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Boletim Informativo, Ano 11, Edição 7 e 8 41 3076.4300 / 3267.4303 | WWW.PETIMAGEM.COM.BR 1 Novidade no acesso aos resultados on-line Questões que fazem a diferença nos resultados de exames laboratoriais J á neste mês estará disponível a troca do LOGIN e SENHA para os resultados on line. Estamos assim concretizando um dos pedidos mais recorrentes em nossa pesquisa de satisfação. Assim estamos melho- rando ainda mais nossa relação com todos e buscando a excelência e qualidade nos trabalhos. Estamos à disposição para esclarecer dúvidas e a qualquer momento vocês poderão fazer esta alteração. A confiabilidade no uso do seu laboratório de confiança como apoio diagnóstico dependerá muito da qualidade do material para análise, ou seja, a colheita e conservação adequada da amostra farão a diferença. É claro que não devemos esquecer que deve haver uma relação estreita entre o mé- dico veterinário clínico e o laboratório de diagnóstico. Quando amostras inadequadas são enviadas ao laboratório certamente teremos perda de tempo, de recursos e, em ocasiões, complicações na saúde do animal devido a uma interpretação incompleta ou incorreta de resultados. Aqueles cuida- dos básicos que aprendemos são realmente fundamentais, e aqui vamos relembrá-los: técnicas de colheita para minimizar as alterações que possam ocorrer antes (ex. estresse), durante (ex. garrotea- mento prolongado a anti-sepsia inadequada), e após colheita (ex. contaminação). Abaixo vamos discorrer sobre alguns assuntos interessantes e de extrema importância para o uso dos exames laboratoriais com precisão. Matéria Técnica do Mês Dra. Danielle Murad Tullio Membro do Colégio Brasileiro de Radiologia Veterinária

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Boletim Informativo, Ano 11, Edição 7 e 8

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Novidade no acesso aos resultados on-line

Questões que fazem a diferença nos resultados de exames laboratoriais

Já neste mês estará disponível a troca do LOGIN e SENHA para os resultados on line. Estamos assim

concretizando um dos pedidos mais recorrentes em nossa pesquisa de satisfação. Assim estamos melho-rando ainda mais nossa relação com todos e buscando a excelência e qualidade nos trabalhos.

Estamos à disposição para esclarecer dúvidas e a qualquer momento vocês poderão fazer esta alteração.

Aconfiabilidadenousodoseulaboratóriodeconfiançacomoapoiodiagnósticodependerámuito da qualidade do material para análise, ou seja, a colheita e conservação adequada da amostra farão a diferença. É claro que não devemos esquecer que deve haver uma relação estreita entre o mé-dicoveterinárioclínicoeolaboratóriodediagnóstico.Quandoamostrasinadequadassãoenviadasaolaboratóriocertamenteteremosperdadetempo,derecursose,emocasiões,complicaçõesnasaúde do animal devido a uma interpretação incompleta ou incorreta de resultados. Aqueles cuida-dos básicos que aprendemos são realmente fundamentais, e aqui vamos relembrá-los: técnicas de colheitaparaminimizarasalteraçõesquepossamocorrerantes(ex.estresse),durante(ex.garrotea-mentoprolongadoaanti-sepsiainadequada),eapóscolheita(ex.contaminação). Abaixovamosdiscorrersobrealgunsassuntosinteressantesedeextremaimportânciaparaouso dos exames laboratoriais com precisão.

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O envio de amostras As amostras devem ser enviadas sempre coma identificação adequada nos tubos e para istoutiliza-sematerialqueresistaaomanejo,ouseja,tintaspermanentesresistentesàágua,fitascomcolaouetiquetascomadesivoapropriado.Asmostrasdevemserenviadaslogoapósacolheitaedeprefer-ênciarefrigeradas.Aembalagemaserusadadeveserseguraparaaamostraeprincipalmenteaosquea manusearão. No caso que vários exames de-vam ser realizados, é desejável colher todas as amostras no mesmo momento, pois isso per-mite a correlação dos achados e evita a pos-sibilidade de que, entre as colheitas, o quadro clínico tenha mudado, produzindo inconsistên-cias nos resultados obtidos. Normalmenteas requisiçõesparaoen-vio apresentam campos para o preenchimento com informações importantes,mas caso vocênão tenha este material, podemos destacar abaixo as informações que podem sem en-caminhadas num receituário juntamente com as amostras:• Identificaçãodo proprietário,médico veter-inário ou pessoa responsável, com pelo menos os telefones;•Dadosdeidentificaçãodoanimal;•Anamnesedopacientepodendoconterdadosdahistóriaclínica,nutriçãoereprodução;esehásus-peita de doenças infecciosas, especialmente se zoonoses;•Ousodequalquer tratamentomedicamentoso,dietadiferente,excitação/agitaçãoduranteacol-heitadaamostra,ouautilizaçãodeumanestésicogeralquepossaserrelevantenainterpretaçãosub-seqüente dos resultados.

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As amostras para hemograma Para o hemograma não importa o vaso sangüíneo sele-cionado para realizar a obtenção da amostra, uma vez que não existemdiferençassignificativasnasconcentraçõesdoscompo-nentessangüíneos.Ousodaveiajugularpodeserdegrandevalia,poiségrandeosuficiente,atémesmoemgatosparaquesejamaspiradosaté5mLdesangueempoucossegundos.Estefatornacoletaminimizaaestasevenosaeahemóliseepermitequeaamostrasejatransferidaparaumtubocomanticoagulanteantesdecomeçara coagular. Paraeste tipodecoletaoperíododecontençãoémuitomaiscurtoe,muitosanimaisparecem rejeitar menos o posicionamento. Oácidoetilenodiamino tetra-acético (EDTA) éoanticoagulantedeescolhaparaa realizaçãodohemogramanasespéciesdomésticascomoocãoeogato.Aheparinanãoécapazdeimpediraagregaçãoplaquetáriaecausaalteraçõesmorfológicasnosleucócitos,eporissonãodeveserutilizadaparaacolheitadesangueparafinsderealizaçãoeinterpretaçãodohemograma.Ocitratodesódioérecomendadoparaosestudosdasplaquetasetestesdecoagulação. Ousodetubosavácuonãoépreconizadoempequenosanimaisdevidoàocorrênciadehemólisenaamostra,sendomaisusadaacolheitaemseringa.Nestatécnicadevemoslembrarqueapósacol-heitadeveserrealizadaatransferênciadosangueparaotubocomEDTA,quedeveestarinclinadodeformaqueosanguedesçapelaparede,minimizandoahemólise.Deve-sefecharimediatamentetuboehomogeneizarporinversãodelicadamente,propiciandoqueoanticoagulanteentreemcontatocomtodaaamostra.ÉessencialqueostuboscomEDTAsejam,preenchidoscomovolumeespecificadonorótulo,poisse forcolhidaumaquantidademuitopequenadesangue,aconcentraçãoresultantedeEDTAdanificaráascélulas,eseaocontrário,otuboforporpreenchidoemdemasia,osangueprovavel-mentecoagulará. Devemoslembrarqueashemáciasapresentamaumentodasuscetibilidadeàliseapós24horasemcontatocomEDTA.Estefatopermitequeumaamostrapossaserprocessadaaté24horasapósacolheita,desdequeamesmapermaneçasobrefrigeração,esperandopelomenos15minutosdepoisdacolheitaemtemperaturaambienteantesdeserrefrigerada,paraevitarqueocorrahemólise.Seosanguecolhidopermaneceratemperaturaambiente,eledeveserprocessadoomaisrápidopossívelpoisasmostrassangüíneasarmazenadasnoEDTApodemproduziralteraçõesleucocitáriaseartefatosmorfológicosnaslâminasdeesfregaçoseosanguefordeixadoemtemperaturaambientepormaisde3 horas.

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HemóliseAbaixocolocamosasprincipaiscausasdehemólisequerpodemafetaraanálisedomaterial:

•Aspirarsanguerapidamenteparadentrodaseringa,usandoumaagulhacomcalibrepequeno;•Tuboscomfluoreto,quealteramometabolismodashemáciaseadeterioraçãocelularcomeçaimediata-mente.•Seringasouagulhasúmidas,ouáguaentrandonostubosdecolheita;•Perderovasonomeiodacolheitaeaplicarpressãonegativanosanguejápresentenaseringa,aoprocurarpelo vaso “perdido”;•Colocarosanguenotubodecolheitasemtiraraagulhadaseringa,aqualsempredeveserremovida;•Homogeneizaçãoviolenta,poisainversãorepetidaésuficienteparahomogeneizaradequadamente;•Amostraslipêmicas(ausênciadejejumadequado)•Tempodecorridoatéoprocessamento,especialmenteseaamostranãoforrefrigerada;•Congelamentodaamostra.

Abaixoestãoasalteraçõesnohemogramaeproteínaplasmáticatotaldecorrentesdeamostrashemolisa-das,lembrandoqueograudealteraçõesestárelacionadocomahemóliseevidenciadanaamostra.

Exame EfeitodaHemóliseEritrograma ↓contagemdeeritrócitos

↑hemoglobina↑CHCM↓VCM

Proteína Plasmática Total aumento

Efeitosdahemólisenosparâmetroseritrocitáriosdohemogramaenaproteínaplasmáticatotal(PPT).

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Medo e excitaçãoEssesefeitossedãoprincipalmentepeladescargadeadrenalina,etendemasermaispronunciadosnogatoquenocão,alémdeseremtransitórios.Particularmentenogato,estesefeitospodemestarassocia-doscomomedoeacontençãonacolheitaetambémsãoevidentesemamostrassangüíneascolhidassobanestesiageral,setiverocorridoexcitaçãoduranteaindução.

Exame Efeito da LipemiaEritrograma ↑hemoglobina

↑CHCM

↑transitórionohematócrito,CHCMecontagemdeeritrócitos(contraçãodobaço,liberandomaiseritróci-tosparaacirculação)↑neutrófilossegmentadosquemigramdocompartimentomarginalesãotemporariamenteredistribuídospara o compartimento circulante, causando um discreto aumento no seu número, um efeito que dura cerca de30minutos.Istonãoémuitocomumemcães,masocorrefreqüentementeemgatos,naquelesmaisjovensesaudáveis(émenosfreqüenteemanimaisdoentes),sendoquenestecasonãohaverádesvioàesquerda;↑temporáriodonúmerodelinfócitosnacirculação(geralmentemaiorqueoaumentodeneutrófilos)ocorreemgatos,masnãoemcães;Alteraçãonacontagemdeeosinófilos,primeiramenteocorreumadiscretaeosinofilia(picoapós1hora),seguidadeumaeosinopeniamoderadacommenoresvaloresapós,aproximadamente,4horas;↑plaquetas,poiselassãomobilizadasdobaçoapósaexcitação,sendoquenogatopodeserdeapenas3minutos.

Efeitosdalipemianosparâmetroseritrocitáriosdohemograma

Relatamosabaixoosprincipaisefeitosdomedoeexcitaçãonohemograma.

LipemiaAlipemiaocorrecomfreqüênciaemamostrascolhidasexatamenteapósalimentaçãodopaciente,nãosendo um problema da amostra ou do manuseio desta, e sim uma característica do paciente, podendo serevitadapelojejumnomínimode6a12horas.Estasalteraçõessedevemnormalmentepeloefeitodoaumento da turbidez na membrana fotométrica o que irá atrapalhar a leitura do exame.

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As amostras para procedimentos bioquímicos Amaiorpartedasanálisesbioquímicas requersangue total,plasmaousoroeemcasodedúvidassempreentraremcontatocomolaboratórioparaconfirmaraamostraasercoletada.Aprin-cipal fonte de deterioração, no que se refere aos exames bioquímicos, são as hemácias, as quais de-vem ser separadas o mais rápido possível. A melhor maneira de tratar uma amostra para bioquímica é fazer a separação do plasma ou soro imediatamente depois da colheita, mas caso haja atraso na separação das hemácias da amostra, isso fará toda a diferença entre uma amostra útil e uma massa hemolisada que não deverá ser analisada.

Já no caso da lipemia ocorre a alteração da amostra devido ao fato de que a opacidade in-terferecomanálise fotométricae,noscasosgraves,fica impossívelobterosvaloresbioquímicos.Abaixorelatamososprincipaisefeitosdalipemianabioquímicasangüínea:

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↑Aspartatoaminotransferase(AST)↑Alaninaaminotransferase(ALT)↑Lactatodesidrogenase(LDH)↑Creatinaquinase(CK)↓Amilase↑Lipase↓↑FosfataseAlcalina(FA)↑Proteínatotal↑Albumina↑Cálcio↑Fósforo↓Creatinina↑PotássionaraçaAkita↑levenaBilirrubina

Atividadedaamilasefalsamente↑,sendoumaconsideraçãoimportantenodiagnósticodepancreatiteagudaporqueapresençadelipemiaébastanteprovávelNíveisdesódioepotássiofalsamente↓,poisoseletrólitosestãopresentesapenasnafraçãoaquosadoplasma/soro,enocasodeumgrandeaumentonafraçãolipídica(nãoaquosa),háoefeitode“diluição”desódioepotássiopresentesnovolumedaamostraemquestão;

Ao lado relatamos as alterações nosexames bioquímicos decorrentes da análise de uma amostra hemolisada.

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A amostra para urinálise A primeira etapa na realização de uma urinálise é a colheita apropriada de uma amostra urinária,quedeveserobtidacuidadosamenteparagarantirresultadossignificativos.Háquatromé-todos básicos para colheita de uma amostra urinária: cistocentese, cateterização, compressão vesi-calemicçãoespontânea.Osmétodospreferidosdacistocenteseecateterizaçàosãoospreferidos,pois proporcionam amostras ideais para todos os aspectos da urinálise ao manter a amostra livre da contaminaçãoapartirdotratogenitaldistaledasáreasexternas.Oidealéqueaanálisesejafeitadentrode30minutosapósacolheitaparaevitarartefatospós-col-heitaealteraçõesdegenerativas.Seumaanáliseimediatanãoforpossível,arefrigeraçãopreservaa maior parte dos constituintes urinários por 6 a 12 horas adicionais.

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Ahemólisetambéméumaconseqüência,poisalipemiaaumentaatendênciaàhemóliseapóscolheita e manipulação. Como efeito da lipemia o aumento dos valores dePPT, obtidos com um refratômetro, que podem estar falsamente elevados pela turbidez e, dependendo daacuráciaoudadeterminaçãodealbumina,produzemumarelaçãoalbumina/globulinaimprecisa.

Atividadedaamilasefalsamente↑,sendoumaconsideraçãoimportantenodiagnósticodepancreatiteagudaporqueapresençadelipemiaébastanteprovávelNíveisdesódioepotássiofalsamente↓,poisoseletrólitosestãopresentesapenasnafraçãoaquosadoplasma/soro,enocasodeumgrandeaumentonafraçãolipídica(nãoaquosa),háoefeitode“diluição”desódioepotássiopresentesnovolumedaamostraemquestão;

Medo e excitação na bioquímica sangüínea O medo e a excitação podem causar uma elevação nos va-loresdeglicose,porémnoscãesaconcentraçãodeglicoserar-amenteexcede150mg/dLpelaexcitaçãoe,portanto,époucocomumhaverglicosúria.Jánosgatos,aconcentraçãodeglicosenosanguepodeatingir300a400mg/dLouatémais,comaex-citaçãoemedopodendoocorrerglicosúria.Assimtemosquetermuitaatençãoparanãodarerroneamenteodiagnósticodedia-betes.

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Nocasodeamostrasquesãodeixadasrepousarporlongosperíodosemtemperaturaambienteen-contraremosasseguintesalterações:

Nocasodeamostrarefrigeradapodehaveraformaçãodemuitoscristais,eamesmadeveseraquecidas em temperatura ambiente antes da avaliação e, ocasionalmente, cristais que são forma-dos durante o resfriamento podem não dissolver quando a amostra é aquecida. As células tendem a se deteriorar rapidamente na urina e, assim, caso se tenha de realizar umaavaliaçãocitológica,deve-secentrifugaraurinalogoapósacolheitaeacrescentar1a3gotasdesorodopacienteoualbuminabovinaaosedimentoparapreservaramorfologiacelular.

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↓daglicoseebilirrubina↑pH(degradaçãobacterianadauréiaemamônia)formação de cristais com aumento da turvação da amostradesintegraçãodecilindroseeritrócitos(especialmenteemurinadiluídaoualcalina)proliferação bacteriana↑levenaBilirrubina

Glicosúria,achamadaglicosúriaemocional,causadapelaliberaçãosúbitadeadrenalina,quelevaaumaumentodamobilizaçãodaglicose.↑pHquepodeserresultadodeansiedade,causandopalpitação(hiperventilação)eperdadedióxidodecarbono.

Medo e excitação na urinálise Asalteraçõescausadasnaurinálisepelomedoeaexcitaçãosãoasseguintes:

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As amostras para análises de efusões Acolheitadoslíquidoscavitáriossefazatravésdapunçãocomseringaeagulha.Deve-sefazersem-preumatricotomianolocaldeintroduçãodaagulhaeprocederaumaanti-sepsiarigorosa,nãoesquecendonunca o risco de contaminação dos tecidos adjacentes que o procedimento oferece. Aconselhamos utilizar umaagulhafina,poisasagulhasmaisgrossasapresentamoinconvenientedeproduzirumorifíciomuitograndequepodelevaraoextravasamentodelíquido. No caso da quantidade coletada ser pequena esta deve ser transferida imediatamente a um frasco contendo EDTA. Já no caso de uma quantidade maior, deve-se encher também um tubo de ensaio sem anticoagulante.OfluidoacondicionadonotubocomEDTAserveparapreveniracoagulaçãoumavezqueécomumapunçãodepequenosvasosnomomentodacolheita,eestefluidodeveserutilizadoparaadeter-minaçãodecontagemcelular.Ofrascosemanticoagulanteseráútilparaavaliarparâmetrosbioquímicos.

Considerações finais Osexameslaboratoriaissãomuitoúteisnodirecionamentododiagnósticoenaevoluçãodediver-saspatologias,mascomoobservamosaquiaobtençãoderesultadosconfiáveisdependeprincipalmentedaqualidadedaamostraenviada.Portanto,olaboratóriodeanálisespoderáserdegrandeauxílionain-vestigaçãoeacompanhamentodasafecções,desdequeoclínicoforneçaumaamostraadequadaconsid-erando os vários fatores já descritos anteriormente para uma melhor interpretação dos exames.