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Prof.Doutor José Cabeda Genética Genética Molecular em Análises Clinicas A Replicação A Replicação

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Prof.Doutor José Cabeda Genética

Genética Molecular em Análises Clinicas

A ReplicaçãoA Replicação

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A Replicação

Detalhes químicos Detalhes químicos (Animação)(Animação) Múltiplos pontos de replicação por cromossomaMúltiplos pontos de replicação por cromossoma A replicação ocorre nas duas cadeias do DNAA replicação ocorre nas duas cadeias do DNA

A replicação é contínua na cadeia A replicação é contínua na cadeia “leading”“leading” A replicação é descontínua na cadeia A replicação é descontínua na cadeia “lagging”“lagging”

Fragmentos de okasakiFragmentos de okasaki Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomeraseSíntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase A correcção de erros incorporada na polimeraseA correcção de erros incorporada na polimerase

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A Replicação

Detalhes QuímicosDetalhes Químicos Múltiplos pontos de replicação por cromossomaMúltiplos pontos de replicação por cromossoma A replicação ocorre nas duas cadeias do DNAA replicação ocorre nas duas cadeias do DNA

A replicação é contínua na cadeia A replicação é contínua na cadeia “leading”“leading” A replicação é descontínua na cadeia A replicação é descontínua na cadeia “lagging”“lagging”

Fragmentos de okasakiFragmentos de okasaki Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomeraseSíntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase A correcção de erros incorporada na polimeraseA correcção de erros incorporada na polimerase

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Múltiplos pontos de replicação

Ori C (Ori C (E.ColiE.Coli)) repetições de 9 mers e 15 mers em cerca de 240bprepetições de 9 mers e 15 mers em cerca de 240bp estas repetições são locais de ligação da proteína DnaAestas repetições são locais de ligação da proteína DnaA

Origem do SV40 contem cerca de 65bpOrigem do SV40 contem cerca de 65bp ARS (ARS (“autonomous replicating sequence”- levedura)“autonomous replicating sequence”- levedura)

Elemento A (15 bp) e Elementos B1,B2,B3 (Locais de Elemento A (15 bp) e Elementos B1,B2,B3 (Locais de ligação da ORCligação da ORC

sequência rica em ATsequência rica em AT

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A Replicação

Multiplos pontos de replicação por cromossomaMultiplos pontos de replicação por cromossoma A replicação ocorre nas duas cadeias do DNAA replicação ocorre nas duas cadeias do DNA

A replicação é contínua na cadeia A replicação é contínua na cadeia “leading”“leading” A replicação é descontínua na cadeia A replicação é descontínua na cadeia “lagging”“lagging”

Fragmentos de okasakiFragmentos de okasaki Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomeraseSíntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase A correcção de erros incorporada na polimeraseA correcção de erros incorporada na polimerase

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A Replicação

Multiplos pontos de replicação por cromossomaMultiplos pontos de replicação por cromossoma A replicação ocorre nas duas cadeias do DNAA replicação ocorre nas duas cadeias do DNA

A replicação é contínua na cadeia A replicação é contínua na cadeia “leading”“leading” A replicação é descontínua na cadeia A replicação é descontínua na cadeia “lagging”“lagging”

Fragmentos de okasakiFragmentos de okasaki Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomeraseSíntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase A correcção de erros incorporada na polimeraseA correcção de erros incorporada na polimerase

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A Replicação

Multiplos pontos de replicação por cromossomaMultiplos pontos de replicação por cromossoma A replicação ocorre nas duas cadeias do DNAA replicação ocorre nas duas cadeias do DNA

A replicação é contínua na cadeia A replicação é contínua na cadeia “leading”“leading” A replicação é descontínua na cadeia A replicação é descontínua na cadeia “lagging”“lagging”

Fragmentos de okasaki Fragmentos de okasaki (Animação)(Animação) Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomeraseSíntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase A correcção de erros incorporada na polimeraseA correcção de erros incorporada na polimerase

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Animação

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A Replicação

Multiplos pontos de replicação por cromossomaMultiplos pontos de replicação por cromossoma A replicação ocorre nas duas cadeias do DNAA replicação ocorre nas duas cadeias do DNA

A replicação é contínua na cadeia A replicação é contínua na cadeia “leading”“leading” A replicação é descontínua na cadeia A replicação é descontínua na cadeia “lagging”“lagging”

Fragmentos de okasakiFragmentos de okasaki Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomeraseSíntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase A correcção de erros incorporada na polimeraseA correcção de erros incorporada na polimerase

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As telomerases

Permitem que em cada divisão a cadeia Permitem que em cada divisão a cadeia “lagging”“lagging” não fique mais curta depois da não fique mais curta depois da remoção do primer de RNA do fragmento remoção do primer de RNA do fragmento de Okasaki de Okasaki

São transcriptases reversas “modificadas”São transcriptases reversas “modificadas” produzem DNA a partir de um molde de produzem DNA a partir de um molde de

RNA a elas ligadoRNA a elas ligado Produzem DNA repetitivoProduzem DNA repetitivo

Animação

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A Replicação

Multiplos pontos de replicação por cromossomaMultiplos pontos de replicação por cromossoma A replicação ocorre nas duas cadeias do DNAA replicação ocorre nas duas cadeias do DNA

A replicação é contínua na cadeia A replicação é contínua na cadeia “leading”“leading” A replicação é descontínua na cadeia A replicação é descontínua na cadeia “lagging”“lagging”

Fragmentos de okasakiFragmentos de okasaki Síntese dos telómeros: função fisiológica da telomeraseSíntese dos telómeros: função fisiológica da telomerase A correcção de erros incorporada na polimeraseA correcção de erros incorporada na polimerase

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Trabalho concertado de um complexo sistema enzimático

animação

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Prof.Doutor José Cabeda Genética

Genética Molecular em Análises Clinicas

A TranscriçãoA Transcrição

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A Transcrição

O RNA como espécie central na genéticaO RNA como espécie central na genética Tipos de polimerases do RNA. CofactoresTipos de polimerases do RNA. Cofactores PromotoresPromotores Mecanismo da TranscriçãoMecanismo da Transcrição Papel da instabilidade do RNA. Papel da instabilidade do RNA. Transcrição reversaTranscrição reversa

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O RNA no cerne da Genética

TranscriçãoTranscrição produção de mRNAprodução de mRNA A regulação génica depende da semivida do mRNAA regulação génica depende da semivida do mRNA

Primers de RNA na replicaçãoPrimers de RNA na replicação O tRNA intervem na traduçãoO tRNA intervem na tradução O rRNA intervem na traduçãoO rRNA intervem na tradução Alguns vírus só utilizam o RNAAlguns vírus só utilizam o RNA

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A Transcrição

O RNA como espécie central na genéticaO RNA como espécie central na genética Tipos de polimerases do RNA. CofactoresTipos de polimerases do RNA. Cofactores PromotoresPromotores Mecanismo da TranscriçãoMecanismo da Transcrição Papel da instabilidade do RNA. Papel da instabilidade do RNA. Transcrição reversaTranscrição reversa

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Polimerases do RNA

Eucariotas:Eucariotas: Tipo I – rRNA (50-70%)Tipo I – rRNA (50-70%) Tipo II – hnRNA (20-40%; mRNA)Tipo II – hnRNA (20-40%; mRNA) Tipo III – restantes espécies de RNA Tipo III – restantes espécies de RNA

(10%;tRNA, snRNA)(10%;tRNA, snRNA) MitocondriasMitocondrias CloroplastosCloroplastos

Formadas por várias subunidades com funções Formadas por várias subunidades com funções específicasespecíficas

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A Transcrição

O RNA como espécie central na genéticaO RNA como espécie central na genética Tipos de polimerases do RNA. CofactoresTipos de polimerases do RNA. Cofactores PromotoresPromotores Mecanismo da TranscriçãoMecanismo da Transcrição Papel da instabilidade do RNA. Papel da instabilidade do RNA. Transcrição reversaTranscrição reversa

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Promotores

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Tata Box

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Promotor

da Pol I

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Promotor da Pol III

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A Transcrição

O RNA como espécie central na genéticaO RNA como espécie central na genética Tipos de polimerases do RNA. CofactoresTipos de polimerases do RNA. Cofactores PromotoresPromotores Mecanismo da TranscriçãoMecanismo da Transcrição Papel da instabilidade do RNA. Papel da instabilidade do RNA. Transcrição reversaTranscrição reversa

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Pol é posicionada por TBP

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Iniciação da transcrição

animação

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Abertura da hélice

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Transcrição (animação)

Fase de iniciaçãoFase de iniciação Reconhecimento do DNA e posicionamentoReconhecimento do DNA e posicionamento Abertura da héliceAbertura da hélice Incorporação do primeiro nucleótidoIncorporação do primeiro nucleótido

Fase de elongaçãoFase de elongação Migração da zona de DNA abertoMigração da zona de DNA aberto Elongação do hnRNAElongação do hnRNA

Fase de terminaçãoFase de terminação

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Transcrição

Processamento do RNA (Processamento do RNA (animaçãoanimação)) Adição do CAPAdição do CAP PoliadenilaçãoPoliadenilação splicingsplicing

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mRNA

animação

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A Transcrição

O RNA como espécie central na genéticaO RNA como espécie central na genética Tipos de polimerases do RNA. CofactoresTipos de polimerases do RNA. Cofactores PromotoresPromotores Mecanismo da TranscriçãoMecanismo da Transcrição Papel da instabilidade do RNAPapel da instabilidade do RNA.. Transcrição reversaTranscrição reversa

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A Transcrição

O RNA como espécie central na genéticaO RNA como espécie central na genética Tipos de polimerases do RNA. CofactoresTipos de polimerases do RNA. Cofactores PromotoresPromotores Mecanismo da TranscriçãoMecanismo da Transcrição Papel da instabilidade do RNA. Papel da instabilidade do RNA. Transcrição reversaTranscrição reversa