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UNIVERSIDADE PRESIDENTE ANTÔNIO CARLOS

GESIANE GONÇALVES FERREIRA

RELATÓRIO DE ESTÁGIO SUPERVISIONADO EM IMUNOLOGIACLÍNICA DO CURSO DE FARMÁCIA

IPATINGA4 DE MAIO DE 2011


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1

LISTA DE FIGURAS E TABELAS

Figura 1. Princípio do teste de hepatite viral B

IgG................................................................12

Figura 2. Princípio do teste de hepatite viral B

IgM. ..............................................................15

Figura 3. Princípio do teste de rubéola

IgG. ...........................................................................18

Figura 4. Princípio do teste de rubéolaIgM. ..........................................................................20

Tabela 1. eter!ina"#o do grupo sanguíneo pela presen"a de

he!oaglutina"#o...................2$

Tabela 2. %esultados obtidos pelo teste de tipage!

sanguínea................................................2$


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2

SUMÁRIO

1I&'%()*+(...............................................................................................

.........................$

2 ,-%-,'%I/-*+( ( (,-

'GI(................................................................3

4 -'II-

%-I/--...............................................................................................6

''

-(.........................................................................................................6

''

,7-G-.....................................................................................................8

''

97,G.........................................................................................................:

' 7P-'I' I%- B

IgG...........................................................................11

'' 7P-'I' I%- B

IgM .......................................................................14

P,%

';.............................................................................................................

....13

' %)B


4/37

3

''

=>II......................................................................................................21

'IP-GM

-&G)=&-.............................................................................................24

'' ?--%

%(.......................................................................................25

$

,(&,)+(...................................................................................................

....................26

%>%@&,I-.................................................................................................

.......................28

-&;(.........................................................................................................

.........................40

1 INTRODUÇO

- i!unologia é considerada u!a ciAncia nova e sua orige! est

atribuída a dCard DannerE Fue e! 16:3 descobriu a utilia"#o da vacínia


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4

co!o prote"#o contra a varíola hu!anaE u!a doen"a co! conseFHAncias

atais. JD-&?-K et al.E 2002L

&o setor de I!unologia e! u! aboratrio de -nlises ,línicasE as

rea"Nes i!unoFuí!icas s#o as bases de u!a grande variedade de ensaios

clínicos sensíveis e especíOcos. &este testesE e! geralE utilia9se

anticorpos co!o reagentes para a detec"#o de substncias Fuí!icas

JantígenosL de interesse. < a especiOcidade e a alta aOnidade de

anticorpos para antígenos especíOcosE Qunta!ente co! a capacidade

eRclusiva dos anticorpos interligare! aos antígenosE Fue per!ite! a

identiOca"#o e a dosage! de substncias especíOcas pelos !étodos

i!unolgicos. J'ietE1::3L

-nticorpos s#o i!unoglobulinas capaes de se ligar especiOca!ente

a u!a variedade de antígenos naturais e sintéticos Jpor eRe!ploE

proteínasE glicídiosE cidos nucléicosE lipídeos e outras !oléculasL. -

i!unoglobulina G JIgGL é o reagente i!unoFuí!ico de uso !ais reFHente.

-tual!enteE Ig- EIgM EIg e Ig n#o dese!penha! u! papel i!portante

na anlise i!unoFuí!ica. a !es!a or!aE os anticorpos !onoclonais

s#o a!pla!ente utiliados co!o reagente e! técnicas de i!unoensaio.J'ietE1::3L

-tual!enteE os !étodos i!unolgicos a!pliara! sua a"#o para

estudar os distSrbios do prprio siste!a i!unolgico. -s células linides

anor!ais pode! perturbar a produ"#o de i!unoglobulinasE deeitos

congAnitos pode! preQudicar a produ"#o de anticorpos circulantesE a

un"#o dos lincitosE !acragosE neutrOlos ou do co!ple!ento. -

resposta i!unolgica anor!al pode causar doen"as alérgicas ou auto9i!unes. -ssi!E os !étodos i!unolgicos continua! e! grande

desenvolvi!ento e novas técnicas s#o reFuente!ente elaboradas.

JM()%-E 2003L

entre algu!as rea"Nes utiliadas no aboratrio de I!unologia

est#o as rea"Nes de precipita"#o e aglutina"#o. - pri!eira ocorre entre

antígenos !ultivalentes J!acro!oléculas solSveisL e anticorpos dos tipos

IgGE Ig-E IgM ouE possivel!ente IgE levando a or!a"#o de !osaicostridi!ensionais Fue se agrega! e se precipita!. D as rea"Nes de


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5

aglutina"#o ocorre! entre u! antígeno particulado e seu anticorpo

especíOco Jaglutina"#o diretaL ou entre u!a partícula inerte e recoberta

pelo antígeno solSvel e seu anticorpo especíOco Jaglutina"#o indireta ou

passivaL. ! geralE as rea"Nes de aglutina"#oE s#o si!plesE !as

necessita! de u!a cuidadosa padronia"#o e do uso de controles

positivos e negativos.

( estgio de I!unologia te! co!o Onalidade a!pliar e apri!orar os

conheci!entos sobre a rea de atua"#o clínica i!unolgicaE sobre co!o

realiar as anlisesE o correto !anuseio das inor!a"Nes e dos reagentes

ornecidos pelos Tits utiliados nos testesE e inclusive a interpreta"#o dos

resultadosE Fue !uitas vees s#o associados aos sinto!as clínicos para a

conclus#o de u! diagnstico.


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6

2 !ARA!TERI"AÇO DO LO!AL DE ESTÁGIO

( estgio de anlises i!unolgicas oi realiado no laboratrio 111

no andar térreo da )niversidade Presidente -ntUnio ,arlosE Campus

IpatingaE localiado na %ua aler!oE 2:: Bairro Bethnia.

-s atividades ora! instruídas e supervisionadas pela proessora

Míria! (liveiraE or!ada e! bioFuí!ica pela )niversidade Presidente

-ntUnio ,arlos9 IpatingaE e especialiada e! i!unologia clínicaE atuante

co!o docente da !es!a disciplina na presente universidade.

( laboratrio onde ora! eitas as atividades do estgio é a!ploE

disposto co! bancadasE outra bancadas onde est#o dispostos os

!icroscpiosE cadeirasE televisorE lousa brancaE ar!rios co!

eFuipa!entos e !ateriais para a realia"#o de anlises diversasE piasE

rerigeradores para o ar!aena!ento dos Tits para os teste e as

substncias ter!olbeis.

-s atividades transcorrera! nos dias 16E 18E 2$E 25E 41 do !As de

!ar"o e no dia 28 de abril sendo nas Fuintas9eiras das :V40h Ws 14V40hE e

nas seRtas9eiras das 6V40h Ws 14V40hE totaliando u!a carga horria de

40 horas.


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7

3 ATI#IDADES REALI"ADAS

-s atividades ora! dividas parte tericaE Fuando oi apresentado o

laboratrioE a localia"#o dos eFuipa!entosE os !ateriais de utilia"#o

rotineira para as anlisesE procedi!entos de seguran"a dentro do

laboratrio e durante as prticas co! os !ateriais e a!ostrasE ta!bé!E

ora! apresentadas as OnalidadesE os princípios e a !etodologia dos

testes realiadosX e! parte prticaE Fuando ora! realiados os testes a

partir de a!ostras co! a posterior obten"#o dos resultados Onais.

- seguirE est#o descritos os testes i!unolgicos realiados durante o

período do estgio e! i!unologia clínica.

TESTES DE ASLO

FINALIDADE

< u! teste i!unolgico Fualitativo e se!iFuantitativo co! a

Onalidade de deter!inar a antiestreptolisina Y(Z e! soro sanguíneo

através da aglutina"#o de partículas de lteR sensibiliadas co!

streptolisina Y(Z. J-(''E 2010L.

$RIN!%$IO DO M&TODO


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8

< dado pela aglutina"#o Fue ocorre Fuando o reagenteE constituído

por u!a suspens#o de partículas de poliestireno sensibiliadas co!

streptolisina (E ao ser colocado e! contato co! soro sanguíneo

contendo altos níveis de anticorpos antiestreptolisina ( inicia a rea"#o

antígeno anticorpoE evidenciado pela aglutina"#o das partículas de

lteR Fue or!a! agregados acil!ente visíveis. J-(''E 2010L.

- streptolisina Y(Z é u!a toRina liberada pelo Streptococcus

pyogenes, nas inec"Nes causadas por elaE e é alta!ente antigAnica

levando W or!a"#o de -nticorpos -ntietreptoisina ( J-(L. stas

bactérias s#o a causa !ais reFuente de aringite bacteriana e!

crian"as e pode! levar a co!plica"Nes co!oV !iocardite reu!tica e

glo!erulonerites agudas diusas. J-(''E 2010L.

-proRi!ada!ente 85[ dos portadores de ebre reu!tica

apresenta! níveis elevados de -( a partir da Fuarta se!ana da

doen"aE !as !es!o assi!E nestes casos n#o h co!o identiOcar a

atividade da doen"a. Mes!o sendo considerado u! teste i!portanteE a

-( apresenta apenas co!o resposta u!a inec"#o prévia estreptoccica

e sua eleva"#o pode n#o signiOcar u! indicador de doen"as reu!ticas.J-(''E 2010L.

MATERIAIS E REAGENTES

• Pipetas 25µ.

• Ponteiras descartveis.

• Placa de undo preto.

• BastNes descartveis.

• \it contendoV lteRE controles positivo e negativo.

• -!ostra. )tiliou9se o soro para a realia"#o do teste.

>oi le!brado Fue n#o se deve utiliar o plas!aE as a!ostras lipA!icas e

he!olisadas.

$RO!EDIMENTO T&!NI!O>ora! seguidas as instru"Nes descritas pela Bula do \it teste.


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9

RESULTADOS

&enhu!a das a!ostras analisadas apresentou aglutina"#o aps a

realia"#o do testeE deter!inando9se todos os resultados co!o negativos

para o teste de -(.

TESTE DE !'AGAS

FINALIDADE DO TESTE

IdentiOcar a presen"a de anticorpos contra o Trypanosoma cruzi

possíveis de ser encontrados e! a!ostras de soro sanguínea.

- doen"a de ,hagas é causada por u! protoorioE Trypanosoma

cruzi. < u!a inec"#o endA!icaE de evolu"#o crUnicaE e trans!itida ao

ho!e! pelo inseto triato!íneo.

Pode! ser consideradosE i!unologica!enteE 4 estgiosV agudoE latente e

crUnico. &a ase agudaE veriOca!9se ebreE !iocardiopatiaE

linoadenopatiaE hepatoespleno!egalia e parasite!ia. - !ultiplica"#ointracelular dos parasitas nos !Ssculos lisos e estriadosE alé! das células

do siste!a retículo endotelialE leva a or!a"#o de pseudocistos. &a ase

latente n#o h sinto!as e a doen"a pode evoluir para a ase crUnica co!

sinais de !iocardiopatiaE degenera"#o das células ganglionares do

siste!a nervoso central e periéricoE hipertroOa e dilata"#o de certos

rg#osE tais co!o esUago e clon. Ineli!ente prevalece! os altos

índices de incidAncia e !orbidade da doen"a e por isso ela se tornou u!dos !aiores proble!as de saSde pSblica na -!érica atina. JIM)&(97-I

,7-G-E 200$L.

$RIN!%$IO DO M&TODO

( teste te! por princípio a aglutina"#o pela rea"#o de eritrcitos de

aves estabiliados e sensibiliados co! co!ponentes antigAnicos do

Trypanosoma cruzi alta!ente puriOcadosE Fue entra! e! contato co! o


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10

soro contendo anticorpos contra esses antígenos. JIM)&(97-I ,7-G-E

200$L.


• Pipetas e ponteiras descartveis.

• 'ubos de ensaio.

• iluente

• \it co! controles positivo e negativoE eritrcitos sensibiliados

e 29!ercaptanol.


$RO!EDIMENTO T&!NI!O

>ora! seguidas as instru"Nes descritas pela Bula do \it teste.

RESULTADOS

&enhu!a das a!ostras analisadas apresentou ]ocula"#o aps a

realia"#o do testeE deter!inando9se todos os resultados co!o negativospara o teste de ,hagas.

TESTE DE ( )'!G

FINALIDADE

( teste de 9h,G te! co!o obQetivo a deter!ina"#o Fuantitativa da

gonadotroina coriUnica hu!ana no soro ou urina J9h,G ^)-&'I'-'I(E

2006L para a detec"#o da gest#o e para o diagnstico de distSrbios

precoces da gesta"#o. J-,,)I' ,I- MI,%(?E 2003L.

( hor!Unio gonadotropina coriUnica hu!ana Jh,GL é secretado

pelo tecido placentrioE desde o !o!ento da i!planta"#o do ovcito

ecundado e serve para !anter o corpo lSteo durante as pri!eiras

se!anas da gravide. ua concentra"#o plas!tica e urinria eleva9se

dra!atica!ente durante a gesta"#o nor!al. Poré!E a h,G ou as

glicoproteínas se!elhantes ao h,G ta!bé! pode! ser produidas por


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11

u!a a!pla variedade de tu!ores trooblsticos e n#o trooblsticos.

J-,,)I' ,I- MI,%(?E 2003L.

$RIN!%$IO DO M&TODO

< u! !étodo rpido de i!uno9anlise cro!atogrOca para a

detec"#o Fualitativa da Gonadotropina ,oriUnica 7u!ana na urina ou

no soro para auRiliar na detec"#o do início da gravide. (nde u!a

co!bina"#o de anticorposE incluindo u! anticorpo h,G !onoclonalE

detecta! seletiva!ente níveis elevados de h,G. J'%IP -K ''E

2006L.

- anlise é eita pela i!ers#o da tira de teste e! urina ou soro e a

posterior observa"#o da or!a"#o de linhas coloridas. - a!ostra

percorre via capilar ao longo da !e!brana para reagir co! o conQugado

colorido. e a a!ostra contiver elevados níveis do hor!UnioE este reage

co! o anticorpo especíOco h,G colorido conQugado e or!a! u!a

linha colorida na regi#o da linhas de teste da !e!brana. MasE na

ausAncia desta linha colorida sugere9se u! resultado negativo. ,o!o

controleE u!a linha colorida se!pre aparecer na regi#o da linha decontrole indicando Fue u! volu!e adeFuado de a!ostra oi

acrescentado e Fue ocorreu absor"#o da !e!brana. J'%IP -K ''E

2006L.


• idraria

• Pipetas !anuais ou auto!ticas

• 'ira de teste

• -!ostra. Jpodendo ser urina ou soro. Mas nesta anlise oi

utiliado o soroL



RESULTADOS


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12

'odas as a!ostras analisadas apresentara! colora"#o so!ente para

a ORa de controle e nenhu!a para a aiRa de testeE deter!inando9se todos

os resultados co!o negativos.

TESE DE 'E$ATITE #IRAL B IgG

FINALIDADE

( teste te! o obQetivo de detectar Fualitativa!ente os anticorpos

IgG para o antígeno core da hepatite B J7BcLE e! soro ou plas!a hu!ano.

JIMM)&( ,((MB II 7Bc IgGL.

( vírus da hepatite B J7BL pertence a u!a a!ília de vírus de &-E

cha!ada HepadnaviridaeE apresentando hepatotropis!o evidente e u!

Snico !eio de replica"#o pelo !ecanis!o de transcri"#o reversa. (

viríon co!pleto ou partícula de aneE consiste e! u!a !olécula de

&- circular protegida por u! capsídeo nuclear _ antígeno de core

J7Bc-gLE e envolvido por u!a lipoproteína de envelopeE Fue é o antígeno

de superície J7Bs-gL. ( 7Bs-g ta!bé! é encontrado no soro co!opartículas ou Ola!entos eséricosE inco!pletos e n#o inecciosos. )!

peFueno co!ponente do nucleocapsídeo do 7BE o antígeno 7Be

J7Be-gLE ta!bé! é detectvel no sangue durante a ase replicativa deste

vírus. JIMM)&( ,((MB II 7Bc IgGL.

( vírus da hepatite B te! u!a distribui"#o global e est

a!pla!ente presente. uas principais vias de trans!iss#o s#oV

horiontalE através de conta!ina"#o seRual ou parenteralX e verticalEco! a trans!iss#o congAnita da !#e inectada para o eto.

-s conseFHAncias clínicas da inec"#o por 7B varia! de total!ente

i!perceptíveisE !aioria dos casosE ou evolui para u!a hepatite aguda co!

icteríciaE podendo haver recupera"#o total dentro de seis !eses aps o

início da doen"a. - !inoria da popula"#o inectada pode desenvolver

hepatite ul!inanteE reFHente!ente seguido de bito. D e! u!a

propor"#o signiOcativa dos pacientes adultosE o 7B pode persistirE


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13

progredindo para hepatite crUnica co! desenvolvi!ento de cirrose e

hepatocarcino!a. JIMM)&( ,((MB II 7Bc IgGL.

(s anticorpos IgM e IgG contra o antígeno core do vírusE

aparece! durante a ase aguda da inec"#o por 7B. MasE enFuanto os

níveis de anti97Bc IgM declina! rapida!enteE os níveis de anti97Bc IgG

persiste! por anos. -ssi!E o anti97Bc IgG é u! indicador Stil para

deter!inar u!a inec"#o prévia co! o 7B. -lé! dissoE o anti97Bc IgG é

o Snico !arcador 7B detectvel durante a cha!ada YQanela sorolgicaZ

da hepatite B agudaE ou seQaE o período do desapareci!ento do 7Bs-gE

Fuando o anticorpo anti97Bs indicando libera"#o do vírusE ainda n#o é

detectvel. JIMM)&( ,((MB II 7Bc IgGL.

$RIN!%$IO DO M&TODO

< u! ensaio i!unoeni!tico JI-L indireto e! ase slidaE onde a

ase slida é u! pente co! doe proQe"Nes JYdentesZL e cada u! dos

dentes est#o sensibiliados e! duas posi"NesV Ponto superior `

i!unoglobulina hu!ana J,ontrole InternoL Ponto inerior ` 7bc-g

reco!binante. JIMM)&( ,((MB II 7Bc IgGL.- Placa %eveladora te! cavidadesE e e! cada u!a contendo

reagentes prontos para uso e! dierentes etapas do testeE Fue é realiado

co! incuba"#o e! cada etapa. -ntes de iniciar o testeE a!ostras de

soro ou plas!a s#o pré9diluídas a 1V10 e adicionadas ao diluente na

pri!eira cavidades da Placa %eveladora e os anticorpos -nti97BcE se

presentes na a!ostraE ir#o ligar9se especiOca!ente ao 7Bc-g no ponto

inerior do dente do Pente. (s co!ponentes n#o ligados s#o lavados naprRi!a etapa. D na etapa seguinteE os IgG anti97Bc capturados nos

pontos Ineriores do denteE e a i!unoglobulina hu!ana nos pontos

superiores J,ontrole InternoL reagir#o co! anticorpos anti9IgG hu!ana

!arcados co! osatase alcalina J>-L. &as prRi!as duas etapasE os

co!ponentes n#o ligados s#o re!ovidos por lavage!. &a Slti!a etapaE

a osatase alcalina ligada ir reagir co! o substrato cro!ogAnico e os

resultados s#o visualiados co!o pontos cina aulados na superície


15/37

14

dos dentes do Pente. JIMM)&( ,((MB II 7Bc IgGL. ste princípio est

resu!ido na *gura 1E a seguir.

Figura 1. Princípio do teste de hepatite viral B IgG. J>onteV

IMM)&( ,((MB II 7Bc IgGL.


• Pipetas de 10 µE 25µ e 100µ.


• 'esoura.

• ,ronU!etro.

• 'ubo de ensaio

• \it contendoV Placa reveladoraE PenteE ,ontroles positivo e

negativo e iluente.




RESULTADOS

&enhu!a das a!ostras analisadas apresentou rea"#o eni!tica de

cor aps a realia"#o do testeE deter!inando9se todos os resultados co!onegativos para o teste de 7epatite B.


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15

TESTE DE 'E$ATITE #IRAL B IgM

FINALIDADE

( teste te! por obQetivo detectar Fualitativa!ente anticorpos IgM

para antígeno core da hepatite B J7BcL e! soro ou plas!a hu!ano. <

utiliado para o diagnstico e !onitora!ento de 7epatite BE ta!bé!

auRilia na dierencia"#o entre 7epatite B aguda ou inec"#o crUnica

reativada e doen"a crUnica assinto!tica ou re!iss#o persistente.

JIMM)&( ,((MB II 7Bc IgML.

( vírus da hepatite B J7BL pertence a u!a a!ília de vírus de &-E

cha!ada HepadnaviridaeE apresentando hepatotropis!o evidente e u!

Snico !eio de replica"#o pelo !ecanis!o de transcri"#o reversa. (

viríon co!pleto ou partícula de aneE consiste e! u!a !olécula de

&- circular protegida por u! capsídeo nuclear _ antígeno de core

J7Bc-gLE e envolvido por u!a lipoproteína de envelopeE Fue é o antígeno

de superície J7Bs-gL. ( 7Bs-g ta!bé! é encontrado no soro co!opartículas ou Ola!entos eséricosE inco!pletos e n#o inecciosos. )!

peFueno co!ponente do nucleocapsídeo do 7BE o antígeno 7Be

J7Be-gLE ta!bé! é detectvel no sangue durante a ase replicativa deste

vírus. JIMM)&( ,((MB II 7Bc IgML.

( vírus da hepatite B te! u!a distribui"#o global e est

a!pla!ente presente. uas principais vias de trans!iss#o s#oV

horiontalE através de conta!ina"#o seRual ou parenteralX e verticalEco! a trans!iss#o congAnita da !#e inectada para o eto. JIMM)&(

,((MB II 7Bc IgML.

-s conseFHAncias clínicas da inec"#o por 7B varia! de

total!ente i!perceptíveisE !aioria dos casosE ou evolui para u!a hepatite

aguda co! icteríciaE podendo haver recupera"#o total dentro de seis

!eses aps o início da doen"a. - !inoria da popula"#o inectada pode

desenvolver hepatite ul!inanteE reFHente!ente seguido de bito. De! u!a propor"#o signiOcativa dos pacientes adultosE o 7B pode


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persistirE progredindo para hepatite crUnica co! desenvolvi!ento de

cirrose e hepatocarcino!a. JIMM)&( ,((MB II 7Bc IgML.

- detec"#o de anticorpos contra o antígeno YcoreZ da 7epatite B

Janti97BcLE e! soro ou plas!a hu!ano é u! i!portante diagnstico na

!onitora"#o desta inec"#o. Geral!ente os anticorpos anti97Bc s#o

encontrados no soro logo aps a soroconvers#o do 7Bs-gE e persiste até

Fue os anticorpos anti97Bs se torne! detectveis. Por issoE se os dois

!arcadores 7Bs-g e anti97Bs n#o estivere! presentesE os anticorpos

anti97Bc pode! indicar u!a inec"#o recente ou u! sangue

potencial!ente inectante. -s duas classes de anticorpos IgG e IgM

s#o encontradas no soro do paciente inectado. (s anticorpos IgM s#o

os pri!eiros a sere! encontrados e atinge! seu pico durante a ase

aguda. D os anticorpos IgG pode! persistir durante anos se! sinais de

inec"#o. J-&'I97B, I- ?E 2001L.

$RIN!%$IO DO M&TODO

< u! teste i!unoeni!tico JI-L e! ase slidaE baseado no

princípio de i!unocaptura. - ase slida é u! pente co! doe proQe"NesJYdentesZL. ,ada dente é sensibiliado e! duas posi"NesV Ponto superior `

anti97Bc de coelho J,ontrole InternoL. Ponto inerior ` anticorpos de cabra

para IgM hu!ano. - Placa %eveladora te! 3 Oleiras cada u!a

contendo reagentes. ( IgM ser capturado pelos anticorpos anti9IgM

nos pontos ineriores dos dentes do Pente. ogoE o IgM anti97Bc

capturado nos pontos ineriores dos dentes e os anti97Bc de coelho dos

pontos superiores J,ontrole InternoLE reagir#o co! 7Bc-g. &a prRi!aetapaE o 7Bc-g ligado reagir co! os anticorpos de coelho anti97Bc

!arcados co! osatase alcalina J>-L. &as prRi!as duas etapas do

testeE os co!ponentes n#o ligados s#o re!ovidos por lavage!. por

O!E na Slti!a etapaE a osatase alcalina ligada ir reagir co! os

co!ponentes cro!ogAnicos. (s resultados s#o visíveis co!o pontos

cina aulados na superície dos dentes do Pente. JIMM)&( ,((MB II 7Bc

IgML. ( princípio est si!pliOcado na *gura 2.


18/37

17

Figura 2.

Princípio do teste de hepatite viral B IgM. J>onteV IMM)&( ,((MB II 7Bc

IgML.


• Pipetas de 10 µE 25µ e 100µ.


• 'esoura.

• ,ronU!etro.

• 'ubo de ensaio

• \it contendoV Placa reveladoraE PenteE ,ontroles positivo e

negativo e iluente.



RESULTADOS


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18

&enhu!a das a!ostras analisadas apresentou rea"#o eni!tica de

cor aps a realia"#o do testeE deter!inando9se todos os resultados co!o

negativos para o teste de 7epatite B .

$!R LÁTE+

FINALIDADE

( teste de P,% teR te! por obQetivo a deter!ina"#o de Proteínas

,9%eativas JP,%L no soro sanguíneoE ta!bé! para a !onitora"#o de

inec"Nes ps9operatriasE controle de doen"as in]a!atrias e inecciosasE

para o diagnsticoE controle terapAutico e aco!panha!ento de

recidivas de diversas doen"asE co!o na ebre reu!tica e na ase aguda

da artrite reu!atide. JP%, ';E 200:L.

(s índices de Proteína , %eativa encontra!9se au!entados e!

Fuadros de ebre reu!ticaE espondilite anFuilosanteE inarto de

!iocrdioE carcino!asE in]a!a"Nes agudasE artrite reu!atideE necrose

tecidualE inec"Nes bacterianas e aps cirurgias. sta proteína ésintetiada pelo ígado e te! a capacidade de induir diversas rea"Nes do

siste!a i!uneE por eRe!ploE ativar co!ple!ento e agocitose. evido a

istoE é considerada u!a das proteínas de ase agudaE ta!bé! co!o u!

!arcador sensível na !onitora"#o de in]a!a"#o aguda e na destrui"#o

de tecidos. JP%, ';E 200:L.

$RIN!%$IO DO M&TODO( princípio do teste unda!enta9se e! u!a rea"#o de aglutina"#o

das partículas de lteR inerteE e! suspens#oE JP%, ';E 200:LE

recobertas co! Ga!a9globulina anti9P,%E especial!ente tratadas para

evitar aglutina"Nes inespecíOcas. - aglutina"#o ocorre Fuando o lteR

entra e! contato a u!a a!ostra co! concentra"#o de P,% igual ou

superior a 3 !g_. JBI( '; P,%E 2011L.



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19

• Pipeta de 50 .

• Ponteiras descartveis

• Palitos descartveis

• !ina de rea"#o co! undo preto

• \it co! os reagentes JteR P,%E controles positivo e negativoL


>oi le!brado Fue n#o se deve utiliar o plas!aE as a!ostras

lipA!icas e he!olisadas.


RESULTADOS

entre as a!ostras utiliadas para a anliseE u!a apresentou

aglutina"#o e logo seguiu9se o procedi!ento do !étodo se!iFuantitaivo.

-ps a realia"#o do !étodo se!iFuantitativoE realiado conor!e

as instru"Nes da bula do Tit testeE veriOcou9se Fue as concentra"Nes daproteína , reativa n#o era! signiOcativasE o Fue leva a conclus#o de Fue a

pessoa apresentaria algu! sinal de inec"#o n#o grave. ste ato oi

conOr!ado aps interrogar o paciente Fue relatou u! início de inec"#o

de garganta.

TESDE DE RUB&OLA IgG

FINALIDADE

( teste de rubéola IgG te! por obeQtivo a deter!ina"#o Fuantitativa

de anticorpos IgG para o vírus da rubéola e! soro ou plas!a hu!ano.

( vírus da rubéola é encontrado principal!ente e! popula"Nes

hu!anas a sua trans!iss#o ocorre principal!ente pelo ar ou por

contato direto. < considerada u!a inec"#o geral!ente de !aniesta"#obenigna e autoli!itanteE caracteriada por erup"#o !aculopapoular


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20

Jsara!poLE ebre tAnue e linoadenopatiaE !as ta!bé! pode! ocorrer

artralgia provisria e artrite leve. JIMM)&(,(MB II %)B


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21

produida indica a Fuantidade de anticorpos IgG presentes nas a!ostras e

s#o co!paradas a colora"#o do controle positivo. JBI(I- %)B


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22

TESTE DE RUB&OLOA IgM

FINALIDADE

( teste rubéola IgM te! co!o obQetivo a deter!ina"#o Fualitativa

de anticorpos IgM para o vírus da %ubéola e! soro ou plas!a hu!ano.

( vírus da rubéola é encontrado principal!ente e! popula"Nes

hu!anas a sua trans!iss#o ocorre principal!ente pelo ar ou por

contato direto. < considerada u!a inec"#o geral!ente de !aniesta"#o

benigna e autoli!itanteE caracteriada por erup"#o !aculopapoular

Jsara!poLE ebre tAnue e linoadenopatiaE !as ta!bé! pode! ocorrer

artralgia provisria e artrite leve. JIMM)&(,(MB II %)B


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23

antígenos revestidos na !icroplaca or!ando co!pleRos antígeno9

anticorpos IgM. -ps a incuba"#o inicialE a !icroplaca é lavada para

re!over os !ateriais n#o ligados. - ni!a ,onQugada anti9-nticorpos IgM

hu!anos é adicionada W !icroplaca e ent#o incubada nova!ente. (s

anticorpos eni!a 9 conQugado anti9IgM hu!ano se liga! aos anticorpos

IgM i!obiliados pelos antígenos presentes. < realiada nova avage!

para re!over os eRcedentes. -ps a realia"#o das etapasE a colora"#o

produida indica a Fuantidade de anticorpos IgM presentes nas a!ostras e

s#o co!paradas a colora"#o do controle positivo. JBI(I- %)BonteV IMM)&(,(MB II

%)B


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RESULTADOS

(s resultados ora! obtidos co!parande9se a intensidade do

ponto inerior de cada dente de a!ostra co! o ponto do dente do

controle positivo.

- a!ostra analisada n#o apresentou ponto co! colora"#o igual ou !ais

intensa Fue a colora"#o do ponto do controle positivoE considerando9se

co!o resultado negativo.

TESTE DE S%FILIS

FINALIDADE

( obQetivo do teste de síOlis é detectar anticorpos JreaginasL da síOlis

nas a!ostras de soroE plas!a ou até !es!o de líFuido cealo9raFuidiano

J,%L. J=>II ` %E 200:L.

( Treponema pallidum é o agente causador da síOlis e leva oorganis!o a produir dois tipos de anticorposV os n#o treponA!icos ou

reaginas JinespecíOcosL e os treponA!icos JespecíOcosL. ( teste %

Jenereal isease %esearch aboratorL desenvolvido por 7arrisE

%osenberg e %iedel na década de $0 é capa de detectar anticorpos

inespecíOcos ou reaginasE presentes no soro de pacientes co! inec"#o

siOlíticaE o Fue per!ite sua utilia"#o co!o prova de triage! sorolgica

para esta doen"a. J% B%E 200$L.- síOlis é u!a doen"a inecciosa hu!ana trans!itida seRual!ente.

-s outras possíveis or!as de trans!iss#o s#o a transus#o de sangue

inectado e a perinatal. ,linica!ente aps u! período de incuba"#oE cerca

de 10 a :0 diasE e! 85[ dos pacientesE ocorre o surgi!ento de u!

cancroE u!a les#o solitria e indolorE caracteriando a síOlis pri!ria. &a

$ até a 10 se!ana logo aps o apareci!ento deste cancroE surge!

sinto!as co!o perda de pesoE cealéiaE anoreRiaE !ialgiaE artralgiaE !al9estarE ebre baiRaE linadenopatia generaliada e eRante!aE o Fue


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25

caracteria a síOlis secundria. < durante este estgio Fue pode! ocorrer

ta!bé!E as !aniesta"Nes do co!pro!eti!ento do siste!a nervoso

central. J%P% =>IIE2011L.

-ps as !aniesta"Nes pri!rias ou secundriasE ocorre o período

cha!ado de síOlis latenteE deter!inado pelos testes sorolgicos positivos

e ausAncia de achados clínicos. Pode ter dura"#o de 1 a 2 anos. e n#o

houver u! trata!ento adeFuadoE pode se !aniestar a síOlis terciriaE

causando go!aE síOlis cardiovascular ou neurossíOlis. J%P% =>IIE2011L.

$RI!%$IO DO M&TODO

( testeE n#o9treponA!icoE para diagnstico da síOlis é baseado na

rea"#o de ]ocula"#o na presen"a de anticorpos JreaginasL no soro ou

plas!a. J%P% =>IIE2011L. ^uando a suspens#o antigAnica do teste é

!isturada W a!ostra e! u!a l!ina apropriada e sub!etida a u!

processo de rota"#o !ecnica por alguns !inutosE as partículas de

colesterol revestidas ir#o ]ocular caso a a!ostra contenha reaginasE

sendo esta ]ocula"#o visível ao !icroscpioE ou per!anecer#o livres e!

suspens#o no caso da a!ostra n#o conter reaginas. J% B%E 200$L.


• !ina escavada

• Pipetas 50µ.


• Microscpio ptico

• 'ubos de ensaio

• olu"#o salina 0E:[

• \it co! os reagentes





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26

RESULTADOS

&enhu!a das a!ostras analisadas apresentou ]ocula"#o aps a

realia"#o do testeE deter!inando9se todas negativas para o teste de

síOlis.

TI$AGEM SANGU%NEA

FINALIDADE

( obQetivo do teste é deter!inar o grupo sanguíneo através do teste

de aglutina"#o das he!cias co! -nti9-E -nti9B e -nti9-BE este Slti!o

acilita o reconheci!ento de certos subgrupos raros e ta!bé! serve para

a conOr!a"#o do grupo sanguíneo -B(. ta!bé! co! a utilia"#o do

-nti9E para a possível deter!ina"#o do ator %h. J(%( -&'I9-E -&'I9 BE

-&'I9-BE 2008L.

( siste!a -B( oi deter!inado por andsteiner e! 1:01 e érepresentado por Fuatro grupos principaisV -E BE -_B e (. J(%( -&'I9-E

-&'I9 BE -&'I9-BE 2008L. andsteiner descobriu Fue os glbulos ver!elhos

podia! ser classiOcados por estes Fuatro tipos conor!e a presen"a ou

ausAncia de antígenos alta!ente reativos e! sua superície. le ta!bé!

co!provou a eRistAncia de anticorpos JaglutininasL para os antígenos - e

B e Fue o soro de u! indivíduo n#o conté! anticorpos para o antígeno

presente e! seus prprios glbulos ver!elhosE !asE contra os Fue n#opossui. J-&'I9-E -&'I9B -&'I9 -B M(&(,(&-E 2000L.

'udo isto de!onstra a i!portncia da co!patibilidade -B( na

prtica transusional. J-&'I9-E -&'I9B -&'I9 -B M(&(,(&-E 2000L.

-OnalE os anticorpos -nti9- e -nti9B pode! causar rea"Nes he!olíticas

transusionais sériasE assi! co!o a oen"a 7e!olítica do %ecé! &ascido.

esta or!aE h a necessidade de se testar tanto o sangue do receptor

Fuanto do doador para a presen"ados antígenos - e_ou B. J(%( -&'I9-E-&'I9 BE -&'I9-BE 2008L.


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$RIN!%$IO DO M&TODO

(s reagentes causa! aglutina"#o direta !acroscpica das he!cias

Fue carrega! os antígenos correspondentes. -ssi!E as he!cias Fue

possue! o antígeno B se aglutina! Fuando !isturadas ao reagente -nti B

e ta!bé! ao reagente -nti -BX -s he!cias Fue possue! o antígeno - se

aglutina! Fuando !isturadas ao reagente -nti9- e ta!bé! ao reagente

-nti -BX -s he!cias Fue possue! antígenos -B aglutina! Fuando

!isturadas aos reagentes -nti -E -nti B e -nti -B. J(%( -&'I9-E -&'I9 BE

-&'I9-BE 2008L. - ausAncia de aglutina"#o e! para todos os reagentes

de!onstra ausAncia de antígenos. J-&'I9-E -&'I9B -&'I9 -B

M(&(,(&-E 2000L. ^uando houver antígenos presentes nas

he!ciasE elas aglutina! Fuando entra! e! contanto co! reagente -nti

. J(%( -&'I9-E -&'I9 BE -&'I9-BE 2008L.

- ,abela 1 a seguirE resu!e o princípio do !étodo do teste co! a

deter!ina"#o do grupo sanguíneo.

A-,i AA-,i

B

A-,i

AB

GRU$O

SANGU%NEOA-,i D

0 -%h

%h 9

0 B 00 0 0

Tabela 1. eter!ina"#o do grupo sanguíneo pela presen"a de

he!oaglutina"#o.


• !ina de vidro.

• \it contendoV %eagentes -nti -E -nti BE -nti -B e -nti .

• -!ostra. )tiliou9se sangue total colhido por pun"#o venosa e

capilar.



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RESULTADOS

(s resultados est#o apresentados na tabela 2 a seguirV

A/0

,ra

A-,i

A

A-,i

B

A-,i

AB

A-,i

D

Ti/

0a-gu-e/1 0 - %h2 0 - %h4 0 0 0 ( %h

Tabela 2. %esultados obtidos pelo teste de tipage! sanguínea.

TESTE DE AALER ROSE

FINALIDADE

( teste ?aaler %ose te! o obQetivo de deter!inar o ator

reu!atide J>%L no soro sanguíneo. J?--% %( BI('


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endocardite bacterianaE !ononucleoseE sarcoidoseE calaarE rubéolaE

neoplasiasE inesta"Nes parasitriasE transusNes de sangueE transplante

renalE síndro!e de Qogren. JBI(,I&E 2003L. Pacientes co! altos títulos

de >% tende! a evoluir co! co!plica"Nes viscerais e a ter resposta

terapAutica insatisatria. J?--% %( BI('oi le!brado Fue n#o se deve utiliar o plas!aE as a!ostras

lipA!icas e he!olisadas.$RO!EDIMENTO T&!NI!O


RESULTADOS

&enhu!a das a!ostras analisadas apresentou aglutina"#o na

realia"#o do testeE deter!inando9se todas negativas para o teste de

?aaler %ose .

&o Slti!o dia do estgio e! i!unologia clínicaE ora! sorteados 4

testes para a u!a nova realia"#o individual das anlises e seus

resultados ora! registrados e! or!a de audosE conor!e o !odelo

ornecido pela supervisoraE e assinados pelo estagirio eetor do teste.

(s testes sorteados ora!V 9h,GE %ubéola IgM e P,% teR.

(s laudos e!itidos est#o e! aneRo neste relatrio.


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4 !ON!LUSO

( setor de I!unologia co!o FualFuer outro setor do aboratrio de

-nlise ,línicasE é u! setor onde se eRige aten"#o e precau"#oE usando

adeFuada!ente os eFuipa!entos de prote"#o individual JPIfsL devido o

!anuseio co! a!ostras de sangue.(s procedi!entos dos testes deve! ser realiados cuidadosa!ente

analisando cada passo e observando possíveis intererentes co!o soros

he!olisados ou lipA!icos e outrosE os Fuais pode! vir a alterar a rea"#o

do teste e conseFHente!ente vir dar u! resultado also9positivo ou

negativoE assi! a9se necessrio a padronia"#o da eRecu"#o dos

!étodos para u! resultado !ais seguro e conOvel. ,o! issoE o papel do

ar!acAutico no setor ve! a ser o aco!panha!ento da realia"#o correto


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-(''. GoiniaV oles %eag. Fuip. para aboratrios tda.E 2010. Bulade Tit de anlise laboratorial.

BI(,I& BI(I- %)B


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,lienteV Gesiane Gon"alves >erreira PaQarinen %egistroV01.280$2011

IMUNOLOGIA

E;aeV P,% teRM5,/7/: %ea"#o de aglutina"#o das partículas de lteR inerteE e!

suspens#oE recobertas co! Ga!a9globulina anti9P,%.

Re0ul,a7/: o houve aglutina"#oE presu!indo valores de concentra"#o

de P,% na a!ostra !enores Fue 3!g_.

alor de reerAnciaV ,oncentra"#o de P,% 3 !g_.

(bs.V

&o!e do aluno%eg. -cadA!ico 11000::28ata de e!iss#oV 28_0$_2011

( presente laudo é parte das atividades realiadas e! estgiosupervisionado e n#o possui FualFuer valor clínico.

ANE+O 2. audo do Ra!e de 9h,G


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Laboratório da Faculdade Presidente Antônio Carlos

etor de I!unologia ` ala 111

%ua aler!oE 2:: ` BethniaE Ipatinga 'el.V J41L 210:92400 9 0800 62$ 24 00

,lienteV Gesiane Gon"alves >erreira PaQarinen %egistroV01.280$2011

IMUNOLOGIAE;ae: 'este de gravide.

M5,/7/: I!uno9anlise cro!atogrOca para detec"#o Fualitativa da

Gonadotropina ,oriUnica 7u!ana J7,GL no soro.

Re0ul,a7/: ,oncentra"#o de 7,G inerior a 25 !)I_!.

alor de reerAnciaV ,oncentra"#o de 7,G superior a 25 !)I_! apresenta

altas chances do desenvolvi!ento de gravide. ,oncentra"#o de 7,G

inerior a 25 !)I_! apresenta baiRas chances do desenvolvi!ento de

gravide.

(bs.V

&o!e do aluno%eg. -cadA!ico 11000::28ata de e!iss#oV 28_0$_2011

( presente laudo é parte das atividades realiadas e! estgiosupervisionado e n#o possui FualFuer valor clínico.


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ANE+O 3. audo do Ra!e de %ubéola IgM

Laboratório da Faculdade Presidente Antônio Carlos

etor de I!unologia ` ala 111%ua aler!oE 2:: ` BethniaE Ipatinga

'el.V J41L 210:92400 9 0800 62$ 24 00

!lie-,e: Gesiane Gon"alves >erreira PaQarinen %egistroV01.280$2011

IMUNOLOGIAE;ae: %ubéola IgM

M5,/7/: I!unoeni!etria de cor e! ase slida para detec"#o Fualitativa

indireta de anticorpos IgM para rubéola no soro ou plas!a hu!ano.

Re0ul,a7/: Intensidade de cor inerior ao controle positivo.

#al/r 7e re

docslide.com.br_relatorio-de-estagio-em-imunologia-farmacia.docx

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