Micropipetas: Funcionamento, Uso Correto e Manutenção

Flávia Aleixo VasconcellosRegina Maria Castelli

MICROPIPETAS E EQUIPAMENTOS VOLUMÉTRICOS

Uso: pipetagem de pequenos

volumes (microlitros).

Elas devem apresentar boa acurácia e precisão.

Nos laboratórios, geralmente são designadas pela letra P seguida pelo volume máximo que podem pipetar. Ex: P1000, P200, P20.

Acurácia é a diferença entre o que foi realmente pipetado e o que foi requisitado

Precisão é a repetibilidade. Ambas as características são representadas em % (quanto menor melhor).

O volume mínimo recomendado para cada micropipeta é de 10% da sua capacidade

Os manuais das micropipetas apresentam uma tabela com valores de acurácia e precisão aceitáveis para diferentes micropipetas e volumes aferidos.

Se os valores (%) estiverem fora do intervalo aceitável, recomenda-se calibrar a micropipeta.

TIPOS DE MICROPIPETAS (quanto ao funcionamento)

DESLOCAMENTO POSITIVO

Pipetas de êmbolo com ponta em PTFE que proporcionam deslocamento positivo de amostras num tubo capilar de precisão.

Ótima acurácia e precisão em pipetagem de líquidos de alta densidade, viscosos, espumantes ou voláteis.

São recomendadas para pipetagem de líquidos “tóxicos” (radioativos, bases e ácidos fortes...). O líquido é deslocado pelo êmbolo.

• DESLOCAMENTO DE AR

Recomendadas para amostras aquosas. O líquido é deslocado pelo ar.

NÃO RECOMENDÁVEL PARA LÍQUIDOS “TÓXICOS”

Micropipeta monocanal Micropipeta multicanal

• USO CORRETO DA MICROPIPETA

Manter a micropipeta na posição vertical durante a pipetagem;

Trocar a ponteira antes de aspirar líquido, amostra ou reagente diferente;

Pressione e solte o botão de modo lento e constante;

Encaixar a ponteira com movimento de rotação;

Inserir o mínimo possível a ponteira no líquido a ser pipetado;

Finalize o ajuste de volume sempre no sentido horário;

NUNCA pipete líquidos onde T > 70°C ou T < 4 °C; NUNCA vire a pipeta de cabeça para baixo; NUNCA deite a pipeta enquanto houver líquido na ponteira; NUNCA utilize graxa ou silicone no pistão ou selos; NUNCA tente ajustar o volume acima da especificação;

Enquanto aspirar, mantenha a ponteira a uma profundidade constante abaixo da superfície do líquido;

Quando em repouso deixar a micropipeta ajustada no volume máximo;

MANUTENÇÃO

Limpeza externa

Remover o ejetor de ponteiras;

Limpar o ejetor de ponteiras com um pano embebido em solução de detergente;

Limpar a parte externa da pipeta;

Passar um pano embebido com água destilada para enxaguar o ejetor de ponteiras e no corpo da pipeta;

-Recolocar.

• Limpeza interna

Desmontar a pipeta;

Deixar o corpo da pipeta em um local seco;

Limpar as peças da parte inferior utilizando um banho de ultrasson por 20 min;

Enxaguar as peças com bastante água corrente,o último enxagüe com água destilada;

Deixar secar em temperatura ambiente;

Montar a pipeta para um novo uso.

• CALIBRAÇÃO

Consultar o manual.

Pesar água destilada em balança de precisão (1 mL água destilada = 1 g; 1 L água destilada = 1 mg).

O ambiente, balança, água e micropipeta devem estar entre 20 e 25C.

FIXANDO !!!!

A) Botão com código de cores

B) Corpo da pipeta ou handle

C) Porca de conexão

D) Ponteira

E) Ejetor de ponteiras

F) Botão de ejeção

H) Porta-cone

T) Tambor de ajuste do volume

V) Volúmetro

REPRESENTAÇÃO GRÁFICA DA

MICROPIPETA

REPRESENTAÇÃO GRÁFICA DA TÉCNICA DE PIPETAGEM

POSIÇÃO DE REPOUSO

1° ESTÁGIO

2° ESTÁGIO

Muito Obrigada!