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1 1 MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO E CULTURA UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS DA SAÚDE EFEITO POSITIVO DA SUPLEMENTAÇÃO DE ZINCO NO CRESCIMENTO, GH, IGF-1 E IGFBP-3 EM CRIANÇAS EUTRÓFICAS CAMILA XAVIER ALVES NATAL/RN 2013

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MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO E CULTURA

UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE

CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS DA SAÚDE

EFEITO POSITIVO DA SUPLEMENTAÇÃO DE ZINCO NO CRESCIMENTO, GH, IGF-1 E

IGFBP-3 EM CRIANÇAS EUTRÓFICAS

CAMILA XAVIER ALVES

NATAL/RN

2013

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CAMILA XAVIER ALVES

EFEITO POSITIVO DA SUPLEMENTAÇÃO DE ZINCO NO CRESCIMENTO, GH, IGF-1 E

IGFBP-3 EM CRIANÇAS EUTRÓFICAS

Dissertação apresentada ao Programa de Pós-

Graduação em Ciências da Saúde da

Universidade Federal do Rio Grande do Norte

como requisito para a obtenção do título de

Mestre em Ciências da Saúde.

Orientador: Prof. Dr. José Brandão Neto

Coorientadora: Profa. Dra. Lúcia Dantas Leite

NATAL/RN

2013

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Catalogação da Publicação na Fonte Universidade Federal do Rio Grande do Norte-UFRN

Alves, Camila Xavier.

Efeito positivo da suplementação de zinco no crescimento GH, IGF-1 e

IGFBP-3 em crianças eutróficas / Camila Xavier Alves. - Natal, 2013.

42f: il.

Orientador: José Brandão Neto.

Coorientadora: Lúcia Dantas Leite.

Dissertação apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da

Saúde da Universidade Federal do Rio Grande do Norte como requisito

para a obtenção do título de Mestre em Ciências da Saúde.

1. Crescimento infantil - Dissertação. 2. Hormônio - Dissertação. 3. Zinco -

Dissertação. 4. Nutrição - Dissertação. I. Brandão Neto, José. II. Leite,

Lúcia Dantas. III. Título.

RN/UF/BSA01 CDU 159.922.7:613.2

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MINISTÉRIO DA EDUCAÇÃO

UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO NORTE

CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE

PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS DA SAÚDE

Coordenadora do Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde:

Profa. Dra. Ivonete Batista de Araújo

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CAMILA XAVIER ALVES

EFEITO POSITIVO DA SUPLEMENTAÇÃO DE ZINCO NO CRESCIMENTO, GH, IGF-1 E

IGFBP-3 EM CRIANÇAS EUTRÓFICAS

Aprovada em: 12/06/2013

Banca examinadora:

Presidente da banca:

Prof. Dr. José Brandão Neto

Membros da banca:

Profa. Dra. Karine Cavalcanti Maurício de Sena Evangelista (UFRN)

Profa. Dra. Maria José de Carvalho Costa (UFPB)

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DEDICATÓRIA

Aos meus pais,

Carlos e Graça.

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AGRADECIMENTOS

A Deus, pela vida e a possibilidade de empreender esse caminho evolutivo, por propiciar

tantas oportunidades de estudos e por colocar em meu caminho pessoas amigas e

preciosas.

À minha família, especialmente aos meus pais, sempre presentes em minha vida,

verdadeiros alicerces em todos os momentos da minha existência. Modelos de

integridade moral, coragem e fé.

Ao meu orientador, Prof. Dr. José Brandão Neto pela amizade, confiança, oportunidade

de aprendizado e por ajudar a construir minha trajetória acadêmica. E por ser esse

exemplo de dignidade e competência.

À Profa. Dra. Lúcia Dantas Leite, pela amizade e confiança e contribuição significativa no

meu crescimento pessoal e profissional.

A Rommel Souza, pelo amor, amizade, carinho, paciência e tolerância. Também por estar

presente apesar das adversidades, me apoiando incondicionalmente.

As amigas do grupo de pesquisa, em especial Sancha Helena de Lima Vale, Karina

Vermeulen e Marília Gomes Dantas. Agradeço pela disponibilidade e pelas trocas

vivenciadas.

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RESUMO

O zinco é um micronutriente essencial para o crescimento e desenvolvimento de crianças

e adolescentes. A sua deficiência é considerada um problema mundial, sobretudo em

países subdesenvolvidos e em desenvolvimento. Essa deficiência pode comprometer o

sistema nervoso central e periférico, o sistema imunológico, o sistema hematopoiético, o

sistema endócrino e reprodutivo, além de retardar o crescimento de crianças e

adolescentes. O presente estudo analisou o efeito da suplementação de zinco na

secreção do hormônio do crescimento (GH), fator de crescimento semelhante à insulina

(IGF-1) e proteína ligadora do IGF (IGFBP-3) em crianças eutróficas, aparentemente

saudáveis e pré-pubéres, provenientes de 3 escolas municipais de Natal/RN. Foram

estudadas 30 crianças eutróficas, 15 meninos e 15 meninas, com idades entre 6 e 9 anos,

as quais foram suplementadas oralmente com 5 mg/dia de sulfato de zinco

heptahidratado durante 3 meses. Além disso, foi realizada uma administração intravenosa

de zinco, antes e após a suplementação oral de zinco, com 0.06537 mg Zn/Kg de peso

corporal. A avaliação dietética e antropométrica foi realizada no início e no final do estudo.

Os níveis plasmáticos de GH aumentaram durante a administração intravenosa de zinco,

enquanto que os níveis de IGF-1 e IGFBP-3 aumentaram depois da suplementação oral

de zinco. Houve correlação positiva entre a área sob a curva de GH e zinco sérico depois

da suplementação oral de zinco. A suplementação desse micronutriente foi possivelmente

efetiva no aumento da concentração de zinco no soro, nos níveis de secreção de IGF-1 e

IGFBP-3 e potencialização do GH.

Palavras-chaves: crianças, crescimento, hormônios, zinco e nutrição.

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LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS

AKT – proteína quinase B

DNA – ácido desoxirribonucleico

ELA – esclerose lateral amiotrófica

EPM – erro padrão da média

GH – hormônio do crescimento

GHRH – hormônio liberador do hormônio do crescimento

HUOL – Hospital Universitário Onofre Lopes

IGF-1 – fator de crescimento semelhante à insulina 1

IGF-2 – fator de crescimento semelhante à insulina 2

IGFBP-3 – proteína ligadora do IGF

IMC – índice de massa corporal

IRS – substrato do receptor de insulina

OZnS – suplementação oral de zinco

PTH – hormônio da paratireoide

rGH – receptor do hormônio do crescimento

rIGF-1 – receptor de IGF-1

rIGF-3 – receptor de IGF-3

RNA – ácido ribonucleico

S6K – S6 quinase

T3 – hormônio triiodotironina

TOR – marcador de rampamicina

UFPB – Universidade Federal da Paraíba

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UFRN – Universidade Federal do Rio Grande do Norte

UNIFESP – Universidade Federal de São Paulo

Zn – zinco

ZnSO4.7H2O – zinco heptahidratado

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LISTA DE FIGURAS

Figura 1 - Ação do zinco sobre o crescimento ósseo longitudinal.

Figura 2 - Desenho do estudo.

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SUMÁRIO

RESUMO ........................................................................................................................... vii

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS ............................................................................ viii

LISTA DE FIGURAS ............................................................................................................ x

1 INTRODUÇÃO ................................................................................................................ 13

2 JUSTIFICATIVA .............................................................................................................. 17

3 OBJETIVOS .................................................................................................................... 18

3.1 Objetivo geral ........................................................................................................... 18

3.2 Objetivos específicos ................................................................................................ 18

4 MÉTODOS ...................................................................................................................... 19

4.1 Caracterização dos pacientes .................................................................................. 19

4.2 Critérios de seleção .................................................................................................. 19

4.3 Grupo de estudo ....................................................................................................... 19

4.3 Avaliação antropométrica ......................................................................................... 20

4.4 Avaliação dietética .................................................................................................... 20

4.5 Suplementação oral de zinco ................................................................................... 21

4.6 Administração venosa de zinco ................................................................................ 21

4.7 Coleta do material biológico ..................................................................................... 22

4.8 Avaliação bioquímica e hormonais ........................................................................... 22

4.9 Análise estatística ..................................................................................................... 22

5 ARTIGOS PRODUZIDOS ............................................................................................... 24

6 COMENTÁRIOS, CRÍTICAS E CONCLUSÕES ............................................................. 32

REFERÊNCIAS ................................................................................................................. 35

APÊNDICE ........................................................................................................................ 37

Apêndice 1 – Different methods of clearance for diagnosing zinc deficiency in

prepubertal children. ....................................................................................................... 37

Apêndice 2 – Zinc supplementations on growth and hormonal secretion of GH, IGF1 and

IGFBP3 in prepubertal children. ..................................................................................... 38

Apêndice 3 – Cognitive function of elementary school children improved by oral zinc

suplementation. .............................................................................................................. 39

Apêndice 4 – Association of PPAR-Gamma2 Polymorphism on Lipid Profile in

Berardinelli-Seip Syndrome. ........................................................................................... 40

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Apêndice 5 – Influence of basal energy expenditure and body composition on bone

mineral density in postmenopausal women. ................................................................... 41

Apêndice 6 – Oral zinc supplementation may improve cognitive function in

schoolchildren. ................................................................................................................ 42

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1 INTRODUÇÃO

A deficiência de zinco é uma questão de saúde pública em todo o mundo. E a

deficiência desse micronutriente pode causar retardo no crescimento de crianças e

adolescentes, hipogonadismo, danos oxidativos, alterações do sistema imune,

hipogeusia, danos neuropsicológicos e dermatites¹.

O zinco é um micronutriente que exerce funções estruturais, catalíticas e

regulatórias sobre diferentes proteínas no nosso organismo. Participa de processos

biológicos e fisiológicos importantes, como divisão celular, expressão gênica, crescimento

e desenvolvimento, morte celular, age como estabilizador de estruturas de membranas e

componentes celulares, além de participar da função imune e desenvolvimento cognitivo².

O zinco é cofator de processos enzimáticos, com efeito catalítico em mais de 300

metaloenzimas em diferentes seres vivos2,3. Além disso, é um componente estrutural de

diversas proteínas, hormônios e nucleotídeos4.

O crescimento ocorre através de processos de alta complexidade, tais como a

divisão celular, síntese de proteína, DNA e RNA4,5. Todos esses processos celulares são

zinco dependente, uma vez que esse micronutriente é cofator de inúmeras enzimas

diretamente ligadas à expressão gênica, como a RNA polimerase, transcriptase reversa e

fator de transcrição IIIA4.

Esse micronutriente tem uma estreita relação com o sistema endócrino, pois, atua

como cofator de enzimas envolvidas no crescimento celular, diferenciação celular e

metabolismo¹. Hormônios e fatores de crescimento induzem o crescimento e a

diferenciação de células eucarióticas por participarem das cascatas de sinalização

intracelular, sobretudo porque regula a mitose e a síntese de DNA6. A esse respeito, o

DNA polimerase, RNA polimerase e timidina quinase são enzimas importantes para a

síntese de ácidos nucleicos, síntese de proteínas e divisão celular7.

A principal influência sobre o crescimento somático é patrocinada pelo hormônio de

crescimento (GH) e pelo fator de crescimento semelhante à insulina (IGF-1)4. O zinco

interage com a síntese, secreção e ação do GH, IGF-1, desde o nascimento até o

fechamento das epífises ósseas, na adolescência5, atuando nos processos enzimáticos e

genômicos. Além disso, os íons de zinco formam um dímero com GH e esse fenômeno

pode ser é importante para o armazenamento, secreção e potencialização do GH8.

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A família IGF inclui, dentre outros, os ligantes IGF-1 e IGF-2, seus receptores

(rIGF-1, rIGF-3), proteínas ligadoras (IGFBP1, IGFBP3), proteínas intracelulares

sinalizadoras associadas ao IGF-IR – membros da família do IRS (insulin-receptor

substrate), AKT, TOR (target of rapamicine) e a S6K (S6 kinase)9. A síntese de IGF e

IGFBP ocorre no fígado e o GH é principal estimulador da sua produção, a qual se eleva

no plasma em paralelo com crescimento pós-natal e puberal e declina depois do

fechamento das epífises ósseas, elevando-se novamente na velhice9.

O transporte das IGF para as células-alvo é feito pelo complexo com as IGFBP. A

IGFBP-3, por exemplo, é forma mais abundante na corrente sanguínea e é responsável

pela maior parte de ligação à IGF-110.

A mensuração plasmática de GH é fundamental para o diagnóstico e tratamento de

várias formas de sua secreção inadequada. As principais manifestações clínicas relativas

à hiposecreção estão relacionadas ao nanismo e outras formas de baixa estatura. Já a

hipersecreção está associada com gigantismo e acromegalia. Há diversos fatores que

influenciam a secreção de GH: sono, exercício físico, estresse, hipoglicemia, estrógenos,

corticosteroides, L-dopa e outros11.

A dosagem de IGF-1 é também relevante, sobretudo porque é um indicador da

secreção de GH e de alterações do estado nutricional12. A IGFBP-3 é usada como auxiliar

no estudo das alterações de crescimento, pois é dependente da ação do GH e útil na

avaliação de sua secreção13.

O zinco tem a propriedade de interagir em praticamente todos os passos do

crescimento ósseo, pois tem ação direta e indireta sobre o eixo-hipotálamo-hipófise-

fígado-osso, verificada tanto em animais de experimentação como em humanos7 (Figura

1).

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Figura 1. Ação do zinco sobre o crescimento ósseo longitudinal. Estimula a ação do

GHRH que por sua vez agirá sobre as células somatotróficas hipofisárias, as quais

sintetizarão e secretarão o GH. Esse hormônio irá atuar sobre os receptores hepáticos,

estimulando a síntese de IGF-1. Sua ação biológica se dará, sobretudo, nos condrócitos

das epífises ósseas, responsáveis pelo crescimento longitudinal ósseo. Esse crescimento

sofre ainda a influência de outros hormônios, tais como, do estradiol ao paratormônio

(PTH). Observa-se que o zinco age em todos os níveis dos mecanismos responsáveis

pelo crescimento ósseo.

O crescimento linear está diretamente ligado ao estado nutricional de uma criança

ou adolescente. Por exemplo, a restrição de energia e proteína reduz as concentrações

plasmáticas de IGF-1 e IGFBP-3. Por conseguinte, a deficiência de zinco afeta,

sobremaneira, o eixo hipotálamo-hipófise-fígado-osso5. Ainda, a restrição de nutrientes

afeta a sinalização do receptor de GH (rGH), o que provoca elevação dos níveis

plasmáticos de GH, resultado da resistência hormonal. Reduz também a síntese de IGF-1

e de sua proteína de ligação, IGFBP-314.

Há poucos trabalhos na literatura que reportam a suplementação de zinco como

fator de elevação positiva do crescimento linear em crianças pré-púberes15,16.

HIPÓFISE

FÍGADO

OSSO

GH

IGF-1

Condroblastos Osteoblastos Fibroblastos

Estradiol Testosterona Insulina Vitamina D3 T3 PTH

[--]

[--]

[-]

Zn++

Zn++

Zn++

Zn++

Zn++ +

+

+

+

+

+

HIPOTÁLAMO

GHRH [+]

SOMATOSTATINA [--]

Calcitonina Fosfatase Alcalina

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Diante do exposto, este estudo examinou os efeitos biológicos da suplementação

de zinco sobre o crescimento e secreção de GH, IGF-1 e IGFBP-3, em crianças

eutróficas, antes e após sua suplementação.

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2 JUSTIFICATIVA

O zinco é um micronutriente de importância vital para os organismos vivos,

principalmente os seres humanos. Interage positivamente com vários sistemas orgânicos

e é apontado como essencial para o crescimento e desenvolvimento. A sua deficiência

nem sempre é detectada pelos métodos laboratoriais de rotina, o que representa uma

ameaça à integridade da saúde humana. Nesse sentido, o presente estudo verificou os

seus efeitos sobre o crescimento linear de crianças entre 6 e 9 anos de idade, antes e

após sua administração oral, em doses fisiológicas (5 mg Zn/dia). Até o momento, não foi

encontrado nenhum desenho metodológico similar publicado, o que significa originalidade

e relevância do estudo.

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3 OBJETIVOS

3.1 Objetivo geral

Examinar os efeitos biológicos da suplementação com zinco sobre crescimento e

na secreção do GH, IGF-1 e IGFBP-3 em crianças eutróficas.

3.2 Objetivos específicos

Avaliar as crianças com indicador antropométrico IMC para idade;

Avaliar a ingestão de energia, macronutrientes, fibras, cálcio, ferro e zinco;

Avaliar o efeito da suplementação oral de zinco sobre a secreção hormonal de GH,

IGF-1, IGFBP-3;

Avaliar o efeito da administração intravenosa de zinco sobre a secreção hormonal

de GH, IGF-1, IGFBP-3;

Correlacionar os dados do zinco sérico com os de GH, IGF-1 e IGFBP-3.

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4 MÉTODOS

4.1 Caracterização dos pacientes

Foram estudadas 30 crianças de ambos os sexos, pré-púberes, faixa etária entre 6 e 9

anos, proveniente das Escolas Municipais Laura Maia, Henrique Castriciano e Ferreira

Itajubá, localizadas na região sul e oeste da Cidade de Natal/RN, Brasil. Foi usada uma

amostra não probabilística de conveniência de um universo de 45 crianças de ambos os

sexos. Devido perdas de amostras sanguíneas, 15 crianças foram excluídas do estudo.

Esse projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética e Pesquisa do HUOL da UFRN (protocolo

nº 005/06) e os pais ou responsáveis pelas crianças assinaram o Termo de

Consentimento Livre e Esclarecido.

4.2 Critérios de seleção

Os critérios de inclusão foram: crianças eutróficas, considerando os parâmetros

antropométricos, com idade entre 6 e 9 anos, aparentemente saudáveis, de acordo com a

avaliação médica e laboratorial e estar no estágio I de Tanner17,18, para crescimento

genital, mama e pelos pubianos. Os critérios de exclusão foram o início de pubarca,

telarca ou menarca, doenças agudas, crônicas, infecciosas ou inflamatórias, cirurgia de

qualquer natureza, uso de algum suplemento vitamínico-mineral.

4.3 Grupo de estudo

Todos as crianças foram suplementados oralmente com zinco (OZnS) por 3 meses.

A administração venosa de zinco foi realizada antes e depois da suplementação oral. A

Figura 2 descreve o desenho do estudo.

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Figura 2. Desenho do estudo.

4.3 Avaliação antropométrica

O peso corporal (kg) e a altura (cm) foram aferidos utilizando-se uma balança

eletrônica (Balmak, BK50F, São Paulo, Brasil) e um estadiômetro (Estadiômetro

Professional Sanny, American Medical do Brasil, São Paulo, Brasil), respectivamente.

Para aferição do peso, a criança permaneceu em pé sobre a balança vestindo roupas

leves e sem calçados. Para aferição da altura, a criança permaneceu em pé, sem

calçados, com os calcanhares juntos e o corpo o mais reto possível. Os calcanhares,

glúteo, ombros e cabeça tocaram a parede ou superfície vertical do equipamento de

medida. Os procedimentos foram realizadas pelo mesmo observador19.

A análise do estado nutricional foi baseada no indicador antropométrico índice de

massa corporal (IMC) para idade. O diagnóstico nutricional foi fundamentado com base

nas novas curvas de crescimento publicada pela Organização Mundial de Saúde, que

reconstruiu a referência de crescimento recomendada pela National Center for Health

Statistics , para as crianças dos 5 aos 19 anos20. Para a realização dos cálculos foi usado

o programa WHO AnthoPlus v1.0.4 (WHO, Geneva, Switzerland), disponível em

www.who.int/growthref/en/.

4.4 Avaliação dietética

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21

A avaliação dietética foi realizada mediante o registro alimentar de 3 dias

estimados, sendo dois dias do meio da semana e um do final de semana. O responsável

pela criança foi orientado como realizar adequadamente a técnica do registro alimentar,

anotando o horário de cada refeição e todos os alimentos consumidos com as suas

respectivas medidas caseiras. O cálculo de energia, macronutrientes, fibras, cálcio, ferro e

zinco dos cardápios consumidos foram realizados por intermédio do software Nut Win

versão 1.5 (Departamento de Informática em Saúde da UNIFESP, São Paulo, SP,

Brasil)21, adaptado para os alimentos consumidos de acordo com as tabelas de

composição disponíveis e/ou rótulos do fabricante. Adicionalmente, as recomendações

nutricionais para sexo e idades foram baseadas na FAO/WHO/UNU Expert Consultation,

200122.

4.5 Suplementação oral de zinco

As crianças foram suplementadas com 5 mg do elemento zinco/dia, na forma de

sulfato de zinco heptahidratado (ZnSO4.7H2O, Merck, (Darmstadt, Germany). Essa

fórmula apresentou boa solubilidade sem modificar as características sensoriais dos

alimentos e sem provocar quaisquer efeitos adversos. O xarope foi preparado no

Laboratório de Farmacotécnica do Departamento de Farmácia, UFRN. Cada gota contém

1mg do elemento zinco. Cinco gotas do xarope foram adicionadas ao leite ou suco toda

manhã, durante o desjejum. A sua ingestão foi controlada a cada 2 semanas pelo mesmo

observador 19. Cada frasco de solução de zinco era entregue por vez.

4.6 Administração venosa de zinco

O teste venoso foi iniciado às 7 horas da manhã, depois de 12 horas de jejum, e

finalizado às 10 horas da manhã, com a criança mantida em decúbito dorsal. Uma veia

antecubital foi puncionada e a infusão de soro fisiológico – livre de zinco – foi mantida até

o final do teste. A primeira urina foi descartada e o tempo foi cronologicamente marcado

até a coleta da segunda amostra urinária, ao final do teste. Antes da injeção de zinco, foi

coletada uma amostra sanguínea basal. Em seguida, foi administrado, intravenosamente,

0.06537 mg Zn/kg de peso corporal (1 µmol ZnSO4.7H2O), e nomeado como tempo 0 min.

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Em seguida, foram coletadas, em seringas de plástico polipropileno, amostras de sangue

aos 30, 60, 90 e 120 minutos após a infusão de zinco. O volume sanguíneo foi de 5 mL

por amostra coletada. Depois de 60 minutos, cada criança ingeriu 4 mL de água ultra

pura/kg de peso corporal (Milli-Q Plus Millipore, Billerica, MA, USA) para facilitar a coleta

de urina ao final do teste19. Cada ampola continha 5 mL = 40 μ mol ZnSO4.7H2O, as quais

foram preparadas na InjectCenter – Manipulação de Injetáveis, Ribeirão Preto, São Paulo,

SP, Brazil.

4.7 Coleta do material biológico

Todas as amostras foram coletadas em tubos livres de metal (BD Vacutainer; BD,

Franklin Lakes, NJ, USA), e os processos relacionados ao manuseio das amostras de

zinco foram realizados de acordo com normas internacionais23.

4.8 Avaliação bioquímica e hormonais

Os hormônios foram dosados pelo método de quimioluminescência (IMMULITE®

1000, Immunoassay System, Siemens, USA); o hematológico foi realizado pelo auto-

analisador (Horiba ABX Diagnostics, Micros 60, Montpellier, France); creatinina, proteínas

totais e frações, foram analisadas pelo auto-analisador (Dade Behring, Dimension AR,

Ilinois, USA). O zinco sérico foi determinado pelo método de espectrofotometria de

absorção atômica (SpectrAA-200, Varian, Victoria, Australia). O aparelho foi previamente

calibrado, após estabelecimento de uma curva de linearidade (r² > 0.999) a partir de

concentrações crescentes de solução-padrão (0.0 – 1.0 mg/L ou ppm) versus

absorbância. A solução-padrão de zinco (1000 mg/dL) foi obtida por diluição de titrisol zinc

standard (Merck, Darmstadt, Germany) em água ultra pura. A sensibilidade foi de 0,01

µg/mL, o coeficiente de variação, intra-ensaio foi de 2,37%, e os valores de referências

foram 70 – 110 µg/dL24.

4.9 Análise estatística

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23

A análise estatística foi realizada usando o teste de Shapiro–Wilk para verificar a

distribuição amostral; o teste t de Student para dados pareados, para comparar as médias

das variáveis de ingestão alimentar, antropometria, hormônios e zinco sérico, antes e

depois da suplementação oral de zinco; a área sob a curva (AUC), para comparar as

áreas de zinco sérico e dos hormônios durante a administração venosa de zinco e a

correlação de Person, para correlacionar os dados de zinco sérico versus dados

hormonais. P<0,05 foi considerado significativo. Os resultados foram apresentados como

média ± EPM, os quais foram analisados no programa GraphPad Prism v.5.04 (GraphPad

Prism software, San Diego, CA, EUA).

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5 ARTIGOS PRODUZIDOS

Título: Positive effects of zinc supplementation on growth, GH, IGF1, and IGFBP3 in

eutrophic children

Periódico: Journal of Pediatric Endocrinology and Metabolism

Fator de impacto: 1.026

Qualis: B2 da CAPES para área Medicina II

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6 COMENTÁRIOS, CRÍTICAS E CONCLUSÕES

O projeto inicial tinha como objetivo observar os efeitos biológicos do zinco no

crescimento e secreção do GH, IGF-1 e IGFBP-3 em crianças eutróficas, foi desenvolvido

a contento não necessitando de alterações na metodologia. Os resultados satisfatórios da

execução deste projeto são creditados à experiência do nosso grupo diante de estudos

anteriores envolvendo o zinco e a saúde de crianças e adultos.

Trata-se de um estudo com um desenho metodológico inédito não havendo

referências anteriores na literatura científica do emprego desta metodologia, que contou

com a participação de vários acadêmicos, por exemplo, nutricionistas, médicos,

farmacêuticos e estatista. Esta multidisciplinaridade foi muito importante para o

desenvolvimento do estudo.

Os resultados gerados proporcionaram novas informações para compreender o

papel do zinco no crescimento de crianças, e sua publicação é importante para a

comunidade científica.

Durante a realização do mestrado pude participar de dois projetos de doutorado e

com estes, tive a oportunidade de aprender técnicas laboratoriais e vivenciar o ambiente

de pesquisa, experiências importantes para a consolidação desta etapa acadêmica. Além

disso, nesse período, nosso grupo realizava reuniões científicas semanais discutindo

reflexiva e criticamente artigos científicos, as quais me proporcionaram estudo contínuo e

atualizado de assuntos pesquisados pelo grupo.

Entendendo que a divulgação científica é parte inerente à pesquisa, participei dos

seguintes eventos com apresentação de resultados de estudos desenvolvidos no

Programa de Pós-graduação em Ciências da Saúde:

Vale SHL; Dantas MMG, Alves CX, Brito NJN, Leite LD, Brandão-Neto J. Different

methods of clearance for diagnosing zinc deficiency in prepubertal children. In:

International Conference on Growth and Nutrition, 2012, Paris. (Apêndice 1)

Alves CX, Vale SHL, Brito NJN, Dantas MMG, Maia AA, Leite LD, Brandão-Neto

J. Zinc supplementations on growth and hormonal secretion of GH, IGF1 and

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IGFBP3 in prepubertal children. In: International Conference on Growth and

Nutrition, 2012, Paris. (Apêndice 2)

Moura JE, Dantas MMG, Alves CX, Vale SHL, Araújo DM, Leite LD, Brandão-Neto

J. Cognitive function of elementary school children improved by oral zinc

suplementation. In: Conference on Growth and Nutrition, 2012, Paris. (Apêndice 3)

Baracho MFP, Leite LD, Vale SHL, Alves CX, Santos MGN, Farjado CM, Hirata

MH, Brandão-Neto J. Association of PPAR-Gamma2 Polymorphism on Lipid

Profile in Berardinelli-Seip Syndrom. In: 6th Congress of the International Society

of Nutrigenetics / Nutrigenomics, 2012, São Paulo. (Apêndice 4)

Some-se a estes a publicação de um artigo em periódico de circulação

internacional categorizadas no Qualis B da CAPES:

Quirino MAB, Modesto-Filho J, Vale SHL, Alves CX, Leite LD, Brandão-Neto,

José. Influence of basal energy expenditure and body composition on bone

mineral density in postmenopausal women. International Journal of General

Medicine, 2012:5 909-915. (Apêndice 5)

Atualmente encontra-se em fase de resposta aos revisores um artigo submetido ao

periódico Biological Trace Element Research (Apêndice 6). Outro artigo, com objetivo

disponibilizar novos valores de referência de zinco para crianças entre 6 e 9 anos de

idade, está sendo escrito e será submetido para publicação brevemente.

Com a minha inserção no grupo de pesquisa, foi possível conhecer e participar

como nutricionista voluntária do Ambulatório Multidisciplinar de Esclerose Lateral

Amiotrófica do Hospital Universitário Onofre Lopes (ELA/HUOL). Nele colaboro com o

projeto de extensão: “Ambulatório multidisciplinar para atendimento de portadores de

DNM/ELA”, que tem a participação de professores e alunos da UFRN, além de

profissionais de outras áreas da saúde. Adicionalmente, tive a oportunidade de participar

de uma banca de Trabalho de Conclusão de Curso, cuja monografia referia-se a

pacientes portadores de ELA.

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Além disso, durante o último semestre do mestrado fui aprovada no concurso para

professora substituta na área de Nutrição Clínica da UFRN.

A participação em um grupo de pesquisa multidisciplinar e minha inserção no

Programa de Pós-graduação em Saúde que também possui esta pluralidade de saberes,

me instiga a dar continuidade aos estudos iniciados e aprofundar os conhecimentos em

micronutrientes e nutrigenômica, vislumbrando a continuidade de uma carreira

acadêmica, valorizando uniformemente as ações de pesquisa, o ensino e a extensão.

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REFERÊNCIAS

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Nutr 2009;28:257-65.

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17: 79-87.

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beings. Arq Med ABC 2006;31:46-52

4. MacDonald RS. The role of zinc in growth and cell proliferation. J Nutr 2000; 130

(Suppl 1):1500-1508.

5. Rivera JA, Hotz C, González-Cossío T, Neufeld L, García-Guerra A. The effect of

micronutrient deficiencies on child growth: a review of results from community-based

supplementation trials. J Nutr 2003;133:4010-4020.

6. Beyersmann D, Haase H. Functions of zinc in signaling, proliferation and

differentiation of mammalian cells. BioMetals 2001;14:331–341.

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8. Cunningham BC, Mulkerrin MG, Wells JA. Dimerization of human growth hormone by

zinc. Science 1991;253:545-8.

9. Martinelli CE Jr, Custódio RJ, Aguiar-Oliveira MH. Fisiologia do Eixo GH-Sistema

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10. Spinola AM, Guerra-Júnior CG. GH/IGF-1 and cancer: what’s new in this association.

Arq Bras Endocrinol Metab 2005;49:833-842.

11. IMMULITE 1000 systems for hGH.

12. IMMULITE 1000 systems for IGF-1.

13. IMMULITE 1000 systems for IGFBP-3.

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14. Díaz-Gómez NM, Doménech E, Barroso F, Castells S, Cortabarria C, Jiménez A. The

effect of zinc supplementation on linear growth, body composition, and growth factors

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15. Brown KH, Peerson JM, Rivera J, Allen LH. Effect of supplemental zinc on the growth

and serum zinc concentrations of prepubertal children: a meta-analysis of

randomized controlled trials. Am J Clin Nutr 2002;75:1062–1071.

16. Martorell R. Benefits of zinc supplementation for child growth. Am J Clin Nutr

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17. Marshall WA, Tanner JM. Variations in pattern of pubertal changes in girls. Arch Dis

Child 1969;44:291–303.

18. Marshall WA, Tanner JM. Variations in the pattern of pubertal changes in boys. Arch

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19. Leite LD, Rocha ED, Almeida MG, Resende AA, Silva CA, et al. Sensitivity of zinc

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20. Onis M, Onyango AW, Borghi E, Siyam A, Nishida C, et al. Development of a WHO

growth reference for school-aged children and adolescents. Bull Word Health Organ

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21. Programa de Apoio à Nutrição – NutWin. Versão: 1.5. São Paulo: Departamento de

Informática em Saúde – SPDM – Unifesp/EPM, 2002. 1 CD-ROM. Programa de

computador.

22. Human energy requeriments: report of a Joint FAO/WHO/UNU Expert Consultation.

Rome, Italy, 17-24 October 2001.

23. Hess SY, Peerson JM, King JC, Brown KH. Use of serum zinc concentration as an

indicator of population zinc status. Food Nutr Bull 2007;28(Suppl 3):S403 – 29.

24. Gibson RS, Hess SY, Hotz C, Brown KH. Indicators of zinc status at the population

level: a review of the evidence. Br J Nutr 2008;99(Suppl 3):S14–S23.

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APÊNDICE

Apêndice 1 - Different methods of clearance for diagnosing zinc deficiency in prepubertal

children.

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Apêndice 2 - Zinc supplementations on growth and hormonal secretion of GH, IGF1 and

IGFBP3 in prepubertal children.

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Apêndice 3 - Cognitive function of elementary school children improved by oral zinc

suplementation.

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Apêndice 4 - Association of PPAR-Gamma2 Polymorphism on Lipid Profile in Berardinelli-

Seip Syndrome.

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Apêndice 5 - Influence of basal energy expenditure and body composition on bone mineral

density in postmenopausal women.

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Apêndice 6 – Oral zinc supplementation may improve cognitive function in schoolchildren.