7/17/2019 Estágio - Metodologias

http://slidepdf.com/reader/full/estagio-metodologias 1/2

Estágio/Metodologias

1. Determinação de Ácido Lático

As determinações das concentrações de ácido lático foram realizadas a partir da

metodologia proposta por Pryce (1969). Em tuos de plástico para centr!fuga" #"9$ m% de

reagente precipitante (Em um al&o de 1%' 1 g de tungstato de sdio (*a +,-) / ++ ml de

ácido ortofosfrico 90 (#P,-) / $ g de sulfato de core (2u3,-.4+,) / água destilada)

foram adicionados a $ 5% do sorenadante da amostra preiamente centrifugada a 1+. 7  g 

 por 6 min. 8mediatamente aps a adiç&o dos reagentes" os tuos foram agitados por 

apro7imadamente $ segundos e centrifugados por $ minutos a +. 7  g .

Em seguida" 1" m% do sorenadante foi transferido para tuos de ensaio e" de forma

rápida" 6" m% de ácido sulfrico (+3,-) foram adicionados em cada tuo" sendo noamente

agitados por 1 segundos. Aps agitaç&o" os tuos foram resfriados em água corrente e

adicionados de 1 5% de reagente de coloraç&o (1"$ g de p:;idro7iifenil em 1 ml de

dimetilformamida" em al&o de 1 m%)" agitados e dei7ados em repouso por 1 minutos.

 *a etapa seguinte" os tuos foram transferidos para an;o:maria com água ferente por 

apro7imadamente 9 segundos" resfriados em água corrente e leados ao espectrofot<metro para

leitura da asor=ncia utilizando:se filtro de comprimento de onda de $6$ nm.

As soluções padr&o foram otidas atra>s de diluiç&o seriada da soluç&o inicial de -"mg?m% (+"1# g de lactato de l!tio / $ m% de +3,- / água destilada em al&o olum>trico de

$ m%) e utilizadas na construç&o da cura padr&o com as concentrações de @ "+$@ "$@ 1"@

+" e -" mg?m%.

 Material 

• uos de plástico para centr!fuga• Balões de 1 m%" $ m% e 1%• Pipetas• Cicropipetas de $ e 1 5%• Balança• 2entr!fuga• uos de ensaio• Ban;o:maria

• Espectrofot<metro

 Reagentes

•

ungstato de sdio (*a+,-)• Dcido ortofosfrico (#P,-)• 3ulfato de core (2u3,-.4+,)• Dcido sulfrico (+3,-)• P:;idro7iifenil• imetilformamida• %actato de l!tio

7/17/2019 Estágio - Metodologias

http://slidepdf.com/reader/full/estagio-metodologias 2/2