enzimas e funÇÃo hepÁtica

7/28/2019 ENZIMAS e FUNO HEPTICA

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2 AVALIAO

Bioqumica Clnica II


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AVALIAO BIOQUMICA

DA FUNO HEPTICA

PROVAS DAS LESES DOPARNQUIMA HEPTICA Dosagem das TRANSAMINASES (ALT e

AST)

Fosfatase Alcalina Gama Glutamil-transpetdase


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AVALIAO BIOQUMICA DA FUNOHEPTICA

Provas de Colestase Dosagem de bilirrubina Total e Direta

Dosagem de Sais biliares Dosagem do colesterol total Dosagem da fosfatase alcalina

Eletroforese de Protenas Plasmticas Avalia a capacidade heptica de sntese das

protenas (albuminas), o estado inflamatrio eimunitrio (imunoglobulinas)


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Localizao Intracelular dasEnzimas

As organelas parecem ter, de forma altamenteindividualizada, enzimas que esto relacionadas com asfunes que exercem;

Aquelas associadas ao ncleo esto ligadas com amanuteno, remoo e utilizao do material gentico

A maioria das enzimas mitocondriais lida com produode energia ou reaes oxidativas (trabalho celular)

Enzimas microssomiais so responsveis pela biossntese

de hormnios, metabolismo de drogas ou inativaes; Os Lisossomas realizam o processo digestivo das clulas; As citoplasmticas: gliclise, biossntese de cidos graxos


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Enzimas Sricas

Exceo feita aos fatores da coagulaosangnea e s L P Lipases, as demais enzimasso todas intracelulares e, somente vazam para osoro quando da leso celular;

Os nveis de muitas destas enzimas foramestudados extensamente. Os testes de enzimassricas tm sido to amplamente aplicados que

chegam a ser considerados procedimentos deROTINA LABORATORIAL


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Por qu vazam?


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INTERESSE DOS CLNICOS

O interesse pelas enzimas sricas teve incio hmais de meio sculo, com a demonstrao dautilidade dos nveis:

Fosfatase Alcalina no diagnstico das

DOENAS SSEAS e HEPATOBILIARES Fosfatase cida no diagnstico do CARCINOMA

da PRSTATA Amilase e Lipase para o diagnstico da doena

pancretica. AST/ALT (TRANSAMINASES) para o

diagnstico das doenas CARDACA EHEPTICA


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Os Testes Enzimticos Complexo Enzima Substrato:

E + S [ES] [EP] E + P

Pode-se inferir que a Vmax. ocorre quando a enzima estSATURADA com o SUBSTRATO, ou seja, todas asenzimas esto ocupadas.

Logo, a taxa de formao do produto, neste momento, constante (ordem zero - plat) e proporcional ao total daconcentrao da enzima.

Ento, a Vmx proporcional formao do produtoque proporcional concentrao de enzima, emconcentraes saturantes de substratos ;

Portanto, quando se deseja medir a concentrao daenzima no soro, pode-se medir tanto o aumento daconcentrao do produto quanto a diminuio do

substrato, 0 que for conveniente).


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O sistema NAD+ / NADH + H+

L D HPiruvato + NADH Lactato + NAD

NADH (medir o seu desaparecimento pH7.4) ou

Lactato + NAD Piruvato + NADHNADH (medir o seu aparecimento pH 8.8)

Os Testes EnzimticosReaes de acoplamento


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Dificuldades Analticas A hemlise pode estar associada com liberao

no soro das enzimas das hemceas; Efeitos adversos dos anticoagulantes; o soro

portanto a amostra preferida. O soro leitoso pode resultar em leituras variveis

de abosorbncias. A maioria tem estabilidade a 6C por 24 horas Os recipientes de vidros devem ser

meticulosamente limpos vital que o pH da reao seja mantido

constante Deve-se incluir um PROGRAMA DE

CONTROLE DE QUALIDADE


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Controle de QualidadeTestes Clnicos

Adeso a cintica de ordem zero

Estudos de proporcionalidades comincremento da amostra

Uso de poolde soro congelado comosolues de controle

Testes em duplicatas para avaliar apreciso do teste


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Princpios Diagnsticos

A maioria das enzimas sricas tem sua origemnas clulas. Podem ter origem em um ou mais tecidos. As elevaes nos nveis sricos de uma enzima,

que varivel em sua distribuio, d umaindicao menos especfica do stio do dano.

Os nveis sricos de enzimas glicolticas e outrasassociadas com as doenas neoplsicas, parecem

refletir a massa total do tumor. Nveis anormalmente baixos podem tambm ser

observados, como resultado de sntesediminuda.


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Avaliao Laboratorialdas doenas sseas eMusculares


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Fosfatases

Podemos encontrar as fosfatases alcalinas pH 9 (ALP) e cidas pH 5 (ACP);

A ALP est presente em muitos tecidos,inclusive fgado e osso. Alm de rim, baoe intestino.

A ACP encontrada na prstata(carcinoma) e tambm nos eritrcitos


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Fosfatase Alcalina - ALP

Fosfatase Alcalina (ssea): No osso, exerce provavelmente um papel nadeposio de fosfato de clcio.

Est elevada em muitos distrbios sseos, como

doena de Paget e osteomalcea. Na invaso do osso por cncer de um tumor primrio

localizado em outro local (mama, pulmo ou prstata) metstase.

H tambm um aumento fisiolgico na adolescncia Fosfatase Alcalina (Heptica):

Doena heptica obstrutiva

Juntamente com as demais enzimas hepticas:

TGO/TGP


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Fosfatase cida - ACP

Fosfatase cida (ACP): pH timo em torno de 5

uma enzima lisossmica

Sua elevao ocorre no carcinomametaststico do prstata;

Os nveis elevados da ACP so encontrados

nas leucemias de clulas ciliares Est presente no fluido seminal (medicina

forense)


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Aminotransferases ouTransaminases

GOT (AST) Catalisa a transferncia da amina do glutamato para o

oxaloacetato, formando -cetoglutarato e aspartato. Presente nas mitocndrias e ausentes no citosol Est elevada na doena heptica, doena muscular e aps

infarto do miocrdio; Moderadamente elevada (5x) em cirrose e muito alta (25x) em

pessoas com hepatite viral. Ou necrose tecidual.

GPT (ALT)

Catalisa a transferncia da amina do glutamato para o piruvato Presente no citosol das clulas hepticas e cardacas Importante para o diagnstico da doenas hepatocelulares ou

apenas inflamatrias.


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Enzimas Glicolticas e do Ciclo deKrebs (CK)

Esto presentes virtualmente em quase todos os tecidos e, portanto,no so boas marcadoras.

Distrofia Muscular de Duchene: aumenta a isoenzima A daALDOLASE, uma enzima que existe em abundncia no msculoesqueltico.

Doenas musculares neurognicas (como a miasteniagrave) causam elevaes baixas destas enzimas.

A G6PD (via das pentoses fosfato) til para diagnstico demutaes genticas e anemia hemoltica crnica.

A ICD (Isocitrato desidrogenase) do CK est elevada na doenaheptica primria.


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Lactato Desidrogenase

Catalisa a interconverso reversvel entre lactatoe piruvato.

Ocorre em todas as clulas humanas.

Pode estar elevada (2 a 40 vezes) aps infarto domiocrdio e durante muitas doenas hepticas,inclusive nas anemias megaloblsticas

Esto moderadamente elevadas nas leucemias

granuloctica e agudas e na anemia hemoltica. Na distrofia muscular progressiva tambm

est elevada (2 a 4 vezes)


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LDH - Isoenzimas

Isoenzimas (isozimas) so diferentes formasmoleculares de certas enzimas, do mesmo oudiferentes tecidos.

A LDH composta por quatro subunidades.

M um tipo encontrado no msculo ou fgado

H um tipo encontrado no corao.

M4 , M3H, M2H2, MH3, H4 (Isoenzimas)

Estes, podem ser separados por eletroforese.


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Eletroforese - LDHs


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Creatina Quinase (CK) CreatinaFosfoquinase (CPK)

Importante no metabolismo energtico. encontrada em corao, msculo esqueltico ecrebro.

A creatina uma protena sintetizada no fgado earmazenada nos msculos, como fosfocreatina.Ao ceder o fosfato energtico convertida emcreatinina, um produto final do metabolismo.

a primeira a se elevar aps um infarto e estaumentada tambm na distrofia muscular deDuchene.


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Enzimas Sricas na DoenaMuscular

As enzimas mais extensamente estudadas soALP, AST, ALT, LDH e CK

A CK a medida da mais confivel da doena

muscular esqueltica, j que relativamenteespecfica para msculos estriados (esqueltico emiocrdio)

A atividade muscular extrema em indivduos

sem preparo fsico tambm eleva a taxa destasenzimas.

A medida combinada da ALDOLASE com a CK

indicada para o diagnstico da doena muscular


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A anlise das enzimas sricas tornou-se umarotina laboratorial semelhante eletrocardiografia

O Infarto pulmonar usualmente diferenciadodo infarto cardaco pelo aumento da LDH comnveis normais de AST e CK-MB

Ressalte-se que o diagnstico do infarto domiocrdio substancialmente consistentequando se executam dosagens seriadas com otempo e se verificam mudanas nas fraes.

Enzimas Sricas no Infarto doMiocrdio


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CK & LDHINFARTO

E i S i D


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Muitos estudos tm demonstrado aumento dasenzimas glicolticas (LDH e ALDOLASE) no soroem uma grande variedade de carcinomas.

O monitoramento das enzimas sricas til noseguimento da resposta quimioterapia depacientes com neoplasmas.

A resposta adequada quimioterapia refletidapelos valores diminudos

Enzimas Sricas na DoenaNeoplsica


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Enzimas em Outros FluidosCorpreos

A medida da atividade enzimtica no sucogastrintestinal, fluido cefaloraquidiano eurina tem sido aplicada ao diagnstico de

diversas doenas: Cncer de Estmago

Carcinoma Renal

Carcinoma da bexiga Hemorragias cerbrovasculares


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Estudo de Caso (I)

Um homem obeso e de meia idade foi trazidopara sala de emergncia aps um acidente deautomvel. O paciente contou que logo antesa trombada ele tinha perdido a respirao e

ficado muito tonto. O exame sugeriu ou AVCou IM. O paciente foi admitido paraobservao e foram coletadas amostrasperidicas de sangue para CK e outros

ensaios enzimticos. Pergunta: qual a finalidade de ensaiar-se a

CK por um certo perodo de tempo?


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Curvas de CalibraoTGO/TGP

A dosagem das transaminases pode serfeita atravs de uma curva de calibraotraada em papel semilog ou milimetrado.

Estas dosagens no seguem a lei deLambert-Beer;

Como preparar uma curva?


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DESINTOXICAO

Biotransformao (citocromo P-450)

Hepatopatias: (excesso de sais biliares) Diminuio da degradao

Diminuio da biotransformao

Aumento da toxicidade


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ELETROFORESE


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ELETROFORESE


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ELETROFORESE


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INDICAES DASDOSAGENS BIOQUMICAS

ICTERCIAS Descolorao amarela da pele ou da

esclertica

Aumento das concentraesplasmticas de bilirrubina no plasma

(Hiperbilirrubinemia) Desequilbrio entre a produo e aexcreo


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Bibliografia Consultada

Bioqumica Uma abordagem dirigida por casos.Montgomery, Conway e Espector. 5 edio. Ed. Artesmdicas

Diagnsticos Clnicos & Tratamento. John Bernard

Henry. 18 edio. Ed. Manole LTDA Bioqumica Ilustrada. Pamela champe, Richard A.

Harvey e Denise R. Ferrier. 3 edio. Ed. Artmed. Bioqumica. Robert Roskoski, Jr. Editora Guanabara

Koogan S.A. Patobioqumica. Peter Karlson, Wolfgang Gerok e

Werner Hoxter. Editora Guanabara Koogan S.A. Bioqumica. Mary Campbell. 3 edio. Ed. Artmed. www.google.com.br
http://www.google.com.br/http://www.google.com.br/

enzimas e funÇÃo hepÁtica

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