controle biologico e quÍmico de nematÓides em cana de...

Encontro de Ensino, Pesquisa e Extensão, Presidente Prudente, 22 a 25 de outubro, 2012 6

CONTROLE BIOLOGICO E QUÍMICO DE NEMATÓIDES EM CANA‐DE‐ACÚCAR

Rita de Cássia Lima Mazzuchelli1; Fabio Fernando de Araújo2.

1‐ Engenheira Agrônoma, Mestranda do Curso de Pós‐Graduação em Agronomia da UNOESTE. 2 – Eng. Agrônomo Professor Doutor – UNOESTE. E‐mail: [email protected].

RESUMO O objetivo do presente trabalho é de avaliar a aplicação de Bacillus subtilis como controle biológico de nematoides em cana‐de‐açúcar (variedades SP81‐3250 e RB867515) comparando com o controle químico convencional (Carbofuran). O experimento está sendo conduzido na Usina Alto Alegre – Unidade Floresta – Presidente Prudente, em uma área com histórico de infestação de nematoides, no município de Caiabu. Encontrou‐se em média 280 nematoides a cada 100g de solo, sendo 180 do gênero Meloidogyne, 100 do gênero Pratylenchus. Os tratamentos foram controle, Bacillus subtilis AP‐3 aplicados no sulco de plantio, Bacillus subtilis AP‐3 aplicados trinta dias após o plantio e tratamento químico com carbofuran no sulco de plantio. O delineamento empregado foi de blocos ao acaso com cinco repetições. O controle biológico de nematoides através da aplicação de Bacillus subtilis no momento do plantio da cana‐de‐açúcar proporcionou controle de nematoides de maneira semelhante ao controle químico com Carbofuran. Palavras‐chave: Controle biológico; controle químico; fitonematóides.

INTRODUÇÃO

A cana‐de‐açúcar (Saccharum spp.) é uma das culturas mais importantes no cenário

nacional, devido ser a matéria‐prima utilizada pela indústria sucroalcooleira para a produção de

seus dois principais produtos o açúcar e o álcool (BENETT et al., 2011).

Já foram encontradas mais de 275 espécies de nematoides parasitos de plantas, filiadas a,

pelo menos, 48 gêneros em raízes e no solo da rizosfera da cana‐de‐açúcar (DINARDO‐MIRANDA

et al., 1996).

Além do dano causado pela utilização de nutrientes das plantas os nematoides do gênero

Meloidogyne acarretam grandes danos ao sistema radicular, estes parasitos injetam toxinas

resultando em deformações “galhas”, tornando‐o o mal desenvolvido e pouco eficiente,

consequentemente podem ocorrer reduções na produtividade da área agrícola (MOURA et al.,

1999; DINARDO‐MIRANDA, 2005).

Os nematoides do gênero Pratylenchus penetram e saem livremente das raízes, já que não

há nenhuma fase ou estágio que possa ser denominado infestante. Eles penetram as raízes,

nutrem‐se das células causando lesões pequenas, mas que aumentam gradualmente. Os mesmos

acarretam aberturas nas raízes, onde penetram fungos e bactérias patogênicas. Estes nematoides

Colloquium Agrariae, vol. 8, n. Especial, jul–dez, 2012


abandonam o sistema radicular quando encontram condições desfavoráveis, migrando para o

solo. (LORDELLO, 1986).

A aplicação de nematicidas diminui o número de nematoides, contribuindo assim para um

melhor desenvolvimento das plantas, aumentando a sua produtividade na ordem de 15% para

variedades suscetíveis (DINARDO‐MIRANDA et al., 1995), porém a utilização de nematicidas

químicos nem sempre têm sido satisfatórias, evidenciando assim necessidades de pesquisas na

área (BARROS, et al., 2000). Dinardo‐Miranda et al. (1995) concluíram que a utilização do

nematicida do grupo químico do carbofurano resultou em evidente redução das populações de

nematoides nas raízes, resultando em incrementos significativos na produção.

Dentre as bactérias envolvidas na supressividade de patógenos nos solos Bacillus subtilis é

a mais estudada (BETTIOL et al., 2009). Em experimento em casa de vegetação Cardozo e Araújo

(2009) observou que a utilização de Bacillus subtilis promoveu o crescimento das plantas e a

redução de nematoides do gênero Meloidogyne em cana‐de‐açúcar.

O objetivo do presente trabalho foi o de avaliar a aplicação de Bacillus subtilis como

controle biológico de nematoides em cana‐de‐açúcar (variedades SP81‐3250 e RB867515)

comparando com o controle químico convencional (Carbofuran).

METODOLOGIA

O experimento foi desenvolvido na Usina Alto Alegre – Unidade Floresta – Presidente

Prudente, em uma área com histórico de infestação de nematoides, no município de Caiabu a uma

latitude 22º00'44" sul e a uma longitude 51º14'08" oeste, a uma altitude de 520 metros.

Foram retiradas amostras de solo e encaminhadas ao laboratório de Microbiologia da

Unoeste para identificação de espécies de fitonematoides e contagem populacional. Encontrou‐se

em média 280 nematoides a cada 100g de solo, sendo 180 do gênero Meloidogyne, 100 do gênero

Pratylenchus.

Foi utilizada no experimento a estirpe AP‐3 de Bacillus subtilis, descrita como produtora de

antibióticos e promotora de crescimento de plantas (ARAUJO et al., 2005) a qual foi multiplicada

no laboratório de Microbiologia da Universidade do Oeste Paulista – UNOESTE, por sete dias, a

28°C em meio sólido de ágar nutriente. Após este período as células foram raspadas e transferidas

para 100 mL de água esterilizada a qual foi agitada com objetivo da completa dissolução da

bactéria, formando uma suspensão homogênea com concentração aproximada de 1,0 x 109 células

por mL.



Foram utilizadas no experimento duas variedades de cana‐de‐açúcar susceptíveis a ação de

nematoides, SP 81‐3250 e RB 867515 (MARIN, 2012). A aplicação do controle biológico foi

efetivado com quatro tratamentos: controle, Bacillus subtilis AP‐3 aplicados no sulco de plantio,

Bacillus subtilis AP‐3 aplicados trinta dias após o plantio. Como referência de controle de

nematoides foi também efetivado o tratamento químico com carbofuran no sulco de plantio.

A suspensão de células bacterianas (100 mL) obtida anteriormente foi dissolvida em 12,5

litros de água, aplicando‐se 0,250 litros para 10 metros lineares de sulco de plantio. O tratamento

químico com carbofuran foi realizado dissolvendo 0,6 litros do produto comercial, em 18 litros de

água, aplicando 0,360 litros para 10 metros lineares de sulco de plantio.

O delineamento empregado foi de blocos ao acaso com cinco repetições. Cada parcela

possuía 6 metros de largura, por 10 metros de comprimento com cinco sulcos espaçados a 1,5 m.

Considerando três sulcos centrais de cada parcela, para as avaliações, para tentar minimizar o

efeito da bordadura. A área total para cada variedade possui 62 metros de comprimento por 31,5

metros de largura.

Para o plantio da cana‐de‐açúcar, foram distribuídos nos sulcos dois colmos, cruzando a

ponta de um colmo com o pé do outro, proporcionando uma distribuição de 17 a 20 gemas por

metro linear de sulco. As mudas de cana depositadas no fundo do sulco foram cortadas em toletes

com 2 a 3 gemas, aplicados os tratamentos e após o recobrimento de solo com máquina.

Aos 90 dias após o plantio foi realizada coleta de amostras em três pontos de cada parcela,

constituindo em uma amostra composta de solo e raízes para análise da população de

nematoides. A extração dos nematoides das raízes foi realizada em alíquotas de 20 g de cada

amostra pela técnica de COOLEN & D’HERDE (1972), efetuada imediatamente após as coletas. Os

nematoides do solo foram extraídos de alíquotas de 100 cm3 pela técnica de JENKINS (1964). Após

será realizada a contagem com auxílio da câmara de Peters, no microscópio óptico, para análise de

nematoides dos gêneros Meloidogyne e Pratylenchus.

Os dados obtidos foram analisados estatisticamente pelo programa SISVAR, sendo utilizado

o teste Skott‐Knott a 5% para comparação das médias.

RESULTADOS

A população de nematoides do gênero Meloidogyne aos 90 dias nos tratamentos

com Carbofuran e a rizobactéria aplicada no momento do plantio diferiram significativamente em

relação ao tratamento com a rizobactéria aplicada após 30 dias do plantio e do controle para a

variedade SP81‐3250, o controle proporcionado pelo tratamento com carbofuran e a rizobactéria



aplicada no plantio proporcionaram uma redução de 50% no número de nematoides nas raízes.

Para a variedade RB867515 todos os tratamentos realizados diferiram significativamente do

controle, apresentando uma redução no número de nematoides em torno de 47% referentes ao

controle (Tabela 1).

Os nematoides do gênero Pratylenchus apresentaram os menores valores populacionais na

avaliação realizada aos 90 dias nos tratamentos com carbofuran, rizobactéria aplicada no sulco no

momento do plantio, seguidos pela aplicação da rizobactéria aos 30 dias na pós‐emergência, já o

controle apresentou os maiores valores populacionais em ambas as variedades utilizadas no

experimento (Tabela 1). Na variedade SP81‐3250 os tratamentos com carbofuran e rizobactéria

aplicada no momento do plantio diminuíram a infestação de Pratylenchus na ordem de 55% em

relação ao controle. Para a variedade RB867515 os tratamentos com carbofuran e rizobactéria

aplicada no sulco de plantio proporcionaram redução de 57% para o tratamento controle.

Tabela 1: Número de nematoides do gênero Meloidogyne e Pratylenchus encontrados no solo aos

90 dias após o plantio do experimento referente às variedades SP81‐3250 e RB867515.

Meloidogyne spp. Pratylenchus spp.

SP81‐3250 RB867515 SP81‐3250 RB867515

Tratamentos Formas ativas em 100 cm3 de solo

Carbofuran 112,0 b1 128,0 b 240,0 c 240,0 c Rizobactéria no sulco de plantio 144,0 b 144,0 b 272,0 c 224,0 c Rizobactéria em pós‐emergência 224,0 a 160,0 b 400,0 b 336,0 b Controle 288,0 a 272,0 a 576,0 a 544,0 a

1. Médias seguidas de mesma letra não diferem estatisticamente pelo teste Scott‐Knott (5%).

Os tratamentos com carbofuran, e rizobactéria aplicada no sulco no momento do plantio, e

na pós‐emergência apresentaram os menores valores populacionais de nematoides do gênero

Meloidogyne nas raízes em relação ao controle na variedade SP81‐3250, diminuindo a infestação

nas raízes em torno de 37%. Para a variedade RB867515 os menores valores populacionais foram

encontrados para o tratamento com carbofuran e a rizobactéria aplicada no momento do plantio,

que reduziram em 40% o número de nematoides nas raízes comparadas ao controle (Tabela 2).

Para os nematoides do gênero Pratylenchus sua população nas raízes das plantas não

apresentaram diferenças nos tratamentos, inclusive ambas as variedades utilizadas no

experimento (Tabela 2).



TABELA 2: Número de nematoides do gênero Meloidogyne e Pratylenchus encontrados nas raízes

aos 90 dias após o plantio do experimento referente às variedades SP81‐3250 e

RB867515.

Meloidogyne spp. Pratylenchus spp.

SP81‐3250 RB867515 SP81‐3250 RB867515

Tratamentos Formas ativas em 50 g de raízes

Carbofuran 276,0 b1 204,0 b 240,0 a1 204,0 a Rizobactéria no sulco de plantio 312,0 b 300,0 b 240,0 a 264,0 a Rizobactéria em pós‐emergência 360,0 b 346,0 a 276,0 a 252,0 a Controle 504,0 a 420,0 a 312,0 a 288,0 a

1. Médias seguidas de mesma letra não diferem estatisticamente pelo teste Scott‐Knott (5%).

DISCUSSÃO

Os resultados obtidos no estudo evidenciam um controle de nematoides através da

aplicação de Bacillus subtilis, o que demonstra que a produção de substâncias tóxicas ou

repelentes realizadas por rizobactérias podem desestimular a penetração ou alimentação de

nematoides (FREITAS, 2001). Conforme o constatado por Silveira (2001) as rizobactérias podem

atuar na infectividade, virulência e agressividade do patógeno, e também nos processos de

infecção, desenvolvimento de sintomas e reprodução. Este fato foi evidenciado por Araújo et al.

(2002) que constatou que a utilização de Bacillus subtilis afeta a orientação dos nematoides,

reduzindo a migração para a raiz, já que o B. subtilis interfere na produção de exsudados das

raízes, que servem como orientação para nematoides, alterando assim a reprodução e orientação

do parasita em direção as raízes, diminuindo a sua população.

A aplicação do nematicida Carbofuran também reduziu a população de nematoides no

experimento, efeito semelhante foi observado por Dinardo‐Miranda e Fracasso (2010) que

constataram que a aplicação do nematicida Carbofuran reduziu a população de nematoides dos

gêneros Meloidogyne e Pratylenchus em avaliação realizada aos 90 dias após o plantio de cana‐de‐

açúcar.

CONCLUSÃO

O controle biológico de nematoides através da aplicação de Bacillus subtilis no momento

do plantio da cana‐de‐açúcar proporcionou controle de nematoides de maneira semelhante ao

controle químico com Carbofuran.



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