Prof. IVAné@

Baseado na aula do M.Sc.Cláudio C. Silva. UCG / BIO

DNA

• Material genético

cromatina

• DNA + Proteínas

Cromossomos

• Cromatina duplicada e espiralizada

Cromátide

Braço Curto (p)

Braço Longo (q)

Centrômero(envolvido pelo

Cinetócoro)

Telômeros

Constricções Secundárias

ConstriçãoPrimária

Função:

• manutenção e regeneração do organismo

Uma célula-mãe dando origem a duas células-filhas idênticas a célula-mãe.

Método Cultura Celular:

• - Sangue periférico

• - Medula Óssea

• - Tumores sólidos, etc.

Amostra heparinizada é uma amostra de tecido submetida a um agente farmacológico anti-coagulante para a manutenção das condições de fluidez dos líquidos e colóides celulares.

O meio de cultura é o substrato nutritivo onde as células ou as moléculas de DNA usadas no teste são mantidas em condições satisfatórias.

Fitohemaglutinina (não hemaglutina) é uma proteína vegetal usada para facilitar a separação de células que serão submetidas a determinados tipos de exames (como o teste de cariótipo)

A colchicina ou colquicina é uma alcalóide altamente venenoso. No teste de cariótipo é usada para facilitar a observação do cromossomos condensados no núcleo da célula, uma vez que, que esta substância inibe a polimerização das proteínas do fuso mitótico e para a divisão celular na metáfase, fase na qual os cromossomos se encontram no maior grau de condensação

Coleta é a etapa de obtenção dos tecidos vivos de onde as células serão retiradas para exame. Lâmina é o preparo da amostra sobre uma lâmina de vidro que será levado ao microscópio para observação, neste caso, do cariótipo.

Amostra Heparinizada

Meio de cultura

Fitohemaglutina

Colchicina

Coleta / Lâmina.

Grupo

Características

No. de Cromossomos Pares Cromossômicos

TamanhoPosição do

Centrômero

A Grandes

Meta

Submeta

Meta

6

1

2

3

B Grandes Submeta 4 5 e 6

C Médios Submeta♀ 16

♂ 156, 7, 8, 9, 10, 11, 12 e X

D Médios Acro 6 13, 14 e 15

E Pequenos Submeta 6 16, 17 e 18

F Pequenos Meta 4 19 e 20

G Pequenos Acro♀ 4

♂ 521, 22 e Y

Total 46 Cromossomos

Baixa Resolução – 400 bandas (regiões e bandas)

Alta resolução – 850 bandas (regiões, bandas e sub-bandas)

Altíssima resolução – 2.000 bandas (regiões, bandas, sub-bandas e sub-sub-bandas)

Tratamentos cromossômicos envolvendo desidratação,

envelhecimento, desnaturação ou digestão enzimática

seguida da incorporação de corante DNA-específico

Formação de bandas claras e

escuras ou coloridas, evidenciando

estruturas de 1-10Mb

Incorporação de corante DNA-específico (Aceto-orceína, Giemsa, etc).

Rápido, fácil e baixo custo

Permite a contagem do número de cromossomos

Permite avaliar a qualidade dos preparados cromossômicos

Muito utilizado em dosimetria biológica

Coloração Convencional

Autossomos (1 – 22)

Heterossomos ou

Cromossomos Sexuais

(X e Y)

A – G Grupos cromossômicos

1 - 22 Números de autossomos

X, Y Cromossomos sexuais

/ Separar as linhagens celulares

+ ou - Indica se o cromossomo foi adicionado ou perdido; indica ganho ou perda no braço cromossômico

? Identificação questionável do cromossomo ou da estrutura cromossômica

* Indica que o cromossomo ou a estrutura deve estar explicada no rodapé

ISCN: An International System for Human Cytogenetic Nomenclature

2N

SPTZs (N)

2N

Óvulos (N)

Numéricas:

1. Euploidias (monoploidia, triploidia, tetraploidia etc)

2. Aneuploidias (monossomia, nulissomia, trissomia, tetrassomia etc)

Estruturais:

1. Deleção 3. Inversão

2. Duplicação 4. Translocação

Gametas anormais (100%)

Gametas anormais (50%)

Função:

• Produção de gametas

Uma célula-mãe dando origem a quatro células-filhas com a metade da informação genética da célula-mãe.

Aberrações cromossômicas

47,XY,+21

Síndrome de Down (Trissomia do Cromossomo 21)

Descrita em 1961 por Sandberg e colaboradores

1:1000 nascimentos;

Estatura média 1,83 m;

Orelhas displásicas;

Ponte nasal larga;

Acnes; Dedos alongados;

Hiperatividade; Fertilidade normal;

Intelecto normal ou discreta oligofregnia;

47,XYY

Descrita em 1959 por Jacobs e colaboradores

47,XXX

1:1000 nascimentos;

Tendência a esquizofrenia;

Amenorréia secundária;

Hiperatividade; Fertilidade normal;

Intelecto normal ou discreta oligofregnia;

2 – 4 : 10.000 nascimentos;

Aplasia cutânea do cabelo;

Microcefalia e microftalmia;

Fissura lábio-palatal bilateral;

Micrognatia, Surdez, Proboscis;

Anomalias do SNC;

Quadro convulsivo;

95% mortalidade nos até sexto mês

47,XX,+13 ou

47,XY,+13

1: 3000 nascimentos;

Comprometimento cardíaco;

Alterações pulmonares graves;

15% dos afetados sobrevivem ao primeiro ano de vida;

Convexidade plantar;

Poliesplenia;

Hérnias umbilicais;

Micrognatia;

47,XX,+18 ou

47,XY,+18

Aberrações cromossômicas

Translocação

Não recíproca

Translocação

Recíproca

Translocação

Não recíproca

Translocação

Recíproca

(Robertsoniana)

Crossing-Over desigual

(Duplicação / Deleção)

Inversões

(Pericêntrica e Paracêntrica)

Deleções

(Intertiscial, Terminal p e Terminal q)

p-

q-

Cromossomo em Anel (r)

IsocromossomosIso q

1: 50.000 nascimentos;

Choro característico;

Microcefalia e mandíbula pequena;

Retrognatia;

Faringe pequena anormal, epiglote flácida e glote hipotônica;

Dismorfia cranio-facial;

Oligofrenia.

r(X)i(X)

del(Xq)

Questão 01

Os conhecimentos atuais de biologia celular, biologia molecular e engenharia genética podem, muitas vezes, estabelecer com segurança

o parentesco entre pessoas, mesmo quando elas pertencem a gerações afastadas entre si.

O heredograma abaixo mostra os descendentes do casal João e Maria.

Atualmente, de toda essa família, apenas Maria e todos os seus bisnetos estão vivos, e se apresentaram para a identificação de herdeiros

do casal citado. Por não haver documentos legais comprobatórios da relação de parentesco, nem ser possível a coleta de material

genético dos membros falecidos da família, foi utilizada, dentre outras, a técnica de identificação por meio do estudo do DNA

extranuclear.

Indique o número de:

a) bisnetos do sexo masculino e do sexo feminino que poderiam ser identificados com aproximadamente 100% de certeza, por técnicas

que determinam a homologia entre amostras de DNA extranuclear, e justifique sua resposta;

b) netos e bisnetos de João e Maria que possuíram ou possuem o cromossomo Y idêntico ao de João e justifique sua resposta.