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Componentes BásicosSistema de agitação;Sistema de distribuição de O2;Sistema de controle de espuma;Sistema de controle detemperatura;Sistema de controle de pH;Portas de amostragem;Sistema de limpeza eesterilização;Linhas para esvaziar o biorreator.

Sistema de Agitação

• Consiste do agitador e das chicanas(usadas para aumentar a turbulência e a eficiência de mistura).

• Prover boa mistura e aumentar a transferência de massa;

• Prover condições apropriadas para a quebra das bolhas;

Sistema de AgitaçãoTransferência de massa

SITEMAS DE AGITAÇÃO

• i) transferência de massa da bolha para a interface gás-líquido;

• ii) transporte através da interface gás-líquido;

• iii) difusão do filme de líquido que rodeia a bolha;

• iv) transporte através da massa de líquido;

• v) difusão através do filme de líquido estagnado que rodeia as células;

• vi) movimento através da interface líquido-célula;

• vii) difusão através do sólido até a célula individual, caso as células estejam associadas em flocos, agregadas ou imobilizadas;

• viii) transporte através do citoplasma para o local de reação.


• Fluxo de oxigênio = mol de O2/(cm2s)• = kG (cG,c – cGi,c) (5)• = kL (cL,c – cLi,c) (6)• Onde KG e KLsão as coeficientes de transferência no gás e no

líquido. cG,c – cGi,c são as concentrações dos componentes c na bolha de gás e líquido e cL,c – cLi,c são as concentrações na interface.

• Como as concentrações interfaciais não são usualmente acessíveis, consideramos um coeficiente global de transferência de massa KL e a concentração total (cL* - cL),

• onde cL* é a concentração do líquido em equilíbrio com a fase gás (M cL* = cG).

• Portanto, o Fluxo de oxigênio = KL(cL* - cL) (7)


)()(int **

2 llllllO ccaKV

AccK

reatornolíquidodevolume

erfacialáreafluxoQ

Taxa de transferência de oxigênio por unidade de volume é dada por:

Fatores que influenciam na demanda de oxigênio:Espécie do microorganismo ou célula;Fase do crescimento;Fonte de carbono;Natureza do processo.


A transferência de massa depende:da solubilidade do soluto no líquido;mistura ( mistura, investimento e gasto de energia, danos

as células, enzimas ou produtos);área interfacial entre as 2 fases ( área, taxa de

transferência de massa). Para aumentar a área interfacial: (1)adicionar mais material ao reator; (2) diminuir o tamanho da bolha;viscosidade do líquido ( viscosidade, transferência de

massa).

SISTEMAS DE AGITAÇÃOkLa = (Coeficiente volumétrico de transferência de massa)

kLa diminui com o aumento do volume do

líquido

kLa aumenta com a área sup

kLa é maior quando as pequenas chicanas

estão presentes

SISTEMAS DE AGITAÇÃO

• Métodos para determinação do kLa

• Reações químicas (MÉTODO SULFITO)

• Nesses métodos o gás reage com o composto adicionado a fase líquida e este consumo é monitorado e relacionado com coeficiente desejado.

• O reagente deve ser suficiente para que todo o oxigênio seja consumido.

MÉTODOS PARADETERMINALAÇÃO DO KLa

• MÉTODO SULFITO

• Na2SO3 + ½ O2 Na2SO4

(Cu2+ ou Co2+)

)( *lll

l CCakdt

dC

esteq

l

l

l

l ft

SO

Cakou

t

C

Cak

2

3

**

11

festeq = 16/126CL*, cteCL, concentração de oxigênio dissolvidot, tempoC, concentração de oxigênio consumido SO3

-2, concentração de sulfito consumido (método titulométrico)


• MÉTODO SULFITO

Limitações do método:1.A reação tem que ser rápida o suficiente para

reduzir a concentração no líquido até zero, mas não tão rápida que não seja possível medi-la;

2.A reação é função do pH, T e concentração de catalisador (tentar encontrar uma região onde o coeficiente seja independente do Cu2+ ou Co2+);

3. Influência da qualidade da água;


• MÉTODO DINÂMICOPrimeiramente tem-se um biorreatoraerado em estado estacionário. Em dado instante corta-se a entrada de ar do sistema e monitora-se a queda da concentração de oxigênio no meio de cultura. Após um tempo de 20 a 60 segundos, abre-se novamente a entrada de ar do sistema.Durante este período de tempo considera-se que não há formação de biomassa no biorreator, desta forma a variação da concentração de oxigênio édescrita pela equação:

dC

dtk a C C q XL O *

2(10)


• MÉTODO DINÂMICO

(13)

dC

dtk a C C q XL O *

2

Rearranjando os termos da eq.(10) obtem-se:

(11)

ak

Xq

L

O2Para um sistema particular C* pode ser considerado constante e agrupados

Cq X

k aCO

Li

*

2 (12)

onde Ci é a concentração de oxigênio dissolvido original do sistema em estado estacionário.

Substituindo a Equação (12) na Equação (11), obtem-se:

dC

dtk a C CL i


• MÉTODO DINÂMICO

• integrando a Equação (12), o kLapode ser isolado e calculado:

k a

C C

C C

t tL

i

i

ln 0

0

onde Ci, C0 e C são diferentes valores de concentração de oxigênio dissolvido mostrados na figura.


• CORRELAÇÕES MATEMÁTICAS• Um a determinada correlação se ajusta para um determinado

reator e em certos regimes de operação. A maioria das correlações pode ser escrita da forma:

k, , , constantes;us, velocidade superficial do gás [m/s];Pg, potência em sistema aerado;V, volume do líquido

V

Pukak

gsL

(15)


• Outras correlações ...Variáveis que afetam o kLaVelocidade do arTipos e sistemas de agitaçãob.1) tipo de palheta empregadab.2) número de jogos de palhetasPropriedades físicas do mostoVelocidade do agitadorTemperaturaQuantidade de sólidosTaxa de aeraçãoVolume de meioAdição de chicanasPotência de aeração (depende a velocidade superficial do gás)

(18)


Agitação

não-mecânica natural (trabalho exercido por gás da fermentação)forçada (introdução de gás pela base do reator)

mecânica Aeradonão-aerado


Potência de agitação em processos não aerados (P)Re, Fr, NpEq. de Rushton para Np (c/ e s/vórtice; Escoamento laminar e turbulento)

Potência de agitação em processos aerados (Pg)a) Aplicar fatores de correção à potência encontrada para processos não aerados

a.1) Relação Gráficaa.2) Relação Analítica

b) Utilizar correlações empíricas entre potência e aeraçãoEq. de Cooper et al.Eq. de Bartolomeu et al.Eq. de Moritz & MeirelesEq. de Fukuda et al.


• CORRELAÇÕES MATEMÁTICAS

SITEMAS DE AGITAÇÃOIMPELIDORES

O nº de impelidores depende da altura de líquido no reator.

Classificação:Fluxo radial: o líquido éinicialmente dirigido a parede do reator, ie, ao longo do raio do tanque. Não é tão eficiente quanto o axial. Maior quantidade de energia é necessária para geral o mesmo fluxo que o axial;

Algumas marcas comerciais: tipo Arrowhead, de pás curvas,de pás retas verticais, Impelidor Rushton,Impelidor Smith.


Característica das lâminas: são responsáveis por gerar regiões de turbulência para quebra das bolhas. Esta alta turbulência pode danificar materiais como cristais e precipitados e também células, como fungos filamentosos e células animais.


Fluxo axial: o líquido é dirigido para a base do reator, paralelo ao eixo do agitador. São deficientes em gerar turbulência e quebra das bolhas de ar, o que os tornam indesejáveis para cultivos aerados

São utilizados para processos sensíveis como em reatores de cristalização e precipitação. São também utilizados vastamente em culturas de células animais.Algumas marcas comerciais: Impelidor Lightnin 320, Impelidor KPC – KROMA, Impelidor Pitched


ChicanasPrevinem a formação de vortex e um pouco de mistura axial mesmo com impelidores de fluxo radial.

Sem chicanas

Com chicanas


• Sistema de distribuição de gás• Compressor, sistema de esterilização

de ar, distribuidor de ar, sistema de saída de ar.

• Esterilização do ar de entrada e de saída: prevenir a contaminação.

• Método: em reatores de até 10.000 L utiliza-se filtração.

• Membranas acomodadas em pregas, criando um filtro compacto e grande área superficial.

• Para reatores maiores que 10.000 L a opção pela membrana torna-se muito cara. Atualmente, utiliza-se vapor para a esterilização.

Até 5 Litros

Até 1000 Litros


• Sistema de distribuição de gás

• Em reatores pequenos existe um condensador na saída dos gases, onde são condensados material volátil e vapor d’água.

• Isto minimiza a perda de água e voláteis por evaporação.

• Também previne contra o entupimento do filtro

SISTEMAS DE AGITAÇÃO• Sistema de distribuição de gás

PressãoPositiva


• Quebra o ar de entrada em pequenas bolhas.


Quando a velocidade de agitação é pequena, as bolhas não serão quebradas tendendo a subir direto para a superfície. Além disso, irão se acumular no eixo do agitador, coalescendo e diminuindo a transferência de oxigênio.Quando a velocidade de agitação é grande, as bolhas pequenas irão circular por todo o reator e terão o seu tempo de residência aumentado.

rápidalenta


• Taxa de vazão de ar

• É comumente reportada em termos de volume de ar por volume de meio por minuto ou vvm.

líquidodovolume

ardeavolumétricvazãovvm

)(

min)/(

LV

LFvvm

liq

ar

SISTEMAS DE AGITAÇÃO• Métodos de aeração• Culturas paradas• Pouca ou nenhuma energia é utilizada para aeração (depende da

transferência de O2 pela superfície). • Usado em testes de laboratório onde o suprimento de oxigênio não é

crítico. • Frascos são usualmente utilizados para pequenas culturas de células

animais.• Culturas em superfície: produção de ácido cítrico, cultivos semi-sólido.• .


• Métodos de aeração• Cultivos Agitados• Utilizados em cultivos de pequena escala;• Quando comparado ao cultivo parado, altas taxas de

transferência de oxigênio podem ser encontradas;• Mesmo assim, limitações na transferência serão

inevitáveis quando se tenta alcançar altos níveis de densidade celular..

SISTEMAS DE AGITAÇÃO• Métodos de aeração• TANQUES AGITADOS• Em reatores não aerados o oxigênio é transferido do espaço livre

acima do líquido; • A agitação quebra continuamente a superfície do líquido e aumenta a

área de transferência;• O efeito da velocidade de agitação na entrada do gás em um

biorreator de 2 L é mostrado abaixo:

SISTEMAS DE AGITAÇÃO• Métodos de aeração

300 rpm

450 rpm

750 rpm

SISTEMAS DE AGITAÇÃO• 1. LEITO FLUIDIZADO• Borbulhamento sem agitação mecânica também pode ser

utilizado para aeração e agitação. • Dois tipos destes biorreatores são: coluna de bolhas e

fermentadores airlift.

Biorreatores de borbulhamento: são utilizados mais comumente para culturas sensíveis as pás dos impelidores como fungos e células vegetais. H/D colunas (8:1 – 20:1)Altura da coluna:Aumenta o hold up do gás;Aumenta o tempo de residência da bolha;Região de alta pressão hidrostática perto da entrada de ar, na base do reator.

1

• LEITO FLUIDIZADO


Parâmetro mais importante para performance do reator: Tamanho da bolha. Determina a velocidade de subida, tempo de residência do gás e governa o hold up do gás (proporção de líquido aeradoque é ocupado pelo gás; volume de bolhas em relação ao volume de líquido), a área interfacial e taxa de transferência de massa G/L.

• AIR-LIFT


Diferem do número 1)9, pela presença de um tubo central concentrico (2) ou lateral, ou ainda com circulação externa (3)As principais funções deste tubo são:Aumentar a mistura axial no reator;Reduzir a coalescência das bolhas que circulam numa mesma direção (igual a do líquido);Equalizar as forças de cisalhamento (édistribuída uniformemente pelo reator).

1 2 3


• Riser: região onde as bolhas de gás são liberadas Pode ser dentro ou fora do tubo central. A ascensão das bolhas causa o fluxo de líquido na direção vertical;

• Para contrabalançar, o líquido flui em direção descendente no downcomer. Isto permite a circulação do líquido e aumenta a eficiência de mistura quando comparado a coluna de bolhas.

• A circulação das bolhas em uma direção uniforme e a velocidade relativa uniforme, reduz a coalescência e resulta em maiores valores de kLaquando comparado a coluna de bolhas.


• Zona de Alívio: • adiciona volume ao reator;• reduz a espuma;• minimiza a circulação de bolhas pelo downcomer devido ao súbito

alargamento do topo do reator que diminui a velocidade da bolha e a libera do fluxo do líquido. Assim previne-se a entrada de bolhas ricas em CO2 no downcomer;

• redução da perda de meio devido a formação de aerossol (solução coloidal em que a fase dispersora é gasosa e a fase dispersa ésólida ou líquida)

• Os reatores airlift são utilizados com fluidos menos viscosos e quando há necessidade de agitação mais suave e transferência de oxigênio a baixo custo.

• Os reatores agitados convencionais possuem eficiência de mistura deficiente qdo comparados ao airlift.


• Biorreator airlift híbrido• pode possuir 1 ou mais

impelidores axiais localizados no tubo central;

• Alcançam alto padrão de fluxo direcional do que é possível com reatores airliftconvencionais;

• Assim, tem maior capacidade de suspender sólidos e reduzir gradientes axiais de concentração que ocorrem em reatores airlift altos e afetam negativamente a performance.


• Poucos estudos têm sido feitos comparando as performances de biorreatores híbridos e airlifts convencionais e tanques agitados;

• Chisti e Jauregui-Haza (2002) apresentam estudos para a transferência de oxigênio e mistura em tais reatores.

• Principais conclusões:• Uso de impelidor de fluxo axial no downcomer:• circulação de líquido, mistura, transferência G/L quando

comparado a operação sem o agitador, consumo de energia;• concentração de fibras (~conc. De micélio), kLa;• A aeração superficial contribui (pouco) para a transferência total

G/L;• O aumento ou não da performance de mistura depende da

intensidade da agitação mecânica. A altas taxas de aeração (ug0,04ms-1) a utilização ou não de agitador não muda as características de mistura.


• Sistema de controle da formação de espuma

• Formação excessiva de espuma podem :

• Bloquear os filtros de saída de ar;

• Aumentar a pressão do biorreator (perda de meio, danos ao reator e mesmo a quem está operando)

• O controle é feito com a adição de agentes antiespumantes baseados em silicone ou óleos vegetais que desestabilizam a espuma pela redução da tensão superficial.

SISTEMAS DE AGITAÇÃO• Fatores que afetam a formação de espuma e adição de

antiespumante:• Meio de fermentação: meios ricos em proteínas tendem a formar

mais espuma. Muitas células produzem moléculas tipo detergente (ácidos nucleicos e proteínas excretadas na lise das células ou compostos lipídicos produzidos durante o crescimento);

• Produtos excretados durante o processo;• Taxa de aeração e velocidade do agitador (, formação de espuma);• O volume livre no reator: em sistemas nos quais a espuma é

formada facilmente, o volume de trabalho deve ser reduzido para facilitar o controle de espuma. Quanto maior o volume livre, maior a probabilidade da espuma colapsar por causa do seu próprio peso;

• Temperatura do condensador: em reatores de laboratório uma temperatura mais baixa pode ajudar no controle da espuma. A densidade da espuma aumenta quando ela se move de uma região mais quente para a região fria do condensador, causando o colapso da espuma;

• Quebradores mecânicos de espuma: impelidor de alta velocidade. A bolha é puxada para o impelidor e colapsa por ação de forças mecânicas. Em pequenos reatores de laboratório são utilizados quebradores ultrasônicos, que geram vibrações de alta frequênciaresponsáveis por quebrar as bolhas da espuma.


Controle da Espuma

ON-OFF. Uma parte fica no mosto e a outra acima do nível do líquido;

Quando a espuma atinge a superfície do sensor que está em cima, existe a produção de uma corrente elétrica que é detectada pelo controlador, resultando na ativação da bomba.

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