livro virologia veterinária carter wise e flores

8/19/2019 Livro Virologia Veterinária Carter Wise e Flores

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A Concise Review of Veterinary

Virology

G.R. Carter1, D.J. Wise2 and E.F. Flores !Eds."

1Professor Emeritus of the Department of Medical Sciences and Pathobiology, Virginia-MarylandRegional College of Veterinary Medicine, Virginia ech, !lac"sburg, Virginia, #S$%&Department of !iology, Concord #ni'ersity, $thens, (est Virginia, #S$%

)Department of Veterinary Pre'enti'e Medicine, *ederal #ni'ersity of Santa Maria, Santa Maria,RS !ra+il%

http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=447%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1321%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1322%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=447%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1321%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1322%27;displayInfo()


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n $ Concise Re'ie. of Veterinary Virology, Carter /%R%, (ise D%0% and *lores E%*% Eds%2%nternational Veterinary nformation Ser'ice, thaca 34 ...%i'is%org2, 5ast updated 6-Dec-&7789 $)877%1&78%P

#ref$cio

/%R% Carter 1, D%0% (ise& and E% *% *lores)1Virginia-Maryland Regional College of Veterinary Medicine, Virginia ech, !lac"sburg,Virginia, #S$%&Department of !iology, Concord #ni'ersity, $thens, (est Virginia,#S$%)Department of Veterinary Pre'enti'e Medicine, *ederal #ni'ersity of Santa Maria, SantaMaria, RS !ra+il%radu+ido por E% *% *lores, Department of Veterinary Pre'enti'e Medicine, *ederal #ni'ersityof Santa Maria, Santa Maria, RS !ra+il% &8-3o'-&77:2%

; obrios, com ?nfase especial nos aspectos @ue s=o rele'antes para a pr>tica 'eterin>ria derotina% Esse li'ro tambAm ser> acessB'el e til para assistentes de 'eterin>rios e tAcnicos%Este li'ro foi inspirado na se=o de 'irologia escrita por $% (ayne Roberts, na @uinta edi=o doli'ro PrincBpios de Microbiologia Veterin>ria, @ue caracteri+ou-se pela sua obtica s=o mantidas, porAm asenfermidades 'Bricas s=o descritas por famBlias 'irais e n=o por hospedeiros e sistemas% $abordagem taon?mica tem a 'antagem de agrupar enfermidades com caracterBsticas b>sicas e

patog?nicas similares% #m eemplo s=o as semelhanas das enfermidades causadas por alguns par'o'Brus%$ introdu=o deste li'ro apresenta todos os conhecimentos cl>ssicos e recentes de 'irologia

b>sica, incluindo a taonomia atual e as tAcnicas moleculares mais recentes% $ aplica=o dastAcnicas moleculares A particularmente enfati+ada na se=o do diagnFstico%$ idAia foi incluir informaGes suficientes, porAm n=o ecessi'as, clBnicas e patolFgicas,fornecendo consideraGes integrais e interessantes de enfermidades importantes% Para ali'iar o

possB'el tAdio na descri=o das informaGes necess>rias, os professoresHinstrutores de'em incluir,em adi=o aos eercBcios de laboratFrio, estudos de casos e relatos atuais de surtos deenfermidades 'Bricas%$s refer?ncias foram omitidas com fins de economia% $ facilidade de acesso de inmerasrefer?ncias pela internet torna desnecess>ria a inclus=o das mesmas neste tipo de li'ro%

3Fs somos imensamente gratos ao Dr% $%(ayne Roberts, #ni'ersidade da /eFrgia, @uegenerosamente nos liberou seu material da @uinta edi=o do li'ro PrincBpios de Microbiologia

Veterin>ria% sso facilitou muito a prepara=o desse 'olume%/%R% Carter D%0% (iseE%*% *lores

http://www.ivis.org/advances/Carter/toc.asphttp://www.ivis.org/advances/Carter/toc.asphttp://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=447%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1321%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1322%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1322%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1322%27;displayInfo()http://www.ivis.org/advances/Carter/toc.asphttp://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=447%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1321%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1322%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1322%27;displayInfo()


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n $ Concise Re'ie. of Veterinary Virology, Carter /%R% and (ise D%0% Eds%2% nternationalVeterinary nformation Ser'ice, thaca 34 ...%i'is%org2, 5ast updated 18-Dec-&77:9$)8)1%1&7:

I3DCE/%R% Carter 1 and D%0% (ise&

1Professor Emeritus of the Department of Medical Sciences and Pathobiology, Virginia-Maryland Regional College of Veterinary Medicine, Virginia ech, !lac"sburg, Virginia,#S$%&Department of !iology, Concord #ni'ersity, $thens, (est Virginia, #S$%

P>g

Capa 1Pref>cio &

Indice )

CaracterBsticas gerais, estrutura e taonomia 'iral J

Culti'o e caracteri+a=o 'iral 1K

Replica=o e genAtica 'iral &K

nteraGes 'Brus-cAlula e patogenia 'iral 8&

Defesas do hospedeiro contra 'Brus 8K

Pre'en=o de doenas 'Bricas, 'acinas e drogas anti'irais ::

DiagnFstico laboratorial de infecGes 'Bricas 6&

/loss>rio &K)

$deno'iridae 187

$rena'iridae 'er *amBlias com 'Brus de menor interesse na 'eterin>ria2 &L7

$rteri'iridae &:K

$sfar'iridae 18K

$stro'iridae 'er *amBlias com 'Brus de menor interesse na 'eterin>ria2 &L7

!irna'iridae 1L6

!orna'iridae &&)

!unya'iridae &&)Calici'iridae &86

Circo'iridae J6

Corona'iridae &8J

*amBlias com 'Brus de menor interesse na 'eterin>ria &L7

*ilo'iridae 'er *amBlias com 'Brus de menor interesse na 'eterin>ria2 &L7

*la'i'iridae &6K

epada'iridae 'er *amBlias com 'Brus de menor interesse na 'eterin>ria2 &L7

erpes'iridae 117

;rthomyo'iridae &1)

Papilloma'iridae 1)8Paramyo'iridae 1K7

http://www.ivis.org/advances/Carter/toc.asphttp://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=447%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1321%27;displayInfo()http://www.ivis.org/advances/Carter/toc.asphttp://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=447%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1321%27;displayInfo()


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8

Par'o'iridae L&

Picorna'iridae &)&

Polyoma'iridae 'er *amBlias com 'Brus de menor interesse na 'eterin>ria2 &L7

Po'iridae K)

Prion &L:

Reo'iridae 1J6

Retro'iridae 1:)

Rhabdo'iridae &76

oga'iridae &68

$borto 'iral e@uino erpes'Brus e@uino 1 1&1

$denocarcinoma pulmonar dos carneiros !etaretro'Brus 1:K

$deno'irus & dos caninos $deno'irus canino & 18)

$nemia a'i>ria Circo'iridae /yro'irus2 L7

$nemia infecciosa e@uina 5enti'irus 1J1

$rterite e@uina $rteri'irus &67

$rtrite encefalite caprina 5enti'irus 16K

!ron@uite das codornas $deno'Brus 18:

!ron@uite infecciosa a'i>ria Corona'Brus &:6

C>lici'irus felino Calici'irus &88

Canine minute 'irus Par'o'Brus K7

Cinomose canina Morbilli'irus 1K)

Corona'Brus bo'ino Corona'irus &:8

Corona'irus canino Corona'irus &:)

Corona'irus felino Corona'irus &:8

Creut+feldt-0acob Prion &K1

Creut+feldt-0acob 'ariante2 Prion &K1

DiarrAia epid?mica dos suBnos Corona'irus &:7

DiarrAia 'iral bo'ina Pestis'irus &J8

Doena de /umboro $'ibirna'irus 1LJ

Doena de Mare" erpes'irus a'i>rio & 1&J

Ectima co&Lntagioso Po'irus Parapo'Brus2 17)

Encefalite


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:

Enfermidade ca@ueti+ante do cer'o e do 'eado Prion &K7

Enfermidade da crista a+ul do pa'=o Corona'Brus &:J

Enfermidade das fronteiras Pestis'irus &JL

Enfermidade de $"abane !unia'irus &&:

Enfermidade de !orna !orna'irus &&L

Enfermidade de Chu+am Reo'irus 1L1

Enfermidade de eschen Encefalomielite suBna2 Entero'Brus &)8

Enfermidade de (esselsbron *la'i'irus &J8

Enfermidade do bao marmori+ado $deno'irus do fais=o 1 18L

Enfermidade do bico e das penas dos psitacBdeos Circo'irus JK

Enfermidade do olho a+ul dos suBnos Rubula'Brus suBno &77

Enfermidade epi+oFtica hemorr>gica dos 'eados Reo'irus 1L1

Enfermidade hemorr>gica dos coelhos 5ago'irus &8:

Enfermidade 0embrana 5enti'irus 1J8

Enfermidade o'ina de 3airobi 3airo'irus &&6

Enfermidade 'esicular dos suBnos Entero'Brus &):

Enterite da marta e do mapache Par'o'Brus LK

Enterite hemorr>gica dos perus $deno'Brus do peru ) 18J

Enterite 'iral dos patos erpes'irus anatido 1 1)&

Entero'Bris bo'ino Entero'Brus &)J

Entero'Brus a'i>rio Entero'Brus &)J

Esplenomegalia do pinto $deno'irus 18L

Estomatite papular bo'ina Po'irus Parapo'irus2 17&

Estomatite 'esicular Rhabdo'Brus Vesiculo'irus2 &7L

Eantema coital e@uino erpes'Brus e@uino-Varicello'irus 1&)

Eantema 'esicular Vesi'irus &8)

*ebre $ftosa $fto'irus &)J

*ebre catarral maligna erpes'irus alcelaphine 1 1)7

*ebre do Vale do Rift Phlebo'irus &&J

*ebre ef?mera bo'ina Ephemero'Brus &1&

/astroenterite transmissB'el /E2 Corona'Brus &8K

/etah'irus $lfa'Brus &6L

endra'irus enipa'irus 1KL

epatite com corpos de inclus=o $deno'irus a'i>rio 188

epatite infecciosa dos caninos $deno'irus canino 1 18&

epatite 'iral do ganso Par'o'Brus LK

erpes'irus canino erpes'irus canino 1 1&8

munodefici?ncia bo'ina V!2 5enti'Brus 1J8

munodefici?ncia felina V*2 5enti'Brus 1J&

nfec=o pelo 'Brus do CachA Valley !unya'irus &&6

nfec=o por adeno'Brus canino & $deno'Brus canino & 18)

nfec=o por adeno'Brus e@uino $ $deno'Brus e@uino $ 18)

nfec=o por herpes'Brus bo'ino : erpes'Brus bo'ino : 11J

nfluen+a a'i>ria nfluen+a'irus ;rtomio'irus2 &1J

nfluen+a canina nfluen+a'irus ;rtomio'irus2 &&7

nfluen+a e@uina nfluen+a'irus ;rtomio'Brus2 &16


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6

nfluen+a felina nfluen+a'irus ;rtomio'Brus2 &&1

nfluen+a suBna nfluen+a'irus ;rtomio'Brus2 &1K

nsOnia fatal familiar Prion &K&

ur Prion &K&

5actato desidrogenase do camundongo $rteri'Brus &6)

5aringotra@ueite infecciosa erpes'irus a'i>rio 1 1&K

5eucemia felina *E5V2 /amaretro'irus 167

5eucose a'i>ria $lfaretro'Brus 1:6

5eucose bo'ina Deltaretro'irus 16:

5Bngua a+ul ;rbi'Brus 1JL

5oupin-ill *la'i'irus &J1

5umpy s"in Eantema nodular caprino2 Po'irus Capripo'Brus2 17:

Maedi-Visna 5enti'irus 16J

Mamilite herpAtica dos bo'inos erpes'irus bo'ino & 118

Miomatose Po'irus 5eporipo'Brus2 17L

3e.Castle Paramioa'i>rio 1 $'ula'irus2 &7&

;utros Paramio'Brus a'i>rio Paramio'Brus &78

Panleucopenia felina Par'o'irus L8

Papilomatose bo'ina Papiloma'irus 1):

Papilomatose e@uina Papiloma'irus 1)J

Papilomatose oral canina Papiloma'irus 1)L

Papiloma'irus e cQncer humano Papiloma'irus 1)L

Parainfluen+a & canina Rubula'irus &71

Parainfluen+a ) bo'ina Respiro'irus 1K&

Par'o'irose bo'ina Par'o'Brus K1

Par'o'irose canina Par'o'irus L6Par'o'irose dos gansos Par'o'Brus LK

Par'o'irose suBna Par'o'Brus LL

Peritonite infecciosa dos felinos P*2 Corona'irus felino &:1

Peste suBna africana $sfar'irus 1:7

Peste bo'ina Morbilli'irus 1K6

Peste dos pe@uenos ruminantes Morbilli'irus 1KJ

Peste e@uina africana ;rbi'Brus 1JK

Peste suBna cl>ssica Pestis'irus &JJ

Pseudo 'arBola bo'ina Po'irus Parapo'Brus2 177

Pseudorai'a Enfermidade de $u


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J

Sarcoma felino !etaretro'irus 16:

Scrapie Prion &LL

Sindrome da baia postura $deno'irus do pato 1 186

SBndrome da lebre parda europAia 5ago'irus &86

Sindrome de /erstmann-Straussler-Schein"er Prion &K&

Sindrome do desgaste multisist?mico pFs desmama Circo'irus JJ

SBndrome do suBno latindo enipa'irus 1KK

SBndrome respiratFria e reproduti'a dos suBnos $rteri'irus &61

SMED Entero'Brus &)6

remor epid?mico epatp'irus &87

umor nasal en+oFtico das cabras e das o'elhas $deno'irus 167

Vaccinia Po'irus ;rtopo'Brus2 K6

VarBola Po'irus ;rtopo'Brus2 K6

VarBola a'i>ria $'ipos'irus 178

Variola bo'ina Po'irus ;rtopo'Brus2 KJ

VarBola de o'elhas e cabras Po'irus Capripo'Brus2 176

VarBola do bfalo Po'irus ;rtopo'Brus2 177

VarBola dos camelos Po'irus ;rtopo'Brus2 177

VarBola dos can>rios Po'irus $'ipo'Brus2 17:

VarBola dos macacos Po'irus ;rtopo'Brus2 177

VarBola dos suBnos Po'irus Suipo'Brus2 17J

VarBola e@uina Po'irus ;rtopo'Brus2 KK

VarBola felina Po'irus ;rtopo'Brus2 KL

Virus do sarcoma de Rous $lfaretro'irus 1:K

Vul'o'aginite erpes'irus bo'ino 1 11:

(est 3ile ;este do 3ilo2 *la'i'irus &J&


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n $ Concise Re'ie. of Veterinary Virology, Carter /%R%, (ise D%0% and *lores E%*% Eds%2%nternational Veterinary nformation Ser'ice, thaca 34 ...%i'is%org2, 5ast updated 6-Dec-&7789 $)871%1&78%P

Caracter%sticas gerais, estr&t&ra e ta'ono(ia viral

D.J. Wise1, G.R. Carter2 and E. F. Flores

1Department of !iology, Concord #ni'ersity, $thens, (est Virginia, #S$%&Virginia-MarylandRegional College of Veterinary Medicine, Virginia ech, !lac"sburg, Virginia, #S$% )Departmentof Veterinary Pre'enti'e Medicine, *ederal #ni'ersity of Santa Maria, Santa Maria, RS !ra+il%

Índice• /eneralidades • Estrutura 'iral • aonomia 'iral • /loss>rio

Generalidades

• ;s 'Brus s=o os menores e mais simples microorganismos @ue eistem%• S=o muito menores @ue cAlulas eucariotas e procariotas%• $o contr>rio destas, possuem uma estrutura simples e est>tica%• 3=o possuem metabolismo prFprio%• Dependem da ma@uinaria celular para a sua replica=o parasitas intracelulares

obrigatFrios2%• Possui D3$ ou R3$ como genoma, mas n=o possuem ribossomal e outros fatores

necess>rios para a produ=o de proteBnas% Por isso necessitam das funGes e dometabolismo celular para produ+ir suas proteBnas e se multiplicar%

• ; genoma 'iral, >cido ribonuclAico R3$2 ou dioirribonuclAico D3$2, codifica asinformaGes mBnimas para 1% $ssegurar a sua replica=o9 &% Empacotar o seu genoma e)% Sub'erter funGes celulares em seu benefBcio%

• $lguns 'Brus infectam cAlulas procariotas bacteriFfagos29 outros infectam cAlulaseucariotas%

• $lguns 'Brus destroem as cAlulas infectadas, produ+indo enfermidades9 outros persistemem estado latente ou persistente na cAlula9 e outros podem causar transforma=o tumoral

nas cAlulas infectadas%

Estr&t&ra viral

;s 'Brus s=o compostos, pelo menos, do genoma de >cido nuclAico R3$ ou D3$ e umacobertura de proteBnas% Muitos 'Brus possuem uma membrana eterna adicional denominadaenvelo)e%

• $ cobertura protAica ou ca)s%deo de um virion 'Brus completo ou partBcula 'Brica2 Acomposta de cFpias mltiplas de uma ou mais tipos de proteBnas% Essas proteBnas se

associam entre si, formando unidades estruturais denominadas ca)s*(eros%• ; con


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K

• ;s 'Brus mais simples n=o possuem en'elope e possuem R3$ ou D3$ de cadeia simples*ig% 1%12%

• ;s 'Brus en'elopados cont?m uma membrana eterna @ue recobre o nucleocapsBdeo*ig%1%&2% Essa membrana eterna ou en'elope2 A deri'ada de membranas da cAlulahospedeira nuclear, do aparelho de /olgi, do retBculo endoplasm>tico ou membrana

plasm>tica2% $ssim como essas membranas, o en'elope A constituBdo de uma membranalipBdica dupla com proteBnas nela inseridas% $s proteBnas do en'elope 'iral s=ocodificadas pelo seu genoma%

• $lguns 'Brus, como os bacteriFfagos, possuem caudas protAicas compleas @ue s=onecess>rias para a ancoragem e introdu=o do genoma 'iral na cAlula hospedeira%

*igura 1-1% 'irion sem en'elope, com capsBdeo icosaAdrico% ; >cido nuclAico locali+a-se nointerior do capsBdeo% lustra=o cortesia de $% (ayne Roberts%


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17

*igura 1-&% 'irion en'elopado, com capsBdeo helicoidal% ; >cido nuclAico locali+a-se no interior do 'irion, como indica a linha pontilhada em forma de espiral% $s linhas na superfBcie eterna doen'elope representam espBculas glicoprotAicas% lustra=o cortesia de $% (ayne Roberts%

; genoma dos 'Brus A constituBdo de D3$ ou R3$% 3enhum 'Brus contAm D3$ e R3$simultaneamente% ; D3$ pode ser de fita simples par'o'irus e circo'irus2, fita duplapolioma'irus, adeno'irus, herpes'irus2 ou fita dupla parcial hepadna'irus2% ; genoma D3$

pode ter as suas etremidades co'alentemente ligadas entre si genoma circular polioma'irus ecirco'irus2 ou possuir as etremidades li'res linear adeno'irus, herpes'irus, par'o'irus2% ;genoma dos po'irus A D3$ de fita dupla linear e possui as etremidades ligadas entre si%

odos os genomas 'irais de R3$ s=o lineares% $ maioria deles A R3$ de fita simples, poucos possuem R3$ de fita dupla reo'irus, borna'irus2% $ maioria dos genomas R3$ possuium nico segmento monopartite2, en@uanto alguns possuem o genoma di'idido em doissegmentos arena'irus2, tr?s bunya'irus2, J ou L ortomyo'irus2 ou 17 segmentos reo'irus2%

;s genomas R3$ de fita simples podem ser classificados em

• R3$ de sentido )ositivo R3$ 2 se o R3$ genOmico ser'e de R3$ mensageiro e Atradu+ido pelos ribossomal da cAlula hospedeira%

• R3$ de sentido negativo R3$ -2 se o R3$ genOmico A complementar ao R3$ @ue Atradu+ido, e por isso n=o pode ser tradu+ido diretamente pelos ribossomal%

• 3os arena'irus e bunya'irus, um segmento do R3$ genOmico sentido negati'o2 Atranscrito e origina cFpias de R3$ de sentido positi'o @ue funcionam como R3$mensageiro2% 3o entanto, cFpias destes R3$s @ue seriam de sentido negati'o2 tambAmser'em de mensageiros e s=o tradu+idas% Essa estratAgia A denominada de a(+issense%


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11

; genoma dos 'Brus pode codificar desde poucas proteBnas diferentes Polyoma'irus, 6 aJ genes, :777 nucleotBdeos de etens=o2 atA mais de J7 - 177 produtos g?nicos herpes'irus, 67 a1&7 genes, 1&7%777 a &&7%777 pares de bases de etens=o2%

Em geral, o genoma dos 'Brus R3$ s=o menores, atingindo uma etens=o m>ima de pouco mais de )7%777 nucleotBdeos Corona'irus2% #ma hipFtese para eplicar isto seria a de @ue

as polimerases 'irais de R3$ tendem a cometer mais erros do @ue as polimerases de D3$ no processo de replica=o do genoma% $ssim, a fidelidade de replica=o poderia limitar o tamanhodo genoma% $o contr>rio, os genomas de 'Brus D3$ podem atingir mais de )77%777 pares de

bases, como se obser'a em alguns herpes'irus%

ca)s%deo

$ fun=o do capsBdeo A empacotar e proteger o genoma 'iral durante a sua transfer?nciaentre cAlulas e hospedeiros% ; capsBdeo pode ser formado por cFpias mltiplas de uma mesma

proteBna ou por uma associa=o de '>rias proteBnas diferentes% ;s capsBdeos construBdos por cFpias de uma nica proteBna representam um eemplo de economia genAtica, pois apenas umgene pode codificar os produtos necess>rios para construir o capsBdeo e recobrir completamenteo genoma%

• ; capsBdeo de um 'Brus pode possuir '>rias formas geomAtricas @ue s=o caracterBsticas decada famBlia 'iral% Essas incluem

o CapsBdeo icosaAdrico sem en'elope picorna'irus, polyoma'irus29 ou en'elopadoherpes'irus2% Essa forma geomAtrica possui '>rias faces triangulares e Qngulos*ig% 1%1%29 o nmero de faces e Qngulos pode 'ariar de acordo com o nmero etipo de associa=o entre as proteBnas estruturais constituintes%

o CapsBdeo helicoidal, sem en'elope 'Brus do mosaico do tabaco2 ou en'elopadorabdo'irus, paramyo'irus2, *ig% 1%1 e *ig% 1%&%2%

•

;s 'Brus 'ariam de tamanho, desde os circo'irus com 1J - && nm de diQmetro, atA os po'irus, @ue podem atingir os )77 nm% Esses 'Brus possuem uma forma o'Fide e s=osuficientemente grandes para serem 'isB'eis sob microscopia Ftica, ao contr>rio dosdemais cu


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1&

Envelope

; en'elope 'iral, presente em 'Brus de algumas famBlias, origina-se de membranas dacAlula hospedeira atra'As de brotamento, @ue ocorre durante o egresso de 'irions maduros dacAlula hospedeira% Essa membrana fre@uentemente A deri'ada de uma regi=o da membrana

plasm>tica, mas pode originar-se tambAm das membranas do aparelho de /olgi, do retBculoendoplasm>tico ou da membrana nuclear, dependendo do 'Brus e do compartimento celular ondeocorre a replica=o% ndependentemente de sua origem, o en'elope A composto de uma camadadupla de lipBdios de origem celular com proteBnas associadas% $s proteBnas do en'elope s=ocodificadas pelo 'Brus e constituem-se em sua maioria de glicoproteBnas% ; nmero de proteBnasdo en'elope pode 'ariar de uma atA mais de de+, dependendo do 'Brus% $s glicoproteBnas doen'elope desempenham '>rias funGes, incluindo a ancoragem inicial do 'irion na cAlula,

penetra=o, fus=o e dissemina=o do 'Brus entre cAlulas% $ ancoragem inicial do 'irion nasuperfBcie da cAlula re@uer @ue o en'elope esterio dos 'Brus sem en'elope, cutico, onde resBduos de acar oligossacarBdeos2 s=o incorporados U cadeia polipeptBdica% Essas proteBnas s=o en'iadas aoaparelho de /olgi, a 'esBculas secretoras e finalmente se fusionam com a membrana plasm>tica,

podendo estar presentes na superfBcie da cAlula infectada% $s glicoproteBnas do en'elopedesempenham papel importante nas interaGes entre os 'irions e as cAlulas liga=o, penetra=o,fus=o, dissemina=o entre cAlulas2 e s=o al'os importantes para anticorpos neutrali+antes

produ+idos pelo hospedeiro%$s proteBnas estruturais s=o principalmente en+imas, como a@uelas en'ol'idas no

processo de transcri=o do genoma, replica=o e processamento de proteBnas% #m eemplo de proteBna n=o-estrutural A a transcriptase re'ersa dos retro'irus, @ue produ+ cFpias de D3$ a

partir de um molde R3$ para serem incorporadas ao genoma da cAlula hospedeira% $lguns 'Bruscodificam '>rias proteBnas n=o-estruturais @ue desempenham papAis acessFrios na regula=o da

http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap1_pt/chapter.asp?LA=7#brotamento%23brotamentohttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap1_pt/chapter.asp?LA=7#oligosacaridos%23oligosacaridoshttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap1_pt/chapter.asp?LA=7#brotamento%23brotamentohttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap1_pt/chapter.asp?LA=7#oligosacaridos%23oligosacaridos


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1)

epress=o g?nica celular e 'iral, regula=o das '>rias etapas do ciclo replicati'o do 'Brus,neutrali+a=o dos mecanismos de defesa do hospedeiro, transforma=o celular, entre outras%

&tros co()onentes dos virions

Lipídios

;s lipBdios presentes nas partBculas 'Bricas en'elopadas s=o deri'adas das membranascelulares% S=o em sua maioria fosfolipBdios :7 - 672 e o restante A colesterol% ; en'elope dos'Brus contAm lipBdios deri'ados das membranas celulares e proteBnas codificadas pelo 'Brus, Us'e+es formando pror@uicas baseadas em '>rias caracterBsticas% $ classifica=o A dinQmica, @ue no'os 'Brusest=o sendo continuamente descobertos9 e no'as informaGes se acumulam sobre os 'Brus conhecidos% $ classifica=o e nomenclatura utili+ados neste teto esta'am atuali+ada atA a suasubmiss=o% $s alteraGes mais recentes podem ser 'erificadas em informati'os periFdicos doComit? nternacional para aonomia Viral CV2% DisponB'el em ama+on%com2%; es@uema b>sico de classifica=o hier>r@uica A ;rdem - *amBlia - SubfamBlia - EspAcie -Cepa H ipo%

Determinadas caracterBsticas 'irais definem cada uma dessas categorias taonOmicas% $s;rdens possuem o sufio 'irales9 as famBlias possuem o sufio 'iridae9 e os g?neros eespAcies 'Brus% #ma espAcie de 'Brus A representada por uma linhagem replicati'a @ue ocupa

um nicho ecolFgico, por eemplo, uma enfermidade particular%;s 'Brus s=o classificados em famBlias com base em muitas caracterBsticas% #ma

caracterBstica b>sica A o tipo de >cido nuclAico D3$ ou R3$2 e a morfologia, ou se


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18

macromolAculas produ+idas proteBnas estruturais e en+imas2, propriedades antig?nicas e propriedades biolFgicas infecti'idade, capacidade hemaglutinante, etc%2%

$s '>rias famBlias s=o ordenadas no sum>rio de acordo com as di'ersas caracterBsticas deseu >cido nuclAico% 3este li'ro, as famBlias s=o apresentadas utili+ando a mesma ordemapresentada na tabela a seguir%

$ tabela 1%1 apresenta informaGes b>sicas sobre cada uma das principais categoriastaonOmicas 'irais%

-a+ela 1.1. Classifica/o e Caracter%sticas 0$sicas de V%r&s de Verte+rados

v%r&s DA de cadeia si()les

Fa(%liai(etria do ca)s%deo e

di3(etro do virion !n("&+fa(%lia G4neros Es)5cies re)resentativas

Circo'iridae cosaAdrica9 1J-&:Circo'irus

'Brus da doena do bico edas penas

/yro'irus$nemia infecciosa das

galinhas

Par'o'iridae cosaAdrica9 1L-&6 Par'o'irinae

Par'o'irus Par'o'irus canino e felinoErythro'irus 'Brus !1KDependo'irus 'Brus & adeno-associado'Brus $DMV-li"e

'Brus da doena aleutianade martas

'Brus !PV-li"e Par'o'irus bo'ino

V%r&s DA de cadeia d&)la

Fa(%lia

i(etria do

ca)s%deo edi3(etro do

virion !n("

&+fa(%lia G4neros Es)5ciesre)resentativas

Po'iridae

Complea9187-&67a&&7-8:7

Cordopo'irinae

;rthopo'irus'Brus da 'acina da'arBola

Parapo'irus ;rf 'Brus

$'ipo'irus'Brus da 'arBolaa'i>ria

Capripo'irus'Brus da 'arBolao'ina

5eporipo'irus 'Brus do mioma

Suidpo'irus'Brus da 'arBolasuBna

Molluscipo'irus'Brus do moluscocontagioso

4atapo'irus'Brus tumoral dosmacacos de 4aba

erpes'iridae cosaAdrica9 1&7-&77

$lfaherpes'irinaeSimple'irus

'Brus do herpessimple 1

Varicello'irus'Brus da 'aricela+oster

Mare"Ws disease-li"e'Brus

erpes'irus galideo&

http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap1_pt/chapter.asp?LA=7#table1.1%23table1.1http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap1_pt/chapter.asp?LA=7#table1.1%23table1.1http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap1_pt/chapter.asp?LA=7#table1.1%23table1.1


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1:

V%r&s DA de cadeia d&)la

Fa(%lia

i(etria do

ca)s%deo e

di3(etro do

virion !n("

&+fa(%lia G4nerosEs)5cies

re)resentativas

5aringo-tra@ueBte'Brus

erpes'irus galideo1

!etaherpes'irinae

Cytomegalo'iruserpes'irus humano:

Muromegalo'irusCytomegalo'irusmurino 1

Roseolo'iruserpes'irus humano6

/ammaherpes'irinas5ymphocrypto'irus 'Brus Epstein-!arr

Rhadino'irus erpes'irus o'ino &Polyoma'iridae

cosaAdrica9 87-8:

Polyoma'irus 'Brus SV-87

Papilloma'iridaecosaAdrica9 :&-::

Papilloma'irusPapiloma'irus

bo'ino 1

$deno'iridaecosaAdrica9 L7-117

Mastadeno'irus $deno'irus bo'ino

$'iadeno'irus$deno'irus a'i>rio$

$tadeno'irus $deno'irus o'ino D

Siadeno'irus

'Brus da enterite

hemorr>gica dos perus

$sfa'iridaeComplea9 1J:-&1:

$sfi'irus'Brus da peste suBnaafricana

rido'iridaecosaAdrica9 1&:-)77

Rana'irus 'Brus das r=s )

5ymphocystis'irus'Brus da doenalinfocBtica 1

v%r&s DA e RA 6&e reali7a( transcri/o reversa


di3(etro do virion !n("&+fa(%lia G4neros

Es)5cies

re)resentativas

epadna'iridae cosaAdrica9 8&-8J ;rthohepadna'irus 'Brus da hepatite !$'ihepadna'irus

'Brus da hepatite ! dos patos

Retro'iridae cosaAdrica9 L7-177 $lfaretro'irus 'Brus da leucose a'i>ria

!etaretro'irus'Brus da adenomatose

pulmonar o'ina/ammaretro'irus 'Brus da leucemia felinaDeltaretro'irus 'Brus da leucose bo'ina

Epsiloretro'irus'Brus do sarcoma cutQneode (alley

5enti'irus 'Brus daimunodefici?ncia felina


16/301

16

v%r&s DA e RA 6&e reali7a( transcri/o reversa


di3(etro do virion !n("&+fa(%lia G4neros

Es)5ciesre)resentativas

Spuma'irus Espuma 'Brus os bo'inosv%r&s RA de cadeia d&)la



Reo'iridae cosaAdrica9 67-L7

;rthoreo'irus ;rtoreo'irus dos mamBferos;rbi'irus 'Brus da lBngua a+ulRota'irus Rota'irus $

Colti'irus'Brus da febre dos carrapatosdo Colorado

$@uareo'irus $@uareo'irus $

!irna'iridae cosaAdrica9 67-J7

$@uabirna'irus'Brus da pancreatiteinfecciosa

$'ibirna'irus 'Brus da bursite infecciosadas a'es

v%r&s RA de cadeia si()les, )olaridade negativa

Fa(%lia

i(etria do

ca)s%deo e di3(etro

do virion !n("


re)resentativas

Paramyo'iridae

elicoidal91:7-&77a1777-17,777

Paramyo'irinae

Respiro'irus'Brus da parainfluen+a

bo'ina )Rubula'irus Rubula'irus suBno

Morbili'irus

'Brus da cinomose9 e

do sarampoenipa'irus 'Brus endra

$'ula'irus'Brus da doena de

3e.castle

Pneumo'irinaePneumo'irus

'Brus sincicialrespiratFrio humano e

bo'inoMetapneumo'irus Pneumo'irus a'i>rio

Rhabdo'iridaeelicoidal98:-177a177-8)7

Vesiculo'irus'Brus da estomatite'esicular

5yssa'irus 'Brus da rai'aEphemero'irus

'Brus da febre ef?merade bo'inos

3o'irhabdo'irus'Brus da hematopoiesenecrFtica infecciosa

;rthomyo'iridae elicoidal9L7-1&Ka&777

nfluen+a'irus $

'Brus da influen+agripe2 tipo $

nfluen+a'irus !'Brus da influen+a tipo!

nfluen+a'irus C'Brus da influen+a tipo

Chogoto'irus 'Brus hogoto


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1J

v%r&s RA de cadeia si()les, )olaridade negativa

Fa(%liai(etria do

ca)s%deo e di3(etro

do virion !n("


re)resentativas

sa'irus

'Brus da anemia

infecciosa dos salmGes

!unya'iridaeelicoidal9L7-177

;rthobunya'irus 'Brus de $"abaneanta'irus 'Brus antaan

3airo'irus'Brus da doena deo'elhas de 3airobi

Phlebo'irus'Brus da febre do ValeRift

!orna'iridaecosaAdrica9177-1)7

!orna'irus'Brus da doena de!orna

$rena'iridae elicoidal9 :7-)77 $$rena'irus

'Brus da

coriomeningitelinfocBtica

Delta'irus 'Brus da hepatite D

*ilo'iridaeelicoidal9L7 1877

Marburg-li"e'Brus

'Brus Marburg

Ebola-li"e 'Brus 'Brus Ebolav%r&s RA de cadeia si()les, )olaridade )ositiva



Picorna'iridae cosaAdrica9 &&-)7

Entero'irus 'Brus da poliomielite

Rhino'irusBrus 'Brus do resfriadoCardio'irus 'Brus da encefalomiocardite$phto'irus 'Brus da febre aftosaepato'irus 'Brus da hepatite $Parecho'irus Parecho'irus humanoErbo'irus 'Brus da rinite e@uina $obu'irus 'Brus $ichiescho'irus 'Brus da doena de eschen

Calici'iridae cosaAdrica9 ):-)K

5ago'irus'Brus da doena hemorr>gicados coelhos

3oro'irus 'Brus 3or.al" Sapo'irus Calici'irus suBno

Vesi'irus'Brus do eantema 'esicularde suBnos

$stro'iridae cosaAdrica9 &J-)7Mamastro'irus $stro'irus humano$'astro'irus $stro'irus do pa'=o

Corona'iridae elicoidal9 67-&&7Corona'irus

'Brus da bron@uiteinfecciosa das a'es

oro'irus oro'irus e@uino$rteri'iridae cosaAdrica9 87-67 $rteri'irus 'Brus da arterite e@uina

oga'iridae cosaAdrica9 J7 $lpha'irus 'Brus SindbisRubi'irus 'Brus da rubAola


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1L

v%r&s RA de cadeia si()les, )olaridade )ositiva



*la'i'iridae cosaAdrica9 87-67*la'i'irus 'Brus da febre amarelaPesti'irus 'Brus da diarrAia 'iral bo'ina

epaci'irus 'Brus da hepatite C

3oda'iridae cosaAdrica9 &K-)& !etanoda'irus'Brus da necrose do gatorarios%

Prions

;s prions n=o s=o 'Brus% S=o partBculas protAicas infecciosas associadas a encefalopatiasespongiformes transmissB'eis SEs2 de humanos e animais% $s SEs inlcuem a doena deCreut+feldt-0acob C0D2 em humanos, scrapie em o'inos e !SE em bo'inos% Prions e SEs s=oabordados com mais detalhes no capBtulo &K% Resumidamente, o eame microscFpico do cArebro

re'ela grandes 'acuolos nas regiGes do cFrte e cerebelo, daB a denomina=o de encefalopatiaespongiforme% Eames mais detalhados das regiGes afetadas re'elam depFsitos de fibrilas e

placas amilFides associadas com a proteBna prion% Essas enfermidades se caracteri+am pela perdado controle motor, dem?ncia, paralisia e ine'ita'elmente morte% Maiores detalhes da patogeniaainda n=o s=o conhecidos%

Viróides

;s 'irFides s=o >cidos nuclAicos de baio peso molecular, desnudos, etremamente resistentes aocalor, a radia=o ultra'ioleta e radia=o ioni+ante% Essas partBculas se compGe eclusi'amente deum fragmento de R3$ circular de cadeia simples, com algumas regiGes de cadeia dupla% ;s'irFides causam, em sua maioria, doenas em plantas como a doena do tubArculo fusiforme da

batata%


19/301

1K

Virusóides

;s 'irusFides tambAm chamados de R3$ satAlites2 s=o similares aos 'irFides, pois s=osegmentos de >cido nuclAico de baio peso molecular, etremamente resistentes ao calor e aradiaGes ultra'ioletas e ioni+antes% 3o entanto, dependem de um 'Brus auiliar para a sua

replica=o% ;s 'irusFides replicam no citoplasma da cAlula, atra'As de uma polimerase de R3$dependente de R3$%

ova fa(%lia de v%r&s 9 :i(iviridae

Mimi'iridae A uma famBlia 'iral @ue cont?m apenas um membro, Mimi'irus% ; nome do 'Brus Aderi'ado do termo XmicrFbio imitadorX% ; agente foi descoberto em 1KK&, infectando um

proto+o>rio e atA o presente A o maior 'Brus @ue se conhece, com aproimadamente 877 nm dediQmetro% ; capsBdeo possui forma icosaAdrica, n=o possui en'elope e o genoma A uma molAculade D3$ de cadeia dupla de 1%& Mb contendo aproimadamente 1&67 genes% $ se@u?nciacompleta do genoma do Mimi'irus foi recentemente publicada &7782%

Gloss$rio

!acteriFfagoI'Brus @ue infecta cAlulas procariFticas e possui muitas caracterBsticas de 'Brus de plantas eanimais% Re@uer uma bactAria 'i'a para reali+ar seu ciclo reproduti'o%

!rotamento processo atra'As do @ual os 'Brus ad@uirem en'elope% Y precedido da inser=o deglicoproteBnas 'irais nas membranas da cAlula hospedeira% Esse processo ocorre maisfre@uentemente na membrana plasm>tica e confere infecti'idade ao 'Brus%

MucopolissacarBdeo

uma classe de polissacarBdeo como heparina, >cido hialurOnico e sulfato de condroitina,@ue absor'em >gua para formar um material espesso, mucFide, gelatinoso%

;ligossacarBdeoum acar @ue cont?m um nmero pe@ueno e conhecido de unidades de monosacarBdeos%

n $ Concise Re'ie. of Veterinary Virology, Carter /%R%, (ise D%0% and *lores E%*% Eds%2%nternational Veterinary nformation Ser'ice, thaca 34 ...%i'is%org2, 5ast updated &L-;ct-&77:9 $)87&%177:%P

C&ltivo e caracteri7a/o viral

D.J. Wise1 and G.R. Carter2

1Department of !iology, Concord #ni'ersity, $thens, (est Virginia, #S$%&Virginia-MarylandRegional College of Veterinary Medicine, Virginia ech, !lac"sburg, Virginia, #S$%

Ìndice• MAtodos de propaga=o de 'Brus • Purifica=o e concentra=o de 'Brus • $rma+enagem e infecti'idade

• Visuali+a=o de 'Brus • Contagem direta de partBculas 'Bricas

http://www.ivis.org/advances/Carter/toc.asphttp://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1321%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=447%27;displayInfo()http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#propagation%23propagationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#concentration%23concentrationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#infectivity%23infectivityhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#visualization%23visualizationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#d_enumeration%23d_enumerationhttp://www.ivis.org/advances/Carter/toc.asphttp://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1321%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=447%27;displayInfo()http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#propagation%23propagationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#concentration%23concentrationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#infectivity%23infectivityhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#visualization%23visualizationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#d_enumeration%23d_enumeration


20/301

&7

• Contagem indireta de partBculas 'Bricas • $lguns mAtodos empregados para a caracteri+a=o de 'Brus • /loss>rio

V>rios mAtodos para o arma+enamento, 'isuali+a=o, @uantifica=o direta e indireta2 e

propaga=o de 'Brus foram desen'ol'idos% Eistem tambAm mAtodos para a reali+a=o dodiagnFstico de doenas produ+idas pelas infecGes 'Bricas, muitos deles s=o baseados em testessorolFgicos, os @uais detectam a resposta do hospedeiro ao agente% ;s mAtodos de diagnFsticoser=o discutidos no Capitulo J%

istoricamente foi obser'ado @ue alguns agente causadores de doenas poderiam passar atra'Asde filtros nos @uais as bactArias eram retidas% ;s filtrados @uando inoculados em meios seleti'os

para bactArias apresenta'am resultado negati'o para esse microorganismo, porAm mantinham acapacidade infectante e e'entualmente continham 'Brus% 3ormalmente n=o A possB'el obser'ar os'Brus com o uso de microscFpio Fptico, com ece=o dos po'Brus% $ 'isuali+a=o de partBculas'Bricas somente pode ser feita com o uso de microscFpio eletrOnico% $lguns mAtodos b>sicos

aplicados para o estudo de 'Brus ser=o descritos abaio%

Como discutido no capBtulo anterior, eiste uma consider>'el di'ersidade nas caracterBsticasfBsicas dos 'Brus de animais% $ principal caracterBstica @ue reflete a di'ersidade 'iral A a presenaou aus?ncia do en'elope% Como demonstrado na abela &%1, os 'Brus n=o-en'elopados de umamaneira geral s=o sensB'eis a radia=o ultra'ioleta, relati'amente termoest>'el e susceptB'el adanos produ+idos pelos cristais de gelo%

De'ido a presena de camada lipBdica @ue compGe o en'elope 'iral, os 'Brus en'elopados s=oinati'ados por sol'entes lipBdicos clorofFrmio e Ater2 e detergentes deoicolato2, s=o sensB'eisas radiaGes ultra'ioletas e gama, relati'amente termo sensB'eis e mais facilmente danificados

por cristais de gelo do @ue os 'Brus @ue n=o possuem en'elope%

-a+ela 2.1. ;()ortantes )ro)riedades +iol


21/301

&1

Durante muito tempo a inocula=o de susceptB'eis foi nica maneira de se obter grandes@uantidades de 'Brus% $tualmente, o uso de animais para multiplica=o de 'Brus A limitada de'idoa @uestGes Aticas% Somente utili+am-se animais para a amplifica=o 'iral para a@ueles 'Brus @ueapresentam dificuldade de adapta=o ao culti'o celular% Por eemplo, cepas 'acinais do 'Brus daEnterite emorr>gica dos Perus podem ser propagadas em animais ou em culti'o celular% 3o

entanto, o uso de amostras oriundas do bao de a'es parece ser mais empregado%Com o propFsito de diagnFstico, a inocula=o de animais pode ser utili+ada, em amostrassuspeitas de rai'a utili+a-se a inocula=o de camundongos lactantes%

Inoculação de ovos embrionados

Pre'iamente ao desen'ol'imento das tAcnicas de culti'o celular, o uso de o'os embrionados paraa propaga=o 'iral foi umas das primeiras alternati'as na @ual n=o se utili+a'a animais% $inocula=o em o'os embrionados A um mAtodo amplamente utili+ado para a propaga=o de 'Brusinfluen+a tipo $ e a maioria de 'Brus a'i>rios% Esse sistema pode ser empregado para adiferencia=o de alguns 'Brus @ue produ+em lesGes semelhantes, como 'Brus do co.po e do

pseudoco.po% 3o entanto, alguns 'Brus de mamBferos, como o 'Brus da 5Bngua $+ul, seadaptam bem a esse sistema @ue A rotineiramente utili+ado para propaga=o, diagnFstico e

pes@uisa%$lgumas consideraGes de'em ser tomadas @uando do emprego dessa tAcnica, dentre elas a

presena de anticorpos maternais g42 no saco da gema% De'ido a isso, A indicado o uso de o'osoriundos de criatFrios SP* specific pathogen free li'res de patFgenos especBficos2% $ constante

passagem de 'iroses em o'os embrionados tambAm A uma tAcnica de atenua=o @ue pode ser aplicada para a obten=o de amostras 'irais utili+adas em 'acinas 'i'as modificadas%

Cultura de células e tecidos

$ cultura de tecidos refere-se ao crescimento e manuten=o de tecidos 'i'os in 'itro% Eistemdois tipos b>sicos culti'o de eplante e culti'o celular% Culti'o de eplantes A pe@uenosfragmentos de tecidos oriundos do hospedeiro e mantidos em culti'o, en@uanto @ue o culti'ocelular A resultado da dissocia=o do tecido em cAlulas indi'iduais seguido de sua manuten=oem culti'o% V>rios sistemas utili+ados em 'irologia s=o baseados no emprego de culti'oscelulares e n=o no culti'o de tecidos, sendo muitas 'e+es ambos os termos aplicadosindiscriminadamente% ; culti'o de cAlulas pode ser subdi'idido em culti'o prim>rio, semi-contBnuo e contBnuo ou linhas celulares%


22/301

&&

*igura &-1% Culti'o celular normal% Cortesia do $% (ayne Roberts%

Cultivos de eplante

S=o culturas de pe@uenos fragmentos de tecidos especBficos retirados de animais% Culti'os deeplante s=o teis para isolamento 'iral e s=o necess>rios para o isolamento de algunscorona'Brus% Demonstra=o de lat?ncia por alfaherpes'Brus humanos e animais pode eigir o usode culti'os de eplantes de gQnglios ner'osos trig?meo2%

Cultivo celular prim!rio

Culti'o de cAlulas prim>rias A originado de tecidos frescos @ue foram submetidos ao tratamentocom en+imas tripsina ou outras proteases2 para a indi'iduali+a=o das cAlulas% Como resultado,esse tipo de culti'o muitas 'e+es A composto de '>rios tipos celulares% 3as condiGes in 'itro, osculti'os prim>rios raramente se di'idem ou ent=o o fa+ a uma fre@u?ncia muito baia, isso Adenominado como limite de ayflic"% Portanto, s=o limitados @uanto ao nmero de passagem,

porAm s=o ideais para o isolamento de alguns 'Brus% Culti'os prim>rios raramente sobre'i'em a&7 passagens in 'itro%

Cultivo semi"contínuo

Conhecido como linha celular diplFide, o culti'o semi-contBnuo contAm o nmero normal decromossomos de uma cAlula diplFide da espAcie da @ual foi originado% Culti'os semi-contBnuoss=o originados de culti'os prim>rios na @ual algumas cAlulas podem sobre'i'er mais @ue o limitede ayflic"% Esse tipo de culti'o geralmente sobre'i'e entre )7 e :7 passagens in 'itro% 3oentanto, esses culti'os s=o amplamente para a propaga=o de uma grande 'ariedade de 'Brus%/eralmente s=o compostos por fibroblastos%

Cultivo contínuo ou lin#as celulares


23/301

&)

$s cAlulas desse tipo de culti'o apresentam um nmero anormal de cromossomos, sendochamados de culti'os heteroplFides% Essas cAlulas s=o originadas de tecidos normais ouneopl>sicos e s=o caracteri+ados pela habilidade de propaga=o indefinida in 'itro% /eralmente,os culti'os contBnuos ou linhas celulares s=o menos susceptB'eis a propaga=o 'iral do @ue osculti'os prim>rio ou semi-contBnuo% PorAm, possuem a facilidade de multiplica=o em grande

escala o @ue A benAfico para a pes@uisa e produ=o de 'acinas% Muitas linhas celulares est=odisponB'eis em repositFrios, como o $merican ype Cell Culture $CC2%;s laboratFrios de 'irologia geralmente mantAm esto@ues de linhas celulares com um baionmero de passagens, pois essas linhas contBnuas s=o susceptB'eis a alteraGes nas suascaracterBsticas% $s alteraGes podem ser produ+idas pela infec=o com micoplasmas oucontamina=o com alguns 'Brus circo'Brus suBno e 'Brus da diarrAia 'iral bo'ina2%

Concentra/o e )&rifica/o viral

$pFs a adapta=o e propaga=o inicial, os 'Brus podem ser separados dos debris celulares e purificados% sso A obtido apFs um nmero de processos @ue en'ol'em centrifugaGes diferentes'elocidades2, di>lise, precipita=o, cromatografia e gradientes de densidades% ; passo inicialdesse processo A uma centrifuga=o diferencial baia 'elocidade2 Z &777 g2 @ue A usada pararemo'er o debris celulares% ; seguinte passo A uma centrifuga=o a alta 'elocidade 87 777 a L7777 g2 @ue ob os 'Brus n=oen'elopados, podem ser purificados pela centrifuga=o em gradientes de cloreto de cAsio%

;nfectividade e ar(a7ena(ento

Infectividade

nfecti'idade A a habilidade @ue o 'Brus tem de infectar uma cAlula hospedeira% $ temperaturaeterior U cAlula hospedeira afeta diretamente a capacidade do 'Brus manter a sua infecti'idade,

particularmente nos casos do 'Brus en'elopados% ;s 'Brus n=o possuem ati'idade metabFlica prFpria, a infecti'idade A a maneira de a'aliar a integridade da partBcula apFs a eposi=o adeterminadas temperaturas% $lguns parQmetros s=o considerados crBticos

• U 67[C, a infecti'idade ir> diminuir rapidamente em segundos%

• U )J[C, a infecti'idade ir> diminuir em minutos%• U &7[C, infecti'idade ir> diminuir em horas%• a infecti'idade, U temperaturas acima citadas, ir> influenciar a transmiss=o pelo contato

direto U )J[C2 e pelos fOmites U &7[C2%• U 8[C, a infecti'idade nos tecidos A mantida por dias% ClBnicos de'em estar atentos para

esse tipo de amostra clBnica%

emperaturas abaio da temperatura de congelamento s=o usadas para arma+enamento de 'Brusdurante prolongados perBodos% 3esse caso A importante manter a forma=o de cristais de gelo UnB'eis mBnimos%

De'e ser considerado @ue a resist?ncia e labilidade 'ariam muito entre os 'Brus% $lguns s=o

http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#density%23densityhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#density%23densityhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#density%23densityhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#density%23density


24/301

&8

capa+es de resistir por horas, dias, ou atA meses em condiGes ambientais, en@uanto outros s=oinati'ados em minutos sob condiGes semelhantes%r?s mAtodos principais de conser'a=o de 'Brus s=o

• congelamento U -J7[C com ou sem criopreser'antes%• congelamento U -1K6[C nitrog?nio lB@uido, para arma+enamento por um longo perBodo de

tempo%• liofili+a=o ou congelamento a seco, podendo ser estocados a temperatura ambiente ou

congeladores con'encionais%

Vis&ali7a/o de v%r&s

;s dois mAtodos mais utili+ados para 'isuali+ar a estrutura e morfologia dos 'Brus s=o amicroscopia eletrOnica e microscopia de fora atOmica% ;utros tipos de microscopia s=oempregados para obser'ar as alteraGes celulares indu+idas pela replica=o 'iral% Sem as tAcnicasde 'isuali+a=o dos 'Brus eiste uma dificuldade muito grande em se estudar a estrutura ou aintera=o 'Brus-cAlula% $ capacidade de 'isuali+a=o das partBculas permitiu se estimar o nmerode partBculas presentes em uma suspens=o% $lguns mAtodos permitem estimar o nmero de

partBculas presente em uma solu=o de forma indireta% Em ambos os casos, direta ou indireta, a@uantifica=o A sempre uma estimati'a% $ estimati'a A importante na prepara=o de 'acinas, nadetermina=o do nmero mBnimo para produ=o de doena ou em in'estiga=o 'iral%

$icroscopia óptica

Com o uso da microscopia Fptica n=o A possB'el a obser'a=o das partBculas 'Bricas, comece=o dos po'Brus, esta tAcnica pode ser utili+ada para a obser'a=o do efeito da infec=o'iral na cAlulas hospedeira% $ altera=o ou destrui=o causada pelo 'Brus nas cAlula A referido

como efeito citop>tico CPE2% ;s efeitos citop>ticos obser'>'eis incluem1% arredondamento celular e agregados semelhantes a cachos de u'a% E% adeno'Brus&% arredondamento celular, retra=o celular, ruptura com a libera=o de debris celulares% E%

entero'irus)% intumescimento e arredondamento celular em >reas locali+adas% E% herpes'Brus8% fus=o de '>rias cAlulas e forma=o de cAlulas gigantes multinucleadas sincBcio2% E%

paramio'Brus$dicionalmente, a forma=o de corpsculos de inclus=o pode ser obser'ada, sendocaracterBsticas de alguns 'Brus%

*igura &-&% Efeito citop>tico de um herpes'Brus e@uino XlentoX% Cortesia do $% (ayneRoberts%


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&:

$icroscopia de fluoresc%ncia

$ microscopia de fluoresc?ncia pode ser utili+ada para a 'isuali+a=o de cAlulas ou tecidosinfectados por 'Brus, nesse caso emprega-se anticorpos especBficos para o antBgeno associados a

um fluorocromo geralmente fluoresceBna2% ;s anticorpos ligam-se especificamente nosantBgenos 'irais dentro das cAlulas ou tecidos% $ 'isuali+a=o A possB'el apFs a ecita=o dofluorocromo com a lu+ ultra'ioleta #V2 do microscFpio de fluoresc?ncia, na @ual obser'a-se a>reas coloridas locali+adas em um fundo relati'amente escuro% $lternati'amente, a 'isuali+a=o

pode ser reali+ada indiretamente atra'As do uso de anticorpos n=o marcados especBficos para oantBgeno, como os soro de animais con'alescentes2, seguido do uso de um anticorpo marcadocom o fluorocromo @ue reconhece o primeiro anticorpo% $s tAcnicas @ue utili+am anticorposfluorescentes s=o rotineiramente usados no diagnFstico e pes@uisa 'iral%

$icroscopia eletr&nica

$ microscopia eletrOnica emprega a acelera=o dos elAtrons com grande energia emagneticamente, tornando possB'el a 'isuali+a=o da amostra% ;s elAtrons com alta energia

possuem comprimentos de ondas curtos e isso fa+ com se obtenha uma melhor resolu=o deestruturas muito pe@uenas% $ microscopia eletrOnica possui resolu=o capa+ de se 'isuali+ar grandes polBmeros, como D3$, R3$ e grandes proteBnas%Para facilitar a 'isuali+a=o, as amostras podem ser pre'iamente tratadas com metais pesados,como o Fsmio% ;s elAtrons chocam com o metal, os @uais s=o 'isuali+ados na tela fluorescente%Com microscopia eletrOnica A possB'el a obten=o de imagens tridimensionais dos 'Brus e de sualocali+a=o dentro da cAlulas hospedeira ncleo ou citoplasma2 em um determinado momentoapFs a infec=o% Como as amostras s=o tratadas com metais pesados, a obser'a=o dos 'Brus emcAlulas 'i'as n=o A possB'el%

$icroscopia at&mica de força

$ microscopia de atOmica de fora mede a propriedades locais tamanho, absor=o, magnetismo,etc%2 mediante a proimidade da sonda com a amostra% sso fa+ com @ue se


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&6

$ contagem do nmero de partBculas 'Bricas possui importQncia na pes@uisa e produ=o de'acinas% $ microscopia eletrOnica A usada para contagem de partBculas 'Bricas em soluGes li'resde 'Brus% #m determinado 'olume de amostra A eaminado e os 'Brus s=o contados% Esse nmeroA ent=o empregado para se fa+er uma estima=o do nmero total de partBculas na amostra% #malimita=o desse mAtodo A @ue capsBdeos 'a+ios, partBculas n=o infecciosas, s=o contadas% ;

nmero de partBculas infecciosas e o nmero total s=o comparados possibilitando oestabelecimento de uma rela=o partBculas totaisHpartBculas infecciosas para uma determinada prepara=o de um 'Brus%

Contage( indireta de v%r&s

;s mAtodos de contagem indiretos utili+am fatores associados com a infecti'idade ati'idade biolFgica2% ;s tr?s principais mAtodos utili+ados para a determina=o da concentra=o 'iral s=o pro'as de hemaglutina=o, pro'a de forma=o de placas e o mAtodo da dilui=o limitante%

'ema(lutinação

$ pro'a de hemaglutina=o A baseada na propriedade @ue muitos 'Brus en'elopados tem deaglutinar eritrFcitos% ; teste A reali+ado em microplacas e consiste da adi=o de cAlulas'ermelhas U diferentes concentraGes do 'Brus, apFs um perBodo de incuba=o o obser'a-se ahemaglutina=o% $ hemaglutina=o A o resultado da liga=o de '>rias partBculas 'Bricas UsuperfBcie do eritrFcito% Por eemplo, s=o necess>rias 17777 partBculas 'Bricas de influen+a por cada unidade hemaglutinante $2% #ma $ A definida como a maior dilui=o da amostra 'iral@ue produ+ hemaglutina=o completa%$ hemaglutina=o A empregada para a concentra=o e purifica=o de alguns 'Brus, e tambAmcomo um teste auiliar na identifica=o de alguns 'Brus em amostras de culti'o celular e fluBdos

de embriGes de galinhas% Especialmente de amostras 'Bricas @ue n=o efeito citopatog?nico ouent=o o fa+em de forma discreta% Pode ser utili+ada diretamente em amostras de fe+es ou paradeterminados tipos de ensaios en+im>ticos discutido no capBtulo J2% Ensaios similares deati'idade en+im>tica de um 'Brus em particular como a@ueles @ue possuem transcriptasere'ersa2 podem ser reali+ados de maneira semelhante%

)nidade formadora de placas

Esta pro'a baseia-se na inocula=o de cAlulas susceptB'eis com uma amostra do 'Brus e atra'Asda sua ati'idade biolFgica pode-se estimar a @uantidade de partBculas%

3esse procedimento, diluiGes seriadas na base de+ do 'Brus a ser testado s=o inoculadas em

camadas celulares% $pFs o perBodo de incuba=o @ue permite o 'Brus adsor'er nas cAlulas, Aadicionado um gel contendo agarose e meio de culti'o% ; >gar pre'ine a dissemina=o do 'Brusna cultura entre as cAlulas a uma grande distQncia, mas permite @ue ocorra uma transmiss=ocAlula-a-cAlula% 3os 'Brus citop>ticos, as cAlulas infectadas ser=o destruBdas formando um >reaclara indicando a morte celular apFs a um perBodo de incuba=o @ue pode 'ariar entre &8 - J&horas% ; c>lculo do nmero de placas baseia-se na contagem do nmero de placas obser'adas, nofator de dilui=o e no 'olume de amostra usada para, resultando em #nidade *ormadora dePlacas por mililitro de amostra%

$étodo da diluição limitante

Esse ensaio A baseado na obser'a=o da presena da replica=o 'iral in 'itro como CPE apFs aeposi=o de diferentes diluiGes da amostra a ser testada% \uando possB'el, utili+a-se um 'Brus

http://www.ivis.org/advances/Carter/Part1Chap7_pt/chapter.asp?LA=7http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#cyto_viruses%23cyto_viruseshttp://www.ivis.org/advances/Carter/Part1Chap7_pt/chapter.asp?LA=7http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#cyto_viruses%23cyto_viruses


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&J

refer?ncia @ue possuB a sua concentra=o prA-determinada como controle positi'o% Dependendodo 'Brus, reali+am-se diluiGes seriadas na base dois ou na base de+ e incuba-se com cAlulassusceptB'eis% ; tBtulo infeccioso a recBproca da maior dilui=o capa+ de infectar :7 dasculturas celulares2 A epresso como DCC:7Hml dose infectante para :7 dos culti'os celulares2%Essa pro'a pode ser reali+ada com culturas celulares, o'os embrionados ou atA mesmo com

animais de laboratFrios%

Diferentes (5todos &sados )ara caracteri7a/o

Eistem algumas tAcnicas utili+adas em 'irologia @ue s=o auiliares na identifica=o eclassifica=o de amostras desconhecidas de 'Brus% $lgumas das tAcnicas ser=o rapidamentecitadas, mas se possuem especial interesse no diagnFstico ou pes@uisa de algum particular 'Brusser=o descritas com mais detalhes na ocasi=o apropriada%

*ensibilidade a solventes lipídicos

$ sensibilidade de alguns 'Brus aos sol'entes lipBdicos, como clorofFrmio e Ater, auilia nataonomia de alguns 'Brus% odos os 'Brus @ue possuem a en'elope s=o susceptB'eis aossol'entes lipBdicos% odos os 'Brus animais en'elopados, com ece=o de alguns po'Brus, s=osensB'eis ao Ater%

Identificação do !cido nucléico

$ identifica=o A reali+ada atra'As da sBntese do >cido nucleico na presena de inibidores dasBntese do D3$, tais como :-bromo-&-deoyuridine !rd#2% Se a sBntese 'iral for inibida, amultiplica=o do 'Brus estar> diminuBda ent=o do mesmo modo% Caso a multiplica=o 'iral n=o

for inibida, presume-se @ue o 'Brus contenha R3$ como material genAtico% +n!lise por en,imas de restrição

En+imas de restri=o s=o endonucleases RE2 @ue cortam o D3$ de fita dupla em regiGesespecBficas, 'ariando de @uatro a oito se@u?ncias de bases palindrOmicas%$ an>lise por en+imas de restri=o A particularmente til para a defini=o do XsubsorotipoX, nadiferencia=o entre 'acina 'i'a modificada e amostra 'irulenta, e estudo epidemiolFgico desurtos% ; mAtodo baseia-se no tratamento do D3$ 'iral com uma ou mais en+imas de restri=o,seguido da separa=o dos fragmentos de acordo com o tamanho atra'As de eletroforese em gel de

poliacrilamida ou agarose%

;s 'Brus R3$ tambAm podem ser analisados atra'As desta tAcnica, porAm primeiro de'e ser sinteti+ado o D3$ complementar cD3$2 a partir de R3$ usando a en+ima transcriptasere'ersa, seguido de uma amplifica=o do cD3$ pelo uso da tAcnica de rea=o em cadeia da

polimerase PCR2, mAtodo @ue ser> descrito no capBtulo J%

'emadsorção

;s ortomio'Brus e paramio'Brus obt?m a camada eterna do en'elope atra'As do brotamentonas membranas celulares% $nteriormente ao brotamento, proteBnas codificadas pelos 'Brushemaglutininas2 s=o incorporadas na membrana celular% sso far> com as os eritrFcitos adsor'amna superfBcie celular, e resultando na forma=o de um foco de hemadsor=o @ue poder> ser

detectado microscopicamente%

http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#palindromes%23palindromeshttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap2_pt/chapter.asp?LA=7#palindromes%23palindromes


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&L

$étodos imunoló(icos

$nimais infectados com 'Brus respondem atra'As da produ=o de anticorpos especBficos% $detec=o e a'alia=o desses anticorpos, os @uais refletem o estado da doena, s=o utili+ados parao planerios em rebanhos e em estudos epidemiolFgicos de surtos%

$ detec=o dos anticorpos A tambAm empregada no diagnFstico de doenas, e isso A muitas 'e+esum processo demorado @ue re@uer a a'alia=o dos nB'eis de anticorpos na fase aguda econ'alescente, geralmente coletados num inter'alo de 17 a 18 dias% #ma medida mais r>pida Autili+ar anticorpos especBficos soro hiperimune2 para detectar os antBgenos 'irais diretamentenas amostras clBnicas% Esses anticorpos s=o obtidos atra'As da hiperimuni+a=o de coelhos oucabras com 'Brus% ;utra alternati'a @ue pode ser empregada s=o os anticorpos monoclonais, sedisponB'eis%$nticorpos monoclonais m$bs2 s=o preparados em camundongos apFs a sua eposi=o com oantBgeno 'iral, esses desen'ol'er=o linfFcitos ! especBficos no bao% Essas cAlulas ser=ocoletadas e fusionadas @uimicamente com a uma linhagem celular de plasmocitomas decamundongos @ue secretam g/% Essas cAlulas hBbridas s=o ent=o selecionadas e clonadas,resultando os hibridomas, esses ser=o analisados @uanto a secre=o de anticorpos especBficos

para o antBgeno 'iral% ;s hibridomas selecionados s=o in


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&K

*igura &-)% ;s passos associados com o desen'ol'imento de anticorpos monoclonais especBficos%

Gloss$rio

VBrus citop>tico s=o 'Brus @ue alteram a apar?ncia das cAlulas em cultura% $s alteraGes podemincluir arredondamento, fus=o, lise e libera=o e produ=o de corpsculos de inclus=o%

/radiente de densidade este procedimento A empregado para separa=o das cAlulas ou molAculasgrandes, como proteBnas e >cidos nuclAicos, pela centrifuga=o atra'As de um gradiente dedensidade% ; gradiente consiste de uma solu=o geralmente por sacarose ou cloreto de cAsio2formada por '>rias densidades, sendo a menos concentrada na superfBcie e a de maior

concentra=o no fundo% De'ido a centrifuga=o as cAlulas e molAculas mo'em-se atra'As dogradiente e formam bandas na densidade onde sua gra'idade e igual ao do meio%

PalindrOmicas s=o se@u?ncias de D3$ @ue a leitura A a mesma em ambas as direGes% $ maioriados sBtios de reconhecimento das en+imas de restri=o s=o palindrOmicas% E% o sBtio dereconhecimento da EcoR E% coli2 A

:] /$$C )])] C$$/ :]


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)7

n $ Concise Re'ie. of Veterinary Virology, Carter /%R%, (ise D%0% and *lores E%*% Eds%2%nternational Veterinary nformation Ser'ice, thaca 34 ...%i'is%org2, 5ast updated L-*eb-&77:9 $)87)%7&7:%P

Re)lica/o e gen5tica viral

D%0% (ise1 and /%R% Carter &

1Department of !iology, Concord #ni'ersity, $thens, (est Virginia, #S$%&Virginia-MarylandRegional College of Veterinary Medicine, Virginia ech, !lac"sburg, Virginia, #S$%

Ìndice

• Replica=o 'iral o Replica=o de 'Brus D3$ o Replica=o de 'Brus R3$

• /enAtica 'iral o Muta=o o XShift e driftX antig?nicos

• nteraGes entre dois 'Brus o Complementa=o o Recombina=o o Reati'a=o genAtica

o Mistura de fenFtipos • $plicaGes de 'Brus terapia genAtica e 'acinas recombinantes

o erapia genAtica o Vacinas recombinantes

• /loss>rio

Re)lica/o viral

$ replica=o dos 'Brus A um processo muito compleo e di'erso% ;s mecanismos de replica=odependem fundamentalmente do tipo de >cido nuclAico e da organi+a=o do genoma de cada'Brus% $pesar da di'ersidade de estratAgias de replica=o, eistem '>rios aspectos em comum nasdi'ersas etapas de replica=o% ; ciclo replicati'o de todos os 'Brus contAm as seguintes etapasliga=oHadsor=o, penetra=o, desnudamento se necess>rio2, sBntese protAica epress=o g?nica2,replica=o do genoma, montagem e egresso%

• $ adsor=o ou liga=o2 depende da intera=o fBsica entre os 'irions e a superfBcie dacAlula-al'o% $ adsor=o A essencialmente uma intera=o ligante-receptor% Comoconse@u?ncia, a especificidade de cAlulas-al'o e de hospedeiros susceptB'eis Adeterminada% Sem adsor=oHliga=o a infec=o n=o pode ocorrer% Por outro lado, nemtodos os e'entos de adsor=o resultam em infec=o produti'a% Em outras pala'ras, aadsor=o A necess>ria mas n=o assegura @ue a replica=o ir> ocorrer%

• Penetra=o refere-se U introdu=o do >cido nuclAico 'iral na cAlula, internali+a=o do

nucleocapsBdeo 'ia endocitose mediada por receptor, ou fus=o do en'elope 'iral com a

http://www.ivis.org/advances/Carter/toc.asphttp://www.ivis.org/advances/Carter/toc.asphttp://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1321%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=447%27;displayInfo()http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Replication%23Replicationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#RepDNA%23RepDNAhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#RepRNA%23RepRNAhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Genetics%23Geneticshttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Mutation%23Mutationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Antigenic%23Antigenichttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Interactions%23Interactionshttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Complementation%23Complementationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Recombination%23Recombinationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Reactivation%23Reactivationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Reactivation%23Reactivationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Mixing%23Mixinghttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Virus_Applications%23Virus_Applicationshttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Therapy%23Therapyhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Recombinant_Vacc%23Recombinant_Vacchttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Glossary%23Glossaryhttp://www.ivis.org/advances/Carter/toc.asphttp://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=1321%27;displayInfo()http://filename%3D%27/authors/author.asp?ID=447%27;displayInfo()http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Replication%23Replicationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#RepDNA%23RepDNAhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#RepRNA%23RepRNAhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Genetics%23Geneticshttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Mutation%23Mutationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Antigenic%23Antigenichttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Interactions%23Interactionshttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Complementation%23Complementationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Recombination%23Recombinationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Reactivation%23Reactivationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Mixing%23Mixinghttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Virus_Applications%23Virus_Applicationshttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Therapy%23Therapyhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Recombinant_Vacc%23Recombinant_Vacchttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#Glossary%23Glossary


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)1

membrana plasm>tica% Como resultado, o genoma 'iral A liberado e se locali+a no citosolou em 'esBculas endocBticas%

• ; desnudamento do genoma das proteBnas componentes do nucleocapsBdeo podenecessitar a participa=o de proteBnas celulares ou outros fatores% ; desnudamento A um

prA-re@uisito para a epress=o do genoma% $pFs o desnudamento, o genoma prossegue no

ciclo replicati'o ou uma cFpia dele A integrada no cromossoma do hospedeiro e permanece latente atA ser ati'ado retro'Brus2%• SBntese protAica ou epress=o g?nica2 ; R3$ mensageiro R3$m2 A produ+ido e

tradu+ido em proteBnas% ndependentemente do tipo D3$ ou R3$9 cadeia simples oudupla9 segmentado ou n=o-segmentado2, o genoma de'e ser capa+ de originar R3$smensageiros @ue se descrito para cada grupo de 'Brus, eiste um mecanismo nico pelo @ual ama@uinaria celular torna-se amplamente dedicada U sBntese de produtos 'irais emdetrimento da sBntese de proteBnas celulares%

• Replica=o do genoma o mecanismo de replica=o depende do tipo de >cido nuclAico,estrutura e topologia do genoma% 3os 'Brus mais simples, a replica=o do genoma A uma

tarefa eecutada por en+imas celulares9 outros 'Brus mais compleos codificam as suas prFprias en+imas replicati'as%

• Matura=o A a montagem completa das partBculas 'Bricas% $ montagem dos 'Brus n=o-en'elopados consiste primariamente da associa=o do genoma com as proteBnas @ueformam o nucleocapsBdeo% Esse processo ocorre espontaneamente atra'As de interaGesentre proteBnas e entre estas e o genoma% 3a matura=o dos 'Brus en'elopados, onucleocapsBdeo ad@uire um en'oltFrio eterno en'elope2 @ue consiste de membranascelulares nuclear, /olgi, retBculo endoplasm>tico ou membrana plasm>tica2 contendouma camada dupla de lipBdios deri'adas da cAlula e proteBnas 'irais inseridas% ; en'elopeA ad@uirido por um processo denominado de XbrotamentoX%

• Egresso libera=o2 dos 'irions% 3a replica=o dos 'Brus sem en'elope, milhares de'irions recAm-formados s=o liberados pela morte e lise celular% 3os 'Brus en'elopados, a

prog?nie 'iral A liberada atra'As de brotamento, sem necessariamente implicar em mortecelular% 3o entanto, muitos 'Brus en'elopados tambAm podem ser liberados pela morte edesintegra=o da cAlula%

Re)lica/o dos v%r&s DA

• Em geral, os 'Brus D3$ replicam no ncleo% EceGes s=o os po'Brus e os irido'Brus'Brus de insetos e peies2 @ue utili+am Xf>bricasX citoplasm>ticas%

• ;s 'Brus D3$ @ue replicam no ncleo utili+am a R3$ polimerase-dependente de D3$

celular para a transcri=o% $ maioria dos po'Brus e irido'Brus tra+ transcriptases nos'irions, o @ue lhes permite replicar no citoplasma%

• $ replica=o dos 'Brus D3$ A semiconser'ati'a e simAtrica, com ambas as cadeias sendoreplicadas% Em 'Brus D3$ de cadeia dupla, como os adeno'Brus, a replica=o das duascadeias n=o segue necessariamente o mesmo mecanismo%

• $s en+imas D3$ polimerases da cAlula eucariota podem replicar genomas pe@uenos oumAdios papiloma'Brus, polioma'Brus2, en@uanto os genomas grandes geralmentecodificam as suas prFprias polimerases adeno'Brus, herpes'Brus, po'Brus2%

• $ matura=o dos 'Brus D3$ ece=o dos po'Brus e irido'Brus2 ocorre no ncleo%• $s proteBnas estruturais s=o transportadas do citoplasma para o ncleo, onde interagem

entre si e com o genoma e s=o integradas na estrutura do capsBdeo @ue en'ol'e o >cidonuclAico% %

http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#e_vesicle%23e_vesiclehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#golgi%23golgihttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#transcriptase%23transcriptasehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#transcriptase%23transcriptasehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#s_replication%23s_replicationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#e_vesicle%23e_vesiclehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#golgi%23golgihttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#transcriptase%23transcriptasehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#s_replication%23s_replication


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)&

• ;s 'Brus en'elopados completam a matura=o atra'As do brotamento na membrananuclear irido'Brus2 ou da membrana plasm>tica%

-eplicação dos vírus ./+ de cadeia dupla

Esses incluem as seguintes famBlias de 'Brus animais $sfa'iridae, Po'iridae, rido'iridae,erpes'iridae, Polyoma'iridae, Papilloma'iridae e $deno'iridae *ig% )%12%• ;s genomas 'ariam entre : - L b Polyoma'iridae2 e mais de )77 b Po'iridae e

rido'iridae2%• Em geral, a replica=o do genoma ocorre no ncleo, por en+imas do hospedeiro para

pe@uenos 'Brus como os polioma'Brus e papiloma'Brus2 ou por replicases codificadas pelo'Brus adeno'Brus, herpes'Brus2% $ replica=o dos po'Brus e alguns irido'Brus ocorre nocitoplasma, resultando na forma=o de corpsculos de inclus=o @ue cont?m as en+imas'irais necess>rias para a replica=o, como as polimerases de D3$ dependentes de D3$%

• ; D3$ de cadeia dupla pode ser na topologia circular, linear, ou linear com asetremidades ligadas%

• ;s genomas circulares pe@uenos s=o replicados em dire=o bidirecional, semelhante ao@ue ocorre com os plasmBdios% $credita-se @ue a replica=o do D3$ dos polioma'Bruscadeia dupla circular2 se


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))

nclui as famBlias Circo'iridae e Par'o'iridae de 'Brus animais• ;s genomas 'ariam de ) a 6 "b%• ; D3$ circular dos circo'Brus parece ser replicado por um mecanismo de Xrolling

circleX%

• $ replica=o ocorre no ncleo e en'ol'e a sBntese de uma cadeia de D3$ sentidonegati'o D3$ - 2 para ser'ir de molde para a sBntese da cFpia genOmica D3$ 2 dos'irions% Esse processo en'ol'e a produ=o transiente de um D3$ de cadeia dupla,denominado de forma replicati'a%

• $ penetra=o do D3$ de cadeia simples no ncleo estimula o seu XreparoX por en+imascelulares, originando a forma replicati'a cadeia dupla2% 3o caso dos genomas circulares,a forma replicati'a associa-se com histonas celulares e outras proteBnas nucleares e passaa ser comportar como um cromossoma do hospedeiro% *ormas lineares possuemmecanismos deri'ados @ue permitem o genoma ser replicado sem perda de D3$ a cadaciclo de replica=o%

• ;s genomas D3$ de cadeia simples podem ser lineares de um nico componente

Par'o'iridae2 ou circulares um nico componente Circo'iridae2%

*igura )-&% Es@uema geral de replica=o dos 'Brus D3$ de cadeia simples%

Vírus ./+ de cadeia dupla com transcrição reversa

• nclui a famBlia epadna'iridae

http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#n_s_DNA%23n_s_DNAhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#n_s_DNA%23n_s_DNAhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#p_s_DNA%23p_s_DNAhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#n_s_DNA%23n_s_DNAhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#n_s_DNA%23n_s_DNAhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#p_s_DNA%23p_s_DNA


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)8

• ; genoma A constituBdo de uma molAcula circular n=o-co'alente2 de D3$ parcialmentecadeia dupla, com )%& b%

• $pFs a penetra=o e desnudamento parcial, o D3$ genOmico penetra no ncleo e acadeia incompleta A completada pela D3$ polimerase 'iral eHou en+imas celulares% #ma'e+ completada, uma en+ima ligase reali+a a liga=o das etremidades%

• 3o ncleo, o genoma ccc comporta-se como um minicromossoma, conrio R3$ @ue ser'e de molde para o D3$ do 'irion% R3$s mensageirosmenores s=o tambAm produ+idos, dando origem U polimerase 'iral e proteBnas docapsBdeo% $ montagem parcial dos capsBdeos prossegue%

• $lgumas cFpias do pgR3$ s=o encapsidadas nos 'irions recAm-formados, onde ser'emde molde para a polimerase 'iral sinteti+ar o cD3$ transcri=o re'ersa2% $pFs a sBntese

da primeira cadeia de D3$ complementar cD3$2, a polimerase degrada o pgR3$ @ueser'iu de molde e sinteti+a a cadeia complementar de D3$% ;s 'irions @ue s=o liberadosdas cAlulas por brotamento cont?m um genoma D3$ de cadeia dupla%

Re)lica/o dos v%r&s RA

• $ replica=o da maioria dos 'Brus R3$ ocorre estritamente no citoplasma das cAlulas e Aindependente da ma@uinaria nuclear% EceGes s=o os ortomio'Brus @ue re@ueremfatores da transcri=o celular e os retro'Brus @ue replicam 'ia um intermedi>rio D3$%

• $ liga=o adsor=o2 ocorre por interaGes eletrost>ticas entre os 'irions e os receptores

celulares especBficos%• ;s 'Brus penetram na cAlula atra'As de endocitose mediada por receptor ou atra'As defus=o na membrana celular ou na 'esBcula endocBtica 'Brus en'elopados2%

• ; desnudamento ocorre no citoplasma, ou durante a passagem transloca=o2 atra'As damembrana celular, como parece ser o caso dos picorna'Brus% ; R3$ dos reo'Brus, noentanto, nunca A completamente desnudo, permanecendo em partBculas parcialmentedesmontadas durante a transcri=o e replica=o%

• ; genoma de alguns 'Brus R3$ A constituBdo de uma nica molAcula de R3$ n=o-segmentados29 em outros se constitui de mais de um segmento segmentado2%

• ; R3$ de alguns 'Brus animais possui fun=o de R3$ mensageiro sentido 2 e pode ser diretamente tradu+ido, en@uanto o genoma de outros A sentido negati'o anti-sense2 e

de'e ser inicialmente transcrito em R3$s de sentido por polimerases de R3$dependentes de R3$ 'irais transcriptases2%

• ;s retro'Brus possuem uma en+ima transcriptase re'ersa polimerase de D3$ dependentede R3$2, o @ue permite a forma=o de uma molAcula de D3$ cadeia dupla intermedi>riapro'Brus D3$2, @ue A incorporada no genoma da cAlula hospedeira e Asubse@uentemente transcrita em R3$s mensageiros por polimerases de R3$dependentes de D3$ do hospedeiro%

• Em geral, a replica=o do R3$ A semi-conser'ati'a e segue-se pela forma=o de umintermedi>rio replicati'o R12% ; R1 consiste do R3$ parental @ue ser'e de molde para atranscri=o de '>rias cadeias de R3$, @ue e'entualmente se destacam do molde e ser'emde molde para a sBntese de R3$ 'iral%

• $ replica=o do R3$ de cadeia dupla dos reo'Brus A conser'ati'a e assimAtrica9 apenasuma cadeia A replicada, ao contr>rio do D3$ de cadeia dupla% ; processo de replica=o

http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#ligase%23ligasehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#ligase%23ligasehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#r_transcriptase%23r_transcriptasehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#c_replication%23c_replicationhttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#ligase%23ligasehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#r_transcriptase%23r_transcriptasehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#c_replication%23c_replication


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):

eige polimerases de R3$ dependentes de R3$ replicases2 @ue s=o codificadas pelo'Brus%

• $ matura=o ocorre no citoplasma da cAlula, com o R3$ 'iral se associando com as proteBnas do capsBdeo e formando o nucleocapsBdeo% ;s 'Brus en'elopados completam amatura=o pelo brotamento na membrana do retBculo endoplasm>tico, aparelho de /olgi

ou membrana plasm>tica%

Vírus -/+ de cadeia dupla

• nclui as seguintes famBlias de 'Brus Reo'iridae e !irna'iridae%• ;s genomas desses 'Brus 'ariam entre 8 a &7 - &J "b em etens=o%• $ adsor=o ocorre 'ia endocitose mediada por receptor% ; 'irion A parcialmente desnudo

e o ncleo da partBcula permanece na 'esBcula endocBtica%• $ replica=o A atra'As de mecanismo conser'ati'o9 o R3$ de cadeia dupla ser'e de

molde para a produ=o de R3$ mensageiro por uma en+ima polimerase de R3$dependente de R3$% /rande parte da parte restante da replica=o ainda A pouco

conhecida%• $ replica=o n=o en'ol'e a forma=o de intermedi>rios R1% 3=o ocorre a forma=o de

R3$ de cadeia dupla no citoplasma da cAlula infectada hospedeira%• odos possuem genomas lineares, segmentados% Cada segmento corresponde a um R3$

mensageiro monocistrOnico% • odos os genomas s=o lineares, mas podem ter dois segmentos !irna'iridae2 ou '>rios

segmentos os reo'Brus possuem 17 a 1&2%•

http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#monocistronic%23monocistronichttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#m_c_genomes%23m_c_genomeshttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#m_c_genomes%23m_c_genomeshttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#monocistronic%23monocistronichttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#m_c_genomes%23m_c_genomeshttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#m_c_genomes%23m_c_genomes


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)6

*igura )-)% Es@uema geral de replica=o dos 'Brus R3$ de cadeia dupla%

Vírus -/+ de cadeia simples0 polaridade positiva

• ncluem as seguintes famBlias de 'Brus animais Calici'iridae, Picorna'iridae,$stro'iridae, 3oda'iridae, *la'i'iridae, Corona'iridae, oga'iridae e $rteri'iridae%

• ; tamanho do genoma 'aria entre menos de : atA mais de &7 - )7 b• $ penetra=o A 'ia endocitose mediada por receptor% Ent=o, o 'irion A desnudo e o R3$

cadeia simples A liberado no citoplasma%• ;s genomas possuem sentido de mensageiro e s=o totalmente ou parcialmente tradu+idos

em proteBnas na primeira etapa da replica=o 'iral%• ;s picorna'Brus e fla'i'Brus possuem um genoma R3$ de polaridade positi'a como

genoma, @ue se comporta como um mensageiro policistrOnico% ; genoma A diretamentetradu+ido em uma poliproteBna etensa, @ue A processada co- e pFs-tradu=o em '>rias

proteBnas 'irais por proteases do hospedeiro e 'iral%• ;s corona'Brus apresentam um padr=o compleo de transcri=o, en'ol'endo '>rias etapas

de tradu=o para completar o ciclo replicati'o%• PossB'eis formas de genomas lineares s=o nico-segmento com '>rias ;R*s toga'irus e

calici'Brus29 nico segmento com uma nica ;R* picorna'Brus29 dois segmentos comnica ;R* noda'Brus2%

http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#polycistronic%23polycistronichttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#polycistronic%23polycistronic


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)J

*igura )-8% Es@uema de replica=o dos 'Brus R3$ de cadeia positi'a%Vírus -/+ de cadeia simples0 sentido ne(ativo

• nclui as seguintes famBlias de 'Brus animais ;rthomyo'iridae, Rhabdo'iridae,

Paramyo'iridae, !orna'iridae, *ilo'iridae, Delta'Brus, $rena'iridae, !unya'iridae%• ;s genomas 'ariam entre 17 a 18 b e 11 a &7 b de etens=o%

Como os genomas s=o de sentido negati'o, n=o s=o tradu+idos diretamente% Por isso, esses 'Brusde'em tra+er a suas polimerasesHreplicases nos 'irions para reali+ar a transcri=oHreplica=o dogenoma%

• ;s ortomio'Brus possuem genomas segmentados% ; primeiro passo na replica=o A atranscri=o dos R3$ de sentido negati'o pela polimerase de R3$ dependente de R3$'iral%

• ;s rabdo'Brus possuem genomas n=o-segmentados% $ replica=o tambAm re@uer atranscri=o pela polimerase de R3$ dependente de R3$ 'iral%

• 3o caso dos 'Brus ambissense, a transcriptase A codificada pela regi=o de9 polaridade positi'a @ue e'entualmente mediar> a transcri=o das regiGes de polaridade negati'a%

• PossB'eis arran


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)L

Vírus -/+ de cadeia simples0 polaridade positiva0 com transcrição reversa

• nclui os 'Brus de 'ertebrados da famBlia Retro'iridae

• Este genoma 'iral A formado por cFpias diplFides de uma molAcula de R3$ de cadeiasimples mantidas pido conhecimento crescente dagenAtica 'iral tem le'ado a muitas aplicaGes e tAcnicas muito teis% $lgumas importantes >reasde interesse s=o discutidas a seguir%

:&ta/o

Muta=o A uma altera=o na se@u?ncia do genoma de um organismo% ; organismo possui amuta=o A denominado de mutante% $ altera=o baseia-se na compara=o com o 'Brus de campo'Brus de refer?ncia2% Dessa informa=o, cepas 'Brus de campo de um mesmo 'Brus2, tipossorolFgicos ou biolFgicos2 e 'ariantes fenotipicamente diferentes do 'Brus de campo por ra+GesgenAticas desconhecidas2 podem ser identificados%MutaGes s=o e'entos neutros @ue podem ser atuados por sele=o natural% Se a muta=o aumentaa sobre'i'?ncia transmiss=o e replica=o2 do organismo, ela possui uma 'antagem seleti'a% Se amuta=o A pre e'entualmenteeliminado da popula=o% Se a muta=o n=o altera a sobre'i'?ncia do organismo sobre'i'er ou o

seu fenFtipo, ent=o a muta=o pode passar despercebida% MutaGes podem ocorrer por doismecanismos diferentes, mutaGes espontQneas ou mutaGes indu+ida%

• MutaGes espontQneas s=o endFgenas, sendo resultado de erros das polimerases de D3$e R3$ ao incorporar formas tautomAricas naturais dos nucleotBdeos%;s 'Brus D3$ s=o tipicamente mais geneticamente est>'eis do @ue os 'Brus R3$9 a taade muta=o A de 17-L a 17-11 por nucleotBdeo incorporado% sso de'e-se, em parte, @ue as

polimerases de D3$ fre@uentemente possuem alguma habilidade de corre=o de erros%;s 'Brus R3$ s=o considera'elmente menos geneticamente est>'eis, com taas demuta=o espontQnea entre 17-) a 17-8 por nucleotBdeo incorporado% $s polimerases deR3$ tipicamente n=o possuem capacidade de corre=o de erros% $pesar disso, alguns'Brus R3$ s=o relati'amente est>'eis geneticamente polio'Brus2% $credita-se @ue esses'Brus possuem taas de muta=o t=o altas como os outros 'Brus R3$, mas s=o t=o

http://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#w_type%23w_typehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#tautomers%23tautomershttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#w_type%23w_typehttp://www.ivis.org/advances/carter/Part1Chap3_pt/chapter.asp?LA=7#tautomers%23tautomers


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)K

precisamente adaptados para a replica=o e transmiss=o @ue pe@uenos erros resultam emsua elimina=o%

• MutaGes indu+idas s=o eFgenas, o resultado da eposi=o a agentes mutag?nicos@uBmicos ou radia=o2 @ue aumentam significati'amente a taa de muta=o da@ueleorganismo% ;s mutag?nicos @uBmicos agem ou diretamente nas bases ou indiretamente

pro'ocando mau-pareamento de bases% $ radia=o ultra'ioleta pode pro'oca a forma=ode dBmeros de pirimidina, radia=o ioni+ante pode danificar o D3$ diretamente pela@uebra de ligaGes @uBmicas ou indiretamente por formar radicais li'res @ue, por sua 'e+,danificam o D3$%

Eiste uma 'ariedade de fenFtipos @ue s=o produ+idos como resultado de mutaGes% $lguns dosmais comuns s=o

$utação de espectro de #ospedeiro

MutaGes @ue permitem a altera=o de hospedeiros de um determinado 'Brus do originalassociado com o 'Brus de campo% Esse tipo de altera=o acredita-se tenha ocorrido com o

par'o'Brus felino, @ue entendeu seu espectro de hospedeiros e tornou-se capa+ de infectar c=es%

$utaç1es letais condicionais

nclui uma sArie de mutaGes @ue replicam sob algumas condiGes, afora estas o 'Brus de campoA capa+ de replica=o, mas o condicional n=o% Eemplos de mutantes condicionais letais s=o osmutantes temperatura-sensB'eis S2 e mutantes adaptados ao frio% Mutantes temperaturasensB'eis t?m sido utili+ados na produ=o de 'acinas e mutantes adaptados ao frio t?m sidousados para an>lise dos ciclos replicati'os 'irais%

$utantes de taman#o2morfolo(ia de placa

Como resultado de mu

livro virologia veterinária carter wise e flores

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