadouros mais frequentes, a eliminação
dos imaturos e a possibilidade da aferição de um índice de infestação. Porém,
46
essa metodologia apresenta algumas limitações: não permite, na maioria das
vezes, diferenciar as áreas quanto à infestação, por não apresentar dados
semanais muitas informações entomológicas e epidemiológicas são perdidas,
além disso, a chance de detecção de um domicílio positivo para larvas é
significativamente menor, uma vez que se trata de uma metodologia ativa que
irá depender da percepção do agente na busca do foco, da mesma forma em
períodos de seca essa metodologia é prejudicada (BRAGA et Al., 2000).
A metodologia atualmente empregada na maioria dos Estados do
Brasil para o monitoramento do vetor da Dengue, o LIRA, demostra-se pouco
sensível quando se observa a taxa de positividade de infestação e o número de
casos notificados para uma mesma área. Em seguida, os dois mapas ilustrados
pela figura 18 demonstram essa incompatibilidade entre as áreas de maior
infestação pelo vetor e as áreas com maior número de casos confirmados do
vírus Dengue.
47
Essa metodologia é realizada a partir da pesquisa larvária, que se dá
pela busca ativa das formas larvais em possíveis criadouros em domicílios. A
partir dos resultados observados, são então determinados os índices de
infestação (Predial e de Breteu).
Segundo Gomes (1998), além de denotar muito esforço, estes índices
são indicadores fracos para predizer a infestação do mosquito, sendo limitado
para avaliação do risco de transmissão de arbovíroses. Outro ponto importante
é o fato de que a presença de formas imaturas não indica, fidedignamente, a
presença simultânea do vetor adulto naquele local, de maneira que as formas
aquáticas observadas em determinado momento podem ser originárias de ovos
depositados meses antes e que só eclodiram recente a coleta devido a resposta
a condições ambientais (ACYOLI, 2006).
Figura 18- A) grau de infestação por bairro de Natal, a partir da utilização do LIRA; B) números de casos de Dengue por bairro de Natal.
A B
48
Diante disso, inúmeros estudos demonstram a superioridade da
armadilha de oviposição para o monitoramento do A aegypti (PASSOS et al.
2003; BRAGA & VALLE, 2007). Um ponto importante no uso da ovitrampa pela
vigilância entomológica é a possibilidade de observação de dados semanais que
possam corroborar com o número de casos observados em cada semana
epidemiológica, possibilitando tomadas de decisões mais pontuais no combate
ao vetor, mas para isso é necessário o desenvolvimento de índice que seja
possível realizar essa aferição.
No presente trabalho a armadilha de oviposição provou ser um
método econômico e operacionalmente viável, sendo muito efetivo na vigilância
de A. aegypti corroborando com outros estudos (BRAGA et al, 2000; OPAS,
1994). Frente a essas inúmeras vantagens, é sugerido a implantação dessa
metodologia no programa de vigilância entomológica no município do Natal. É
importante destacar que é recomendável que os demais munícipios que se
interessem no uso dessa metodologia, realize estudo semelhante para que
sejam padronizadas as variáveis (raio de alcance das ovitrampas, número de
ovitrampas, concentração de infusão, tipo de infusão e etc.) de acordo com as
particularidades de cada localidade.
Com isso ressaltamos a importância da utilização da ovitrampa nos
programas de monitoramento, como mais uma ferramenta para a tomada de
decisões pelos gestores, mas sempre sendo observados os fatores
populacionais, ambientais e epidemiológico. Para uma melhor observação da
eficiência dessa ferramenta, será necessária a realização de uma análise de
correlação que busque corrobora os dados entomológicos adquiridos pelas
armadilhas com os dados epidemiológicos (casos notificados de Dengue).
49
8. CONCLUSÃO:
A análise dos resultados obtidos neste trabalho permite concluir que
a ovitrampa é uma ferramenta promissora para os programas de vigilância
entomológicas, sendo necessária a padronização de sua utilização para cada
localidade que assim decidir utiliza-la. Foi observado também, que para o
município de Natal-RN, o melhor raio de instalação dessas armadilhas é o de
300 m, apresentando assim uma melhor padronização das distâncias entre as
ovitrampas. Com relação ao uso de infusão, conclui-se que a melhor forma de
utilização dessas armadilhas é sem o aditivo de soluções orgânicas, sendo
utilizado apenas água em seu interior. Diante disso, pode-se avaliar essa
metodologia como uma boa alternativa para os gestores, sendo de fácil utilização
e de baixo custo, para a otimização dos programas de combate ao Aedes
aegypti.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
ABREU, F. V. S.; MORAIS, M.M.; RIBEIRO, S. P.; EIRAS, A. E. Influence of breeding site availability on the oviposition behaviour of Aedes aegypti. Mem Inst Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Vol. 110(5): 669-676. 2015. ACYOLI, R. V.; O uso de armadilhas de oviposição (ovitrampas) como ferramenta para monitoramento populacional do Aedes spp em bairros de Recife, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2006.
ACYOLI, R. V. O uso de armadilhas de oviposição (ovitrampas) como ferramenta para o controle da dengue. 2006. Dissertação (Mestrado em Saúde Pública) - Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães, Fundação Oswaldo Cruz, Recife, 2006.
ARBONNIER, M. Arbres, arbustes et lianes des zones sèches d’Afrique de l’Ouest. Paris: CIRAD/MNHN. 2a ed, 2002.
50
ARDUINO, M. B. ÁVILA, G. O. Aspectos físico-químicos da água de criadouros de Aedes aegypti em ambiente urbano e as implicações para o controle da dengue. Revista de Patologia Tropical, Vol. 44 (1): 89-100. 2015. BARSANTE, L. S; FERNANDES, J. L. A; CARDOSO, R. T. N; Dependência entre pluviosidade e população de fêmeas Aedes aegypti grávidas descritas através de um sistema dinâmico não linear, Centro Federal de Educação Tecnológica de Minas Gerais, Belo Horizonte, 2012. BENTLEY, M.D.; DAY, J.F. Chemical ecology and behavioral aspects of mosquito oviposition. Annual Review of Entomology 34: 401-421, 1989. BRAGA, I. A.; VALLE, D. Aedes aegypti: vigilância, monitoramento da resistência e alternativas de controle no Brasil. Epidemiol. Serviço de Saúde pública, Brasília; v. 26, n.4, p. 295-302, 2007. BRAGA, I. A; VALLE, D; Aedes aegypti: histórico do controle no Brasil, Epidemiologia e Serviços de Saúde, Rio de Janeiro, 2007. BRAGA, I. A; GOMES, A. C; NELSON, M; MELLO, R. C. G; BERGAMASCHI, D. P; SOUZA, J. M. P; Comparação entre pesquisa larvária e armadilha de oviposição, para detecção de Aedes aegypti, Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, Salvador,2000. BRASIL, P.; PEREIRA, J. P. JR.; RAJA GABAGLIA, C. et al. Infecção pelo vírus Zika em mulheres grávidas no Rio de Janeiro - relatório preliminar. The New England Journal of Medicine.4 ed, 2016.
BRASIL. Ministério da Saúde. Secretária de vigilância em Saúde. Boletim Epidemiológico, Volume 47 N° 33, 2016. BRASIL. Ministério da Saúde. Secretária de vigilância em Saúde. Boletim Epidemiológico, Volume 46 N° 36, 2015. BRASIL. Ministério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Departamento de Vigilância Epidemiológica. Diretrizes nacionais para prevenção e controle de epidemias de dengue / Ministério da Saúde, Secretaria de Vigilância em Saúde, Departamento de Vigilância Epidemiológica. – Brasília : Ministério da Saúde, 2009. 160 p. – (Série A. Normas e Manuais Técnicos). BRIEGEL, H. Mosquito reproduction: incomplete utilization of the blood meal protein for oogenesis. Journal Insect Physiol, 31, 15-21, 1985 CAMPOS, G.S.; BANDEIRA, A.C.; SARDI, S.I.; surto de Zika vírus, Bahia, Brasil. Emerg Infect Dis2015;21:1885-1886. CANYON, D. V. HII, J.L.K.; MÜLLER, R. Adapitation of Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) Oviposition Behavior in Respouse to Humidity and Diet. Journal of Insect Physiology, Oxford, v. 45, p.959-964, 1999.
51
CARTEAUX, G. ; MAQUART, M. ; BEDET, A. et al. Vírus Zika associada a meningoencefalite. The New England Journal of Medicine.374:1595-1596, 2016. CAVALCANTI, L. P.; MOTA, L. A.; LUSTOSA, G. P.; FORTES, M. C.; MOTA, D. A.; LIMA, A. A.; COELHO, I. C. B.; MOURÃO, M. P. G. Evaluation of the WHO classification of dengue disease severity during an epidemic in 2011 in the state of Ceará, Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz,109(1):93-8, 2013. CLEMENTS, A. N. The Physiology of Mosquitoes. Pergamon Press, Oxford. 1963. CLEMENTS, N.A. The biology of mosquitoes. Wellinford: CABI Publications,v. 2, 1999. CHADEE, D. D.; LAKHAN, A.; RAMDATH, W. R.; PERSAL, R. C. Oviposition response of Aedes aegypti mosquitoes to different concentrations of hay in Trinidad, West Indies. Journal of the American mosquito Control Association, 9:346-348, 1993. CHADEE, D. D. The diel oviposition periodicity of Aedes aegypti (L.) (diptera: Culicidae) in Trinidad, West Indies: effects of forced egg retention. Bulletin of Entomological Research, v, 100, n. 5, p. 599-603, 2010. CONNOR, M. E.; MONROE, W. M. Stegomyia indices and their value in yellow fever control. American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, 3:9-19. 1923 CONSOLI, R. A. G. B.; OLIVEIRA, R. L. Principais mosquitos de importância sanitária no Brasil [online]. Rio de Janeiro: Editora FIOCRUZ, 228 p, 1994.
CORBET, P. S.; CHADEE, D. D. An improved method for detecting substrate preferences shown by mosquitoes that exhibit ‘skip oviposition’. Physiological Entomology, v. 18, n.2, p. 114-118, 1993. CRAWFORD, J. E.; ALVES, J. M.; PALMER, W. J.; DAY, J. P. ; SYLLA, M.; RAMASAMY, R.; SURENDRAN, S. N.; BLACK, W. C.; PAIN, A.; JIGGINS, F. M. Population genomics reveals that an anthropophilic population of Aedes aegypti mosquitoes in West Africa recently gave rise to American and Asian populations of this major disease vector . BMC Biology, 15:16, 2017 DÍAZ-QUIJANO, F.A.; VILLAR-CENTENO, L.A.; MARTÍNEZ-VEGA, R.A. Complicações associadas à profunda trombocitopenia em pacientes com dengue. Revista médica do Chile v.134 n.2 Santiago, 2006. DUFFY, M.R. ; CHEN, T-H ; HANCOCK, W.T. ET AL.. Zika epidemia de vírus na Yap Island, Estados Federados da Micronésia. The New England Journal of Medicine, 360:2536-2543. 2009.
52
EUCLIDES, V. P. B.; MACEDO, M. C. M.; ZIMMER, A. H.; JANK, L. Avaliação dos capins mombaça e massai sob pastejo. Revista Brasileira de Zootecnia, v.37, n.1, p.18- 26, 2008. FAY, R. W.; PERRY, A. S. Laboratory studies of ovipositional preferences of Aedes aegypti. Mosq News, 25-276-81,1965. FAY, R. W.; ELIASON, D. A. A preferred oviposition site as a surveillance method for Aedes aegypti. Mosq News, 26-531-5. 1996. FORATTINI, O. P. Culicidiologia Médica. São Paulo: da Universidade Federal de São Paulo, 1 v. 2002. Fundação Nacional de Saúde. Programa Nacional de Controle da Dengue (PNCD). Brasília: Funasa; 2002. GETIS, A.; MORRISON, A. C.; GRAY, K.; SCOTT, T. W. Characteristics of the spatial pattern of the dengue vector, Aedes aegypti, in Iquitos, Peru. The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, 69(5): 494-505,2003.
GOMES, A. C. Vigilância Entomológica. Informe Epidemiológico do SUS, 11(2): 79 - 90. 2002;
GOMES, A. C. Medidas dos níveis de infestação urbana para Aedes (stegomyia) aegypti e Aedes (stegomyia) albopictus em Programa de Vigilância Entomológica. Informativo Epidemiológico. Sus v.7 n.3 Brasília, 1998.
GOMES, A. S.; SCIAVICO, C. J. S.; EIRAS, A.E. Periodicidade de oviposição de fêmeas de Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera:Culicidae) em laboratório. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 39, n.4, p.327-332, 2006. GONZALEZ, P. V.; AUDINO, P. A. G.; MASUH, H. M. Oviposition Behavior in Aedes aegypti and Aedes albopictus(Diptera: Culicidae) in Response to the Presence of Heterospecific and Conspecific Larvae, Argentina, Journal of Medical Entomology, V. 53, Issue 2, 1, 2016. GUBLER, D.J. Dengue and dengue hemorrhagic fever. Clinical Microbiology Reviews, 11(3):480-96, 1998. GUEDES, M. L. P. Culicidae (Diptera) no Brasil: relações entre diversidade, distribuição e enfermidades. Oecologia Australis, v. 16, n. 2, 283-296, p. 2012. HAITI. Ministério da Saúde Pública e da População Surto de Chikungunya: parceiros MSPP estão posicionados. 2014. Disponível em: http://www.mspp.gouv.ht/site/downloads/table%20sectorelle%20sante%20Chikungunyum 20juin%% 202014% 202.pdf.
53
HARBACH, R.E.; KITCHING, I.J. Phylogeny and classification of the Culicidae (Diptera). Systematic Entomology, 23, 327–370. 1998. HARBACH, R.E.; HOWARD, T.M. Index of currently recognized mosquito species (Diptera: Culicidae). European Mosquito Bulletin, 23, 1–66. 2007. HONÓRIO, N. A.; SILVA, W. C.; LEITE, P. J.; GONCALVES, J. M.; LOUNIBOS, L.P.; LOURENCO-DE-OLIVEIRA, R. Dispersal of Aedes aegypti and Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) in an urban endemic dengue area in the State of Rio de Janeiro, Brazil. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, 98(2):191-198, 2003.
INOUE, S.; MORITA, K.; MATIAS, R.R. et al. Distribuição de três anticorpos de arbovírus entre os macacos (Macaca fascicularis) nas Filipinas. Journal of Medical Primatology, 32: 89–94, 2003. JANK, L. A história do Panicum maximum no Brasil. Revista JC Maschietto, ano 01, no 01, 2003. KHAN, A.H.; MORITA, K.; PARQUET, M.D.; MDEL, C.; HASEBE, F.; MATHENGE, E.G.; IGARASHI, A. sequência de nucleótidos completa de chikungunya vírus e provas para um local de poliadenilação interno. Journal General Virology, 83: 3075-84, 2002. LIMA, J. B.P.; PEREIRA DA CUNHA, M.; SILVA Jr, R. C. S.; GALARDO, A. K. R.; SOARES, S. S.; BRAGA, I. A.; RAMOS, R. P.; VALLE, D. Resistance of Aedes aegypti to organophosphates in several municipalities in the states of Rio de Janeiro and Espírito Santo, Brazil. American Journal of Tropical Medicine & Hygiene; 68:329-333, 2003.
LIMA, J.A.; CUNHA, E.A. Feno de capim-elefante: opção de volumoso de boa qualidade com baixo custo. 2008. Artigo em Hypertexto. Disponível em: <http://www.infobibos.com/Artigos/2008_2/CapimElefante/index.htm>. Acesso em: 28/9/2016. LOYOLA, R.D.; KUBOTA, U.; LEWINSOHN, Y.M. Endemic vertebrates are the most effective surrogates for identifying conservation priorities among Brazilian ecoregions. Diversity and Distributions, 13: 389-396. 2007. LUMSDEN, W.H.R. Uma epidemia de doença do vírus na província do sul, Tanganyika Território, em 1952-53: II. Descrição geral e epidemiologia. The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, 49(1):33-57, 1955 MACIEL-DE-FREITAS, R.; LOURENÇO-DE-OLIVEIRA, R. Presumed unconstrained dispersal of Aedes aegypti in the city of Rio de Janeiro, Brazil. Revista de Saúde Pública, vol.43 n.1 São Paulo, 2009. MACIEL-DE-FREITAS, R.; PERES, R. C.; ALVES, F.; BRANDOLINI, M. B. Mosquito traps designed to capture Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)
54
females: preliminary comparison of Adultrap, MosquiTRAP and backpack aspirator effi ciency in a dengue endemic area of Brazil. Mem Inst Oswaldo Cruz 103: 602-605,2008. MacNAMARA, F.N. Zika virus: a report on three cases of human infection during an epidemic of jaundice in Nigeria. The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, 48:139-145, 1954. MARQUES, C. C.; MARQUES, G. R.; DE BRITO, M.; DOS SANTOS NETO, L. G.; ISHIBASHI, V. C.; GOMES, F. A. Comparative study of the efficiency of larval and ovitraps for the surveillance of dengue and yellow fever vectors. Revista de Saúde Pública, 27(4):237-241, 1993. MARCONDES, C. B. Doenças Transmitidas e Causadas Por Artrópodes. São Paulo: Atheneu, 557 p. 2009. MLAKAR, J. ; KORVA, M. ; TUL, N. et al. Zika Vírus associado com microcefalia. The New England Journal of Medicine, 374:951-958. 2016. MLERA, L.; MELIK, W.; BLOOM, M. E. O papel da persistência viral em flavivirus biologia. Pathog Dis; 71 (2): 137-63. 2014. MONTEIRO, F.J.C.; CARVALHO, J.C.T.; SOUTO, R.N.P. Distribuição da Oviposição e Dinâmica Temporal do Aedes aegypti (Linnaeus) por Meio de Ovitrampas. EntomoBrasilis, 7 (3): 188-192, 2014. MURREL, E. G.; JULIANO, S. A. Detritus type alters the outcome of interspecific competition between Aedes aegypti and Aedes albopictus (Diptera: Culicidae). Journal of Medical Entomology, 45: 375-383, 2008. NAVARRO, D. M. A. F.; OLIVEIRA, P. E. S. DE; POTTING, R. P. J.; BRITO, A. C.; FITAL, S. J. F.; SANT’ANA, A. E. G. The potential attractant or repellent effects of different water types on oviposition in Aedes aegypti L. (Dipt., Culicidae). Journal of Applied Entomology, 127: 46-50, 2003. NELSON, M. The significance of indicators and indices. CTD/FIL(DEN)/IC/95 WP.3.4.1, 1995.
NUNES, M.R.T.; PALACIOS, G.; FARIA, N.R.; SOUSA, C.E. JR.; PANTOJA, J.A.; RODRIGUES, S.G. et al. As viagens aéreas estão associadas com a propagação intracontinental do vírus da dengue sorotipos 1-3 linhagens no Brasil. PLoS neglected Tropical Diseases, 8 (4), 2014. NORMILE, D. Surprising New Dengue Virus Throws a Spanner in Disease Control Efforts. Science, 342, 415. 2013. OEHLER, E.; WATRIN, L.; LARRE, P.; LEPARC-GOFFART, I.; LASTÈRE, S.; VALOUR, F.; BAUDOUIN, L.; MALLET, H.P.; MUSSO, D.; GHAWCHE, F. Infecção pelo vírus Zika complicado por síndrome de Guillain-Barre - relato de caso, Polinésia Francesa, Dezembro de 2013. Euro Surveill, 19(9), 2014.
55
OMS- ORGANIZAÇÃO MUNDIA DE SAÚDE. Disponível em http://www.who.int, acesso em 30 de Setembro de 2016. OMS. Mundial da Saúde. Director-Geral resume o resultado do comité de emergência sobre clusters de microcefalia e síndrome de GuillainBarré.http://www.who.int/mediacentre/news/statements/2016/emergency-committee-zika-microcephaly/en/ 2016. (Acessado em outubro de 2016). OPAS / OMS. plano de acção detalhado para a próxima geração. Prevenção e controle da dengue: Programa de Doenças Transmissíveis. Divisão de prevenção e controle de doenças. Washington: OPAS / OMS, 1999. OPAS. Publicación científica: Dengue and dengue hemorrhagic fever in the Americas: Guidelines for prevention and control. Washington, DC. Publicación científica 548, 1994. ORDONEZ – GONZALEZ, J. G.; MERCADO-HERNANDEZ, R.; FLORES SUAREZ, A. E.; FERNÁNDEZ-SALAS, J. The use of sticky to estimate dispersal of Aedes aegypti in northeastern México. Journal of the American Mosquito Control Association, Fresno, v. 17,n. 2, p. 93-97, 2001. PASSOS, R. A.; MARQUES, G. R. A. M.; VOLTOLINI, J. C.; CONDINO, M. L. F. Dominância de Aedes aegypti sobre Aedes albopictus no litoral sudeste do Brasil. Revista Saúde Pública 37: 729-734. 2003. PONNUSAMY, L.; XU, N.; NOJIMA, S.; WESSON, D. M.; SCHAL, C.; APPERSON, C. S. Identifi cation of bacteria and bacteria-associated chemical cues that mediate oviposition site preferences by Aedes aegypti. Proceedings of the National Academy of Sciences. 105: 9262-9267, 2008. REINERT, J.F., HARBACH, R.E.;KITCHING, I.J. Phylogeny and classification of Aedini (Diptera: Culicidae) based on morphological characters of all life stages. Zoological Journal of the Linnaean Society, 142, 289–368. 2004. REPÚBLICA DOMINICANA. 5º boletim epidemiológico Especial de chikungunya na República Dominicana. 2013. Disponível em: http://www.digepisalud.gob.do/ REITER, P.; AMADOR, M.A.; COLON, N. Enhancement of the CDC ovitrap with hay infusions for daily monitoring of Aedes aegypti populations. Journal American Mosquito Control Association, v.7, n.1, p.52-55, 1991.
56
ROZE, B. ; NAJIOULLAH, F. ; FERGE, J. L. et al. Detecção de vírus Zika na urina de pacientes com a síndrome de Guillain-Barré na Martinica, janeiro 2016. Euro Surveill ;21(9). 2016. SANT’ANA, A. L.; ROQUE, R. A.; EIRAS, A. E. Characteristics of grass infusions as oviposition attractants to Aedes (Stegomyia) (Diptera: culicidae), J Med Entomol. 43: 214-220, 2006. SANTOS, E. M. M; CORREIA, J; MUNIZI, L; MELADO, M; ALBURQUEQUE, C; Oviposition Activity of L. (Diptera: Culicidae) in Response to Different Organic Infusions, Public health, Recife, 2010. SCHIFFINO DE OLIVEIRA, T. E.; MUSIS, C. R. Análise da flutuação das populações de aedes aegypti e aedes albopictus em uma escola de Cuiabá-MT. REGET - V. 18 n. 1, p. 178-186, 2014. SILVA JR, J.B.; SIQUEIRA JR, J.B.; COELHO, G.E.; VILARINHOS, P.T.; PIMENTA JR, F.G. Dengue in Brazil: current sit ation and control activities. Epidemiological Bulletin, 23(1):3-6. 2002. SISSOKO, D.; MALVY, D.; EZZEDINE, K.; RENAULT, P.; MOSCETTI, F.; LEDRANS, M. et al. Post-epidemic Chikungunya disease on Reunion Island: course of rheumatic manifestations and associated factors over a 15-month period. PLoS neglected Tropical Diseases. 3(3):e 389. 2009. SOUZA, A. G.; SOARES FILHO, C. V.; MELLA, S. C. Espécies forrageiras recomendadas para o Paraná. In: MONTEIRO, A. L.G. et al.(eds.). Forragicultura no Paraná. Londrina: CPAF, p. 196-205. 1996. SPENCER, M.; BLAUSTEIN, L.; COHEN, J.E. Oviposition habitat selection by mosquitoes (Culiseta longiareolata) and consequences for population size. Ecology 83: 669-679, 2002. TAUIL, P.L. Urbanização e ecologia do dengue. Cad Saúde Pública, v. 17, p. 99-102, 2001. TEIXEIRA, M.G.; ANDRADE, A.M.S.; COSTA, M.C.N.; CASTRO, J.S.M.; OLIVEIRA, F.L.S.; GOES, C.S.B. et al. East/Central/ South African genotype Chikungunya virus, Brazil, 2014. Emerging Infectious Diseases, 21:906-7. 2015. VEZZANI, D.; VELÁZQUEZ, S. M.; SCHWEIGMANN, N. Seasonal pattern of abundance of Aedes aegypti (Diptera:Culicidae) in Buenos Aires City, Argfentina. Memória do Instituto Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, v.99, p.351-356, 2004. VILELA, E. F.; LÚCIA, M. T.D.; Feromônios de insetos: biologia, química e emprego no manejo de pragas. Editora Holos, 206p, 2001. WALDMAN, E.A. Usos da vigilância e da monitorização em saúde pública. Informe Epidemiológico do SUS, v.7, n.3, p.7-26, 1998.
57
WILKERSON, R. C.; LINTON, Y. M., FONSECA, D. M., SCHULTZ, T. R., PRICE, D. C., & STRICKMAN, D. A. Making mosquito taxonomy useful: a stable classification of tribe Aedini that balances utility with current knowledge of evolutionary relationships. PLoS One, v. 10, n. 7, 2015.